提取
(1) 取0.5 g样品于15 mL离心管中,加入2 mL正己烷混匀,加入10 mL乙腈,涡旋混合2 min,6000 rpm下离心2 min,收集上清液;
(2) 向步骤(1)下层残渣中加入10mL乙腈,按照步骤(1)重复提取一次,收集上清液。
(3) 合并步骤(1)、(2)的上清液,在40 ℃下减压蒸至低于5 mL,待净化。
净化 ProElut AFT-2 12 mL(Cat.#65906)
a活 化:向柱中加入10 mL乙腈,流出液弃去;
b上 样:加入待净化液,收集流出液;
c洗 脱:加入20 mL 乙腈,收集流出液,合并步骤(b)、(c)流出液;
d衍 生:将流出液在40 ℃下减压蒸至完全干燥,依次加入0.5 mL正己烷和0.5 mL三氟乙酸,旋紧玻璃塞充分混匀衍生液,45 ℃静置10 min,吹干衍生液,用流动相定容至1 mL。
色谱条件 色谱柱:Diamonsil C18(2), 250 mm×4.6 mm, 5 μm(Cat# 99603)
流 速:1.0 mL/min
进样量:20 μL
柱 温:30 ℃
检测器:荧光检测器,Ex:365 nm;Em:435 nm
流动相:A:水 B:异丙醇+乙腈=3+2; A : B=8 : 2
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