液相色谱仪样品检测要点

内容节点: 概述; 实验/设备条件; 样品提取; 实验/操作方法; 实验结果/结论; 仪器/耗材清单

液相色谱仪是一种精度极高的检测仪器，在环境食品生物医药行业都有广泛的应用本文简单介绍在液相色谱仪检测分析样品的几个要点
流动相比例调整：我国药品标准中没有规定色谱柱的长度及填料的粒度，因此每次检测一个新样品时都须重新调整流动相，所以建议**次检验样品时配备适量的流动相即可，以免浪费制备流动相的标准，主峰一般应调至保留时间为6~15分钟为宜弱电解质的流动相其重现性更不容易达到，应当注意充分平衡色谱柱
样品配制：样品溶液从待检测样品原料中提取出来之后，须经氮吹仪提纯结晶之后配置成一定浓度的溶液，再使用溶剂过滤器进行过滤处理，方可进入仪器除此之外，盛放溶液的溶剂避免使用塑料材质，塑料容器常含有高沸点的增塑剂，可能释放到样品液中造成污染，而且还会吸留某些药物，引起分析误差某些碱性药物会被玻璃容器表面吸附，影响样品中药物的定量回收，因此必要时应将玻璃容器进行硅烷化处理
进样量：检测样品的进样量一般为10L，主要根据定量环的规格而定，目前多数HPLC系统采用定量环规格有10L20L和50L，因此应注意进样量是否一致
记录时间：样品进入色谱柱后，**次测定时，应先将空白溶剂对照品溶液及供试品溶液各进一针，并尽量收集较长时间的图谱（30分钟以上），以便确定样品中被分析组分峰的位置分离度理论板数及是否还有杂质峰在较长时间内才洗脱出来，确定是否会影响主峰的测定
计算：检测结果的计算主要根据色谱图，色谱图是色谱仪定性定量分析的依据色谱图的横轴表示保留时间，可以作为色谱仪器实现定性分析的依据；色谱峰上的极大值是定性分析的依据，而色谱峰所包罗的面积则取决于对应组分的含量，定量分析的依据需要注意的是，由于有些对照品标示含量的方式与样品标示量不同，有些是复合盐有些含水量不同有些是盐基不同或有些是采用有效部位标示，检验时须注意
液相色谱仪检测样品注意事项如下：流动相滤过后，注意观察有无肉眼能看到的微粒纤维，至少过滤三次；柱在线时，增加流速应以0.1ml/min的增量逐步进行，一般不超过1ml/min，反之亦然否则会使柱床下塌，叉峰柱不线时，要加快流速也需以每次0.5ml/min的速率递增上去（或下来），勿急升（降），以免泵损坏安装柱时，请注意流向，接口处不要留有空隙样品液请注意滤过（注射液可不需滤过）后进样，注意样品溶剂的挥发性测定完毕请用水冲柱1小时，甲醇30分钟如果第二天仍使用，可用水以低流速（0.1~0.3ml/min）冲洗过夜（注意水要够量），不须冲洗甲醇另外需要特别注意的是：对于含碳量高封尾充分的柱，应先用含5~10%甲醇的水冲洗，再用甲醇冲洗冲水的同时请用水充分冲洗柱头（如有自动清洗装置系统，则应更换水）

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