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- 现在进行时521 2013-10-09 00:00:00
- 顾名思义,单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物,然后再通过实际样品溶液,就能得到吸光结果。 双光束型则是通过一个斩光轮(mirrored chopper wheel)将一束光分成两束,分别测量对照样品和实际样品。可以Z小化光漂移(lamp drift)和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮,而是利用一种光束分光器来代替,将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度,所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。2. 光源和检测方法(LIGHT SOURCES AND DETECTION) 分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。例如Amersham Biosciences of Piscataway公司的GeneQuant II能在230、260、280、320、595和600nm的波长下测量样品。果果需要更大的灵活性,研究者可以考虑一种更高性能的宽光谱仪器,可以程序性地进行ELISAs分析和比色分析。 紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长,通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。 Varian of Palo Alto公司的Cary Deep UV和Hitachi High Technologies of Tokyo的U-7000 Automated Vacuum UV System就是这样的仪器。 一些仪器具有多种光源供选择:紫外光、可见光和甚至红外光(780 nm 至3,000 nm)。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分(大约380 nm 到800 nm)。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。3. 分光光度计的带宽(bandwidth) 很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。 为了测量吸光值,分光光度计制造商通常使用光电倍增管(photo-multiplier tubes,PMTs)和光敏二极管。PMTs提供快速的反应时间和良好的灵敏度,并且可以在紫外光谱调节至特定的范围。但一些制造商依赖于光敏二极管的动态范围在数秒内行使所有的光谱测量。4. 样品类型(SAMPLE FORMAT) 在大部分的样品类型中,分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。微孔板主要是满足高通量的需要和大规模的实验室需求。但尽管对于小实验室来说,制造商仍然提供了多种容器转换器来满足通量的要求和减少实验时间。 用小试管cuvette装样品容量一般从1 μl-5ml,并且一些仪器装备了各种样品固定物来满足各种改变需要。体现了柔韧性。5. 数据管理(DATA MANAGEMENT) 大部分单机型的分光光度计包含了驱动仪器运行和管理数据的软件。高性能的仪器,通常与PC机一起联用,需要从制造商提供额外的软件。同时用户也可以选择升级软件以满足他们的需要。 另外一个值得考虑的因素是数据的Z终使用。各独立实验室都有各自感兴趣的实验结果。
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紫外分光光度计,就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。紫外分光光度计可以在紫外可见光区任意选择不同波长的光。物质的吸收光谱就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量。
紫外分光光度计在使用时有哪些需要注意的地方?
紫外分光光度计使用注意事项
1.空白溶液与供试品溶液必须澄清,不得有浑浊。如有浑浊,应预先过滤,并弃去初滤液。
2.测定时,除另有规定外,应以配制供试品溶液的同瓶溶剂为空白对照,采用1cm的石英吸收池。
3.比色皿使用时注意不要沾污或将比色皿的透光面磨损,应手持比色皿的毛面。待测液制备好后应尽快测量,避免有色物质分解,影响测量结果。
4.测得的吸光度A Z好控制在0.2~0.8之间,超过1.0时要做适当稀释。
5.开关试样室盖时动作要轻缓。
6.不要在仪器上方倾倒测试样品,以免样品污染仪器表面,损坏仪器。
7.比色皿在盛装样品前,应用所盛装样品冲洗两次,测量结束后比色皿应用蒸馏水清洗干净后倒置晾干。若比色皿内有颜色挂壁,可用无水乙醇浸泡清洗。
8.吸收池应选择配对,否则要引入测定误差。在规定波长下两个吸收池的透光率相差小于0.5%的吸收池作配对,在必要的情况时,须在Z终测量扣除吸收池间的误差修正值。
9.在测定时或改测其它检品时,应用待测溶液冲洗吸收池3~4次,用干净绸布或擦镜纸擦净吸收池的透光面至不留斑痕(切忌把透光面磨损)。
(内容来源于网络)
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对一些保质期较短的食品检测要求操作简便、快速,比如海鲜产品、鲜牛奶的保质期短,对它的检测必须要求简便、快速,尤尼柯生产的紫外可见分光光度计就可以很好满足此要求。
