1.样品准备
提取
(1)称取1 g均质样品于15 mL离心管中,加入8 mL乙酸提取液 *和4 mL。
(2)振荡4 min, 4000 rpm下离心4 min,收集上清液;
(3)下层残留物用5 mL、5 mL 乙酸提取液重复提取两次,合并三次提取液;作为上样液,待净化。
*乙酸提取液:10%乙酸溶液(用50%甲醇水溶解)
2.SPE柱净化——ProElut PXC 500 mg/12 mL(Cat.# 68207)
(1)活 化:依次加入6 mL甲醇,6 mL水,流出液弃去;
(2)上 样:将上样液加入柱中*,流出液弃去;
(3)淋 洗:依次用10 mL水,3 mL甲醇淋洗,流出液弃去;
(4)洗 脱:10 mL10%氨水(甲醇:水=3:7)溶液洗脱,收集洗脱液;
(5)重新溶解:在50 ℃下用减压蒸馏将洗脱液浓缩近干,然后用1%乙酸重新定容至1mL,上机供HPLC分析。
分析条件
色谱柱:Spursil C18 250×4.6mm ID,5μm(Cat.#82001)
流 速:1.0 mL/min
检测器:UV 210nm
柱 温:30 ℃
进样量:20 μL
流动相:50mmol/L磷酸二氢钾(1L磷酸二氢钾溶液需加入300uL磷酸):乙腈(92:8)
适用于饲料中万古霉素的测定
万古霉素
方法: HPLC 基质:
本文采用Vanquish Core DGLC自动化样品前处理的Online-SPE 方法,借助HPLC
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