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仪器网/ 行业应用/ 解决方案/ 大肠杆菌质粒DNA的提取

大肠杆菌质粒DNA的提取

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内容节点
概述
实验/设备条件
样品提取
实验/操作方法
实验结果/结论
仪器/耗材清单
以下介绍一种Z常用的方法：
碱裂解法：此方法适用于小量质粒DNA的提取，提取的质粒DNA可直接用于酶切PCR扩增银染序列分析方法如下：
1接1%含质粒的大肠杆菌细胞于2ml LB培养基
237振荡培养过夜
3取1.5ml菌体于Ep管，以4000rpm离心3min，弃上清液
4加0.lml溶液I(1％葡萄糖，50mM/L EDTA pH8.0，25mM/L Tris-HCl pH8.0)充分混合
5加入0.2ml溶液 II(0.2 mM/L NaOH，1％ SDS)，轻轻翻转混匀，置于冰浴5 min
6加入0.15m1预冷溶液III(5 mol/L KAc，pH4.8)，轻轻翻转混匀，置于冰浴5 min
7以10，000rpm离心20min，取上清液于另一新Ep管 湘仪H2050R台式高速冷冻离心机
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