鸡白细胞介素2（IL-2）ELISA试剂盒使用说明书

内容节点: 概述; 实验/设备条件; 样品提取; 实验/操作方法; 实验结果/结论; 仪器/耗材清单

鸡白细胞介素2（IL-2）酶联免疫分析（ELISA） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定鸡血清，血浆及相关液体样本中白细胞介素2（IL-2）的含量 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡白细胞介素-2（IL-2））水平用纯化的鸡白细胞介素-2（IL-2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入鸡白细胞介素-2（IL-2），再与HRP标记的IL-2抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色颜色的深浅和样品中的鸡白细胞介素-2（IL-2）呈正相关用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鸡白细胞介素-2（IL-2）浓度 试剂盒组成： 试剂盒组成 48孔配置 96孔配置保存 说明书 1份 1份 封板膜 2片（48） 2片（96） 密封袋 1个 1个 酶标包被板 1×48 1×96 2-8保存 标准品：360ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8保存 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8保存 酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8保存 样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8保存 显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8保存 显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8保存 终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8保存 浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶 2-8保存 样本处理及要求： 1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心 3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心胸腹水脑脊液参照实行 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集离心20分钟左右（2000-3000转/分）仔细收集上清检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份离心20分钟左右（2000-3000转/分）仔细收集上清保存过程中如有沉淀形成，应再次离心 5. 组织标本：切割标本后，称取重量加入一定量的PBS，PH7.4用液氮迅速冷冻保存备用标本融化后仍然保持2-8的温度加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分离心20分钟左右（2000-3000转/分）仔细收集上清分装后一份待检测，其余冷冻备用 6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验若不能马上进行试验，可将标本放于-20保存，但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性