- 单细胞 单细胞培养的关键因素
生物可以根据构成的细胞数目分为单细胞生物和多细胞生物。单细胞生物只由单个细胞组成,而且经常会聚集成为细胞集落。地球上Z早的生物大约在距今35亿年前至41亿年前形成,原核生物是Z原始的生物,如细菌和蓝绿藻且是在温暖的水中发生。
单细胞培养的关键因素
1.培养基条件
(1)植物激素和其他的附加成分
在对激素和其他附加成分进行使用时,需要对悬浮培养细胞的分散性进行考虑。
(2)调节基本培养基
设计培养基的时候,通常都是是基于诱导愈伤组织形成的培养基进行调整,或者基于预培养的培养基进行调整。
(3)酸碱度
2.培养的周期
概念
具有一起始密度的单细胞,由开始培养到细胞的数量和总重量停止增长的过程,叫做一个培养周期。
培养周期的四个时期
(1)延迟期
细胞刚刚开始分裂或者很少分裂。
(2)对数生长期
细胞的生长速度保持恒定,数量快速的增加。这一时期,细胞的数量达到Z高。
(3)减缓期
细胞数量的增长速度下降。
(4)静止期
细胞停止分裂,细胞的数目不变。
3.细胞的起始密度
细胞密度:单位体积内细胞的数量,即是每毫升培养液中含有多少个细胞。
起始细胞密度:开始培养时,单位体积内细胞的数量。
培养方式不同,对于细胞起始密度的要求也不同。
(1)微室培养和看护培养
培养时的细胞的Z低有效密度很重要。
(2)平板培养
按照植物的种类对细胞的Z低有效密度进行考虑。通常使用植板率来衡量平板培养的效果。
植板率指的是在平板上形成细胞团的百分率。
影响植板率高低的因素
a.培养时的细胞的Z低有效密度。
b.和所用的细胞的活力相关。通常处于对数生长期的细胞具有Z高的植板率,而处于静止期的细胞具有Z低的植板率。
(3)悬浮培养
Z低的有效密度通常是(0.5-2.5)*105个/mL。不同的植物细胞有着不同的有效密度值,然而都有它们Z合适的有效密度。
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