北京温分公司食品中三聚氰胺检测仪器配置及分析介绍

内容节点: 概述; 实验/设备条件; 样品提取; 实验/操作方法; 实验结果/结论; 仪器/耗材清单

食品中三聚氰胺检测方法包 三聚氰胺分析方法包组件清单 包括： 1色谱柱（4.6*250mm,5m,150.）1支 2混合型的阳离子交换柱(Cleanert PCX 60mg/3mL)50支 3三聚氰胺标准品1瓶（500mg，99.5%） 4三聚氰胺分析方法手册1份赠送 5庚烷磺酸钠（25g/瓶） 理化性质 三聚氰胺：英文名melamine，简称三胺，学名三氨三嗪，别名蜜胺氰尿酰 胺三聚酰胺分子式：C3N6H6 C3N3(NH2)3 ；分子量：126.12 物理性能：白色结晶粉末，无毒，无味；相对密度：1570kg/m3 ；熔点：在常压 下，354分解；升华温度：300；溶解性：能溶于甲醇甲醛乙酸热乙 二醇甘油吡啶；微溶于水乙醇；不溶于苯和四氯化碳，水溶液呈弱 碱性 化学性能：三聚氰胺是一种重要的氮杂环有机化工原料，显弱碱性，能够与各种 酸反应生成三聚氰胺盐；在强酸或强碱液中，三聚氰胺发生水解，胺基逐步被羟 基取代，生成三聚氰酸二酰胺三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸；三聚氰胺与醛类反 应生成加成化合物；三聚氰胺与甲醛反应制成树脂，三聚氰胺树脂是一种多种用 途的材料，防火耐热且有很高的稳定性，用于生产塑料地板砖，厨房用具，防 火纤维，商业滤膜，胶水和阻燃剂 固相萃取(SPE)方法 1 固相萃取(SPE)柱的选择： 三聚氰胺呈弱碱性(弱阳离子化合物)，净化过程一般选择阳离子交换柱混 合型的阳离子交换柱(PCX)通过将磺酸基团(-SO3H)键合在极性高聚物聚苯乙烯/ 二乙烯苯（PEP）吸附剂上，具有阳离子和反相两种吸附机理，并具有以下优点： 1) 可通过两种不同溶液的洗涤(水/一定pH值的缓冲溶液和有机溶剂)，使样 品更干净，提高检测的灵敏度 2) 批次重复性好 3) 回收率高，重现性好，即使小柱跑干也可以得到较高回收率 2 样品前处理步骤： 2.1标准样品配制： 取50mg三聚氰胺标准品，以20%甲醇溶解定容至50mL得到1000ppm的标 准溶液，使用时，以提取液(1%三)稀释至所要的浓度 2.2提取： 称取饲料/奶粉样品5g (或牛奶10ml)，加入50ml 1%三提取液，充 分混匀，加入2mL 2%乙酸铅溶液，超声20min然后取部分溶液转移至10mL 离心管中，8000rpm/min离心10min，取上清液3mL过混合型阳离子交换小柱 (PCX) 2.3净化(PCX小柱，60mg/3mL) ： 1) 活化及平衡：3mL甲醇，3mL水 2) 上样：加入提取液3mL 3) 淋洗：3mL水；3mL 甲醇；弃去淋洗液并将小柱抽干 4) 洗脱：5mL 5%氨化甲醇(v/v)洗脱(5%氨化甲醇的配制：5mL氨水+95mL 甲醇) 5) 浓缩：50，氮气吹干，20%甲醇/水定容至2mL 2.4检测： HPLC-UV检测方法 三聚氰胺在传统的C18柱上保留很差，需要用离子对试剂色谱方法才能有 良好的保留与分离，按照美国食品药品监督管理局（FDA）的三聚氰胺检测方法 和ZG农业部颁部的三聚氰胺检测方法，采用亲水色谱柱，均能得到良好的结果， 三聚氰胺的ZG农业部颁标准检测方法 色谱柱： C18 4.6×250mm 缓冲液：10mM柠檬酸, 10mM庚烷磺酸钠 流动相：缓冲溶液:乙腈=85:15 进样量：样品用缓冲液溶解成约0.1mg/mL，进10uL 流速：1.0mL/min 柱温：40 波长：240nm GX液相色谱仪