前言
维生素 B12 与食物中的蛋白质有关。在摄取之后,胃内的盐酸会分离出其中的维生素 B12,随后,维生素 B12 会与一种名为内因子 (intrinsic factor) 的化合物结合,以便被肠道吸收。由于可以促进新细胞生成、细胞维护以及 DNA 合成,维生素 B12 对人体健康至关重要。
国家市场监督管理总局、国家卫生健康委员会联合发布了GB 5009.285-2022《食品中维生素B12的测定》等新标准,新国标于2022年12月30日实施。新标也扩大了维生素B12检测的适用范围,不仅适用于婴幼儿食品、乳及乳制品的检测,还可适用于肉、肉制品、食谷物、烘焙食品、果冻、饮料等样品基质的检测,检测基质的扩展,样品基质更复杂,目标物含量更低,采用液相色谱法测定维生素B12,婴幼儿食品和乳品、肉与肉制品的检出限为0.2μg/100g,定量限为0.5μg/100g。
实验部分
仪器
采用包含以下模块的赛里安LC6000高效液相色谱仪系统:
· 集成六通道真空脱气的SCION LC6100四元泵
· SCION LC6210 高精度、低残留自动进样器
· SCION LC6310 柱温箱
· SCION LC6410 紫外检测器/ SCION LC6430二极管阵列检测器
液相色谱条件
表1 方法参数
试剂及标准品
三氟乙酸溶液(CAS: 76-05-1), 乙腈溶液(HPLC级), 维生素B12 (产品批号:S074085)
结果
示例图谱
图1 维生素B12 200ng/ml示例色谱图
图2 维生素B12 3D紫外吸收全谱图(190nm-400nm)
标准曲线
将维生素B12标准溶液依次稀释为30、60、90、150、200ng/ml,使用外标法进行标准定量 ,以浓度为横坐标峰面积为纵坐标作外标工作曲线 ;维生素B12响应值和浓度呈良好的线性关系,所得到的相关系数在0 .9999以上,详见图3。
图3 维生素B12标准曲线
重现性
维生素B12峰面积RSD%1.18(n=6),保留时间RSD%0.30(n=6)结果见表2
表2 维生素B12定量定性
检出限
维生素B12检出限为10ng/ml,维生素B12Z小检出限见图4
图4 维生素B12Z小检出限
结论
本应用使用带有紫外检测器/二极管阵列检测器和反相 C18色谱柱的赛里安LC6000快速分析食品中的维生素B12的方法,该方法配置合理、线性良好、灵敏度高可以满足并优于国家标准GB 5009.285-2022食品中维生素B12的测定方法。
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