- 为您推荐:
按照DNA扩增时升温介质的差异,PCR仪可以被分为变温式流式PCR仪、水浴式PCR仪以及变温铝块式PCR仪。
变温式流式PCR仪
原理:按照空气流的动力学原理,将冷热气流作为介质来对温度进行升降。
优点:改变温度的速度非常快,有良好的扩增效果,对于微量、快速PCR非常适用。形状不能限制反应器,也没有必要在管外涂液体石蜡。复杂的变温程序可以使用电脑很容易地设定。重量较轻的便携式仪器可以很轻易地被制作成功,对于外出作业很适用。
缺点:把室内温度作为温度的下限,很难控制低温,具有很多的空气流的动力学要求,为了让各管温度均匀,需要精心的设计。
水浴式PCR仪
原理:水浴式PCR仪本身有3个不同温度的水浴,用机械装置将带有反应管的架子移位和升降温度,使温度循环。
优点:导热介质为水,有很大的热容量,可以使温度保持均衡。对于反应管的形状不作特殊的要求,有很稳定的扩增效果以及温度改变迅速。扩增产物具有良好的特异性以及运行效率较高。
缺点:高温水浴不稳定,水面需要涂上液体石蜡。需要花较长的时间才能改变水浴温度,复杂程序(如套式PCR)的操作不容易被实施,有较大的体积,温度下限受到室内温度的影响。
变温铝块式PCR仪
原理:热源是由电阻丝、导电热膜、热泵式珀尔帖半导体元件制作制作而成。升温带有凹孔的铝块,使用自来水、制冷压缩机或半导体来降温。
优点:导热性能好,各管的扩增有良好的一致性,当反应管规格相同时,不需要将石蜡油涂在管外,温度转换能够使用微电脑来进行调节。在扩增完成后,仪器制冷部件可以把温度降到4摄氏度,保存样品过夜。
缺点:压缩机制冷重量大、启动慢、滞后时间长。铝块显示温度要领xian管内反应液温度,反应管需要特制且与铝块凹孔形状紧密吻合并且薄壁耐。当温度改变时,铝块的热容量不能够很快旳克服。
PCR的创建
核酸体外扩增的设想Z早是由Khorana 在1971提出的。“经DNA变性,与合适的引物杂交,用DNA聚合酶延伸引物,并不断重复该过程便可合成tRNA基因。”
然而当时还没有成熟的基因序列分析方法,也没有热稳定DNA聚合酶以及引物合成操作很困难。这种设想达不到实际的效果。并且在70年代初出现了分子克隆技术,一种克隆和扩增基因的途径被提供了,因此人们遗忘了Khorana的设想。
1985年,Kary Mullis在Cetus公司工作期间,发明了PCR。Mullis要合成DNA引物来进行测序工作,却常为没有足够多的模板DNA而烦恼。
1983年4月的一个星期五晚上,他开车去乡下别墅的路上,猛然闪现出“多聚酶链式反应”的想法。
1983年12月,Mullis用同位素标记法看到了10个循环后的49 bp长度的diyi个PCR片段;
1985年10月25日申请了PCR的ZL,1987年7月28日批准(ZL号4,683,202 ),Mullis是diyi发明人;
1985年12月20日在Science杂志上发表了diyi篇PCR的学术论文,Mullis是共同作者;
1986年5月,Mullis在冷泉港实验室做ZT报告,全世界从此开始学习PCR的方法。
06-19
06-19
06-19
①本文由仪器网入驻的作者或注册的会员撰写并发布,观点仅代表作者本人,不代表仪器网立场。若内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们立即通知作者,并马上删除。
②凡本网注明"来源:仪器网"的所有作品,版权均属于仪器网,转载时须经本网同意,并请注明仪器网(www.yiqi.com)。
③本网转载并注明来源的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品来源,并自负版权等法律责任。
④若本站内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱:hezou_yiqi
基因扩增仪产品导购
基因扩增仪产品资料
基因扩增仪产品问答
基因扩增仪产品厂家
最新资讯
看过该文章的人还看了以下文章