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在自发或人工诱导下,两个细胞或原生质体融合,使得一个杂种细胞形成,即是细胞融合(cell fusion)。细胞融合使得异核体(heterokaryon)形成、通过细胞有丝分裂异核体进行核融合、Z终使得单核的杂种细胞形成为细胞融合的基本过程。作为一种实验方法,在单克隆抗体的制备,膜蛋白的研究方面,细胞融合应用非常广泛。
植物细胞融合技术
植物细胞融合和常规育种技术相结合,能够为优良材料被筛选出来提供希望。而且双亲的遗传物质为体细胞杂交的来源,但其并不是体细胞杂交,这正是所期望的对于作物的改良。
植物细胞融合主要具有以下方面的作用:
研究原生质体新培养体系将会使得融合率有所提高。一种新的GX原生质体培养体系由Yamagishi等设计出来,使不对称杂交属内种间细胞融合率有所增加。
抗病新材料通过植物细胞融合进行培育,使得新的物种合成,细胞质基因转移。
细胞融合技术发展后,能够融合人参和虫草的细胞,使得新的品种产生,并且它们各自特有的药效为新的品种所具备,如此意义将非常重大。
在原生质体内引入病毒、细菌、DNA、质粒、各种细胞器等外源遗传物质,从而为导致细胞遗传性的改变提供可能性,将可行的方法提供给了某些珍稀植物的快速繁殖、植物的复壮等。在无性系的快速繁殖和有用物质生产、种质保存、植物育种等方面应用。
到目前为止,扩大变异为植物细胞融合技术的主要目的,同时其发展方向为往另一个体细胞内导入抗药性和胞质雄性不育等细胞质基因,可能使得新的核质杂种形成。若虽然植株还不能形成,却有有用性状的细胞系可以获取,那么就能够通过对细胞快速大量繁殖并且利用。
植物细胞融合在育种上有重要的应用价值于生产应用研究方面,有性杂交不亲和性的界限可能通过对不同种间、属间甚至不同科间原生质体的融合进行诱导而打破,对各种基因型广泛地进行组合,进而使得有性杂交方法所无法获得的新型杂种植株有形成的可能性。
基因枪的注意事项
1、建议现用现配亚精胺,或者在零下20~℃冰箱中(时间不超过1个月)储存,如果保存时间过长或没有保存好,亚精胺会发生降解,从而会对DNA吸附于金属微粒表面的能力产生影响。
2、对于植物材料转化,受体材料决定了微粒子zi弹载体的选择。除此以外,可裂圆片的规格必须对应微粒zi弹载体。
3、建议在枪击前将质粒DNA的储存浓度调至1ug/u1,如此对于微粒zi弹制备时的DNA取样非常的有利。建议以0.75~1Pg/mg(金粉)作为质粒DNA与金粉形成复合体的比例比较好。
4、对于转化率产生影响的重要参数有质粒DNA的纯度和浓度,0.75~1/1gDNA为通常每枪的量。
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