准确度高
对于一般的分光光度法来说,浓度测量的相对误差在1%~3%范围内,如采用示差分光光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。
紫外可见分光光度计在食品检测中的应用
当分子中含有1个或更多的生色基团(即具有不饱和键的原子基团),辐射就会引起分子中电子能量的改变。常见的生色基团有:
>C=O,一N=N一,一N=O,一C;N,>C=S
如果2个生色基团之间只隔1个碳原子,则形成共轭基团,会使吸收带移向较长的波长处(即红移),且吸收带的强度显著增加;当分子中含有助色基团(0时),也会产生红移效应。常见的助色基团有:
-OH,-NH2,-SH,-Cl,-Br,-I
这些基团在食品和食品添加剂中大量存在,所以紫外分光光度计在食品检测中的应用有着wu可比拟的优越性,其主要用途有以下几点:
1、光度测量
在食品生产中为了保证有颜色的饮料产品的颜色一致,可以在可见光区用紫外可见分光光度计来测定其吸光度值,使色差符合产品要求。在发酵业中也可通过测定吸光度值来确定产品的发酵完成程度。对于一些成分比较单一的产品也可通过测定吸光度值来确定产品合格与否。比如,判定营养增强剂维生素Bl的质量就可以在400nm下测定其吸光度值,当其值不超过0.020时,即可确定为合格品。
2、成分的定性分析
物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量,相应发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特性波长处的ZD吸收峰(峰值)和波形图来判断某种物质是否存在。在食品生产中会使用一些食品添加剂,为了确定食品添加剂的质量,可以用紫外可见分光光度计对其进行光谱扫描。例如,对食品中涉及的一些复合甜味剂、复合防腐剂和复合鲜味剂等就可以用紫外可见分光光度计进行一个全面扫描以排除违禁添加剂的使用。另外,此方法还可以在物质结构分析方面作为红外光谱(IR)、核磁共振(NMR)、质谱(Ms)等方法的辅助手段。
3、成分的定量分析
对于食品卫生安全检测中一些含量需要严格控制的成分项目可以用紫外可见分光光度计来准确检测。
结论
总之,紫外可见分光光度计几乎可以满足广大中小食品企业食品检测分析的需要。随着科学技术的发展,紫外可见分光光度计还可和其他分析仪器联机使其应用范围更加广泛,能在更多的领域发挥作用。
- 紫外可见分光光度计维护保养
紫外可见分光光度计作为分析实验室中常见的一款仪器,因其分析速度快、准确度高、灵敏度高等特点而备受青睐,仪器都有自己的寿命,因此在日常使用中需要对紫外可见分光光度计做好维护保养,延长仪器的寿命和避免因仪器的问题而对ZZ分析结果造成影响。作为紫外可见分光光度计的操作员,需要掌握一些简单的维护保养工作,来确保自己后续分析工作的进行。紫外可见分光光度计维护保养具体有以下几点:
1、仪器需要定期更换干燥剂,避免单色器盒的色散元件受潮,影响仪器的基本使用,在仪器使用完毕后,用防尘罩将仪器盖住,并放置防潮硅胶,避免仪器部分受潮发霉。在高湿热的地区,或者是久置不用的情况,尤其需要注意仪器的防潮措施,zui好经常通电驱潮。
2、为了延长光源的使用寿命,在使用时应尽量减少开关次数,短时间工作间隔内可以不关灯。刚关闭的光源灯不要立即重新开启。如果光源灯亮度明显减弱或不稳定,应及时更换新灯。
3、遇到电压波动较大的情况,需要配备稳压器。
4、仪器需要安装在室内,并经常清洁反射镜,透镜等部件的灰尘,切勿用手直接碰触,如有指印,必须使用专业的擦净纸擦拭,污染严重的需要更换配套的元器件。
5、每次仪器使用结束后,应仔细检查样品室内是否有溶液溢出,若有溢出必须随时用滤纸吸干。
6、比色皿使用完后,要溶剂冲洗4~5次,如不能洗干净,则用乙醇冲洗,再改用纯化水或有机溶液冲洗干净。
7、做好仪器的技术指标鉴定,一般每半年检查一次,一旦发现某项技术指标有问题,可根据具体问题做一些排查,找出问题原因,如果找不出原因或找出原因无法解决则应及时联系工程师。
- 紫外可见分光光度计使用注意事项
紫外可见分光光度计是基于紫外可见分光光度法原理,利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射吸收来进行分析的一种分析仪器,紫外可见分光光度计由于灵敏度高、分析速度快、操作简便等特点广泛应用于水质、食品等的分析。
在日常使用过程中为了延长仪器的使用寿命及获得准确的结果,因此日常操作中需要注意对仪器的规范使用,具体有哪些需要注意的地方,下面列举了一些常见的紫外可见分光光度计使用注意事项:
1、开机前将样品室内的干燥剂取出,仪器自检过程中禁止打开样品室盖。
2、使用的吸收池必须洁净,并注意配对使用。量瓶、移液吸管均应校正、洗净后使用。
3、供试品溶液浓度除各该品种已有注明外,其吸收度以在0.3~0.7之间为宜。
4、仪器应安装在太阳不能直接照射到的地方,室内阳光太强会影响仪器的使用寿命。
5、电源与仪器、仪器与计算机、计算机与打印机要连接完好,避免通电时对仪器造成损伤。
6、比色皿使用时注意不要沾污或将比色皿的透光面磨损,应手持比色皿的毛面。
7、比色皿在盛装样品前,应用所盛装样品冲洗两次,测量结束后比色皿应用蒸馏水清洗干净后倒置晾干。若比色皿内有颜色挂壁,可用无水乙醇浸泡清洗。
8、待测液制备好后应尽快测量,避免有色物质分解,影响测量结果。
9、在日常使用的时候,严禁把液体溶剂放置于仪器的表面上,如果出现液体外泄的情况,应及时进行清洁处理。
10、开机前应检查确定样品室与池架上没有放置任何物品,以免因光束被阻挡而无法通过光源能量检查和波长检查。
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