蛋白质含量可以用液相吗
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求一个可以用液相色谱测定螺旋藻蛋白质含量的具体方法?需要亲发一份详细的操作步骤哦。非常感谢。要详细的步骤哦。
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- 刑淑英 2017-09-26 00:00:00
- 一个完整的样品测定方法需要大量的文献资料考察、方法摸索、方法验证。这么大量的工作基本是1-2个月的工作量。你提问连个悬赏都不给,实在是有点抠门。我只能给出大致方向,具体方法还要你自己找专家去问,来这里回答问题的只能叫专业人士,很
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- 丿灬东赫银尘丶 2016-08-08 13:11:09
- 一个完整的样品测定方法需要大量的文献资料考察、方法摸索、方法验证。这么大量的工作基本是1-2个月的工作量。你提问连个悬赏都不给,实在是有点抠门。 我只能给出大致方向,具体方法还要你自己找专家去问,来这里回答问题的只能叫专业人士,很少有专家。 diyi,明确测定目标,将目标物从样本中提取出来。 螺旋藻藻蓝蛋白的提取常分为蛋白溶出和蛋白沉淀两个过程。藻蓝蛋白是属于胞内蛋白质, 要使其溶出首先要破碎细胞的细胞壁、细胞膜使其以溶解的状态溶于提取液中, 再采用适宜的方法将其沉淀,在提取过程应保持蛋白的活性,本实验中,将经细胞破碎后的粗提液,先用磷酸缓冲液做溶剂把蛋白质溶解出来,再用离心法除去不溶物即得藻蓝蛋白初提取物,再经壳聚糖亲和沉淀-活性炭吸附,透析除盐,除掉其他杂质,Z后结合阴离子交换层析即可得到高度纯化的藻蓝蛋白。 (参见:螺旋藻藻蓝蛋白分离方法研究,百度搜索,百度文库中文章) 第二,寻找合适的测定方法,准确定量。 其实利用铅电极测定及总氮量测定法测定总蛋白含量是非常简单易行且准确的。但是你要求是用液相法测,那就非常麻烦了。因为不同的蛋白质会被液相分离开来,每种蛋白质都需要用对照品进行准确定量,Z终再折算成总氮量进行计算。不仅复杂、难以操作,而且其前期对色谱峰进行定性的工作就已经是非常大的工作量了。所以用液相分离是一种得不偿失的检测方法。
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