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细胞融合作为一种实验方法,在单克隆抗体的制备,膜蛋白的研究方面,应用非常广泛。
融合过程
有内外两层细胞膜,细胞融合首先在外层发生,然后再到内层,所以,就会有两种融合通道出现,通过这两种通道转移细胞体内物质。病毒膜与目标细胞融合时,仅仅有一种融合通道出现,也就是说,在目标细胞中不能够找到引起融合的基因,仅仅可以在病毒中找到造成融合的基因。然而通过EFF-1发生的细胞融合却是一个双向融合过程,在两个相互融合的细胞中需要EFF-1出现才行。
研究进展
1838年,脊椎动物肿瘤细胞可以在体内自发地融合,从而使得多核的肿瘤细胞产生被Muller观察到。
1858年,肿瘤组织、正常组织与发炎组织中的多核细胞现象由Virchow描述了。
1873年,多核的血细胞也会存在于天花病人的血液中的现象被Luginbuhl观察到。
1875年,脊椎动物(蛙类)的血液细胞发生融合的过程首次由Lange观察到。
细胞在无脊椎动物中合并的现象分别被Cienkawski在1876年,Buck在1877年,Geddes在1880年发现了。
1958年,仙台病毒会对动物细胞融合产生触发的效应被日本学者冈田(Okada)发现了。
1974年,聚乙二醇(PEG)化学融合法被华裔加拿大学者高国楠创立了。
1975年,小鼠B-淋巴细胞和骨sui瘤细胞由Kohler和Milstein成功地融合了,并且使得能分泌稳定单克隆抗体的杂交瘤细胞产生了。
20世纪80年代,电融合技术出现了。
植物或者微生物原生质体的制备
有一层坚韧的细胞壁位于植物和许多微生物细胞,如果想要对这样的细胞促使融合,那么单个细胞就必须先得到。想要获得植物原生质体或微生物原生质球,则必须将细胞壁除去。所以植物和微生物细胞的融合通常又叫做原生质体融合。
动物单个细胞的获得
1、组织的获得
2、组织的消化
方法的选择
细胞融合按照对象不同,方法和条件也会出现差异。
微生物细胞融合:仅有PEG法适合。
植物细胞融合:电融合法以及PEG法比较常用。
诱导动物细胞融合:电融合法、PEG法以及仙台病毒HVJ诱导均比较适合。
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