全部评论(1条)
-
- sunmoon9927 2017-03-06 00:00:00
- 取新鲜的血液(紫管),加入3倍体积红细胞裂解液,混匀后室温放置10分钟,10,000 rpm离心1分钟。彻底吸弃上清,收集白细胞沉淀。每100-200μl血液收集的白细胞沉淀加入1ml TRIzol。室温放置5min,使样品充分裂解。4℃12,000 rpm 离心10分钟,取上清()。每1ml TRIzol加入200μl氯仿,剧烈振荡混匀后室温放置3-5 min,自然分相。4℃ 12,000rpm离心10-15min。样品会分成三层:黄色的有机相,中间层和无色的水相,RNA主要在水相中,把水相转移到新管中(小心吸取水相)在上清中加入等体积冰冷的异丙醇(),室温放置10-20min。4℃ 12,000 rpm离心10min,弃上清,RNA沉淀于管底。RNA沉淀中加入1ml 75%乙醇(用RNase-free水配制,),温和振荡离心管,悬浮沉淀。4℃5,000-8,000 rpm离心1-2min,弃上清。室温放置1-2分钟晾干沉淀。 沉淀中加入50-100μl RNase-free水,轻弹管壁,以充分溶解RNA,-70℃保存。检测纯度和浓度(OD260/OD280在2.0左右)
-
赞(1)
回复(0)
热门问答
- 提取血液的RNA怎么提取
2017-03-05 21:16:24
412
1
- 提取RNA的血液怎样保存
2011-08-08 00:22:12
346
2
- RNA提取原理
- RNA提取时,加氯仿后分三层:水相(含rna,可能还有少量DNA),中间白色薄层(应该是蛋白和DNA),下层有机相(氯仿和蛋白等) 有几个疑问: 1.dna是核酸,核酸不溶于醇等有机溶液,但可溶于水。那DNA也应该和RNA一样主要溶于上层水相吧? 2.蛋白属有机物,... RNA提取时,加氯仿后分三层:水相(含rna,可能还有少量DNA),中间白色薄层(应该是蛋白和DNA),下层有机相(氯仿和蛋白等) 有几个疑问: 1.dna是核酸,核酸不溶于醇等有机溶液,但可溶于水。那DNA也应该和RNA一样主要溶于上层水相吧? 2.蛋白属有机物,应溶于下层有机相吧 ? 3.既然DNA溶于水相了,蛋白溶于有机相了,那中间的白色薄层又是什么? 4.氯仿是重质有机溶剂,所以比水重,在下层。那如果白色中间层是DNA和蛋白,DNA和蛋白是大分子,应该比氯仿重才对,即白色中间层应在有机相的下面才对,怎么在中间呢? 如果能让我完全明白会额外给20分。谢谢! 展开
2010-05-11 23:48:49
450
2
- RNA的提取方法
- 酵母RNA的提取方法除了稀碱法还有其它什么方法?!! Z好提供实验方法等。谢谢~~
2008-10-04 05:09:45
587
3
- 如何提取和研究血液DNA,RNA与蛋白
2017-05-22 06:32:58
398
1
- 如何提取和研究血液DNA,RNA与蛋白
2017-06-16 03:37:14
476
1
- 怎么从疫苗中提取RNA
2012-07-11 02:03:29
619
2
- 细胞提取RNA求助
2016-12-29 20:34:55
307
1
- 怎么从病毒中提取RNA核酸
2017-01-24 23:11:43
290
1
- 血液提取dna试剂盒可以提取组织么
2016-04-23 18:52:17
340
1
- 血液提取核酸与头发提取有什么区别
2016-04-03 11:41:38
326
1
- 我怎么一直提取不出完整的RNA
2016-02-23 11:55:10
593
1
- 提取RNA与提取DNA方法的区别与联系?
2010-06-07 13:10:51
732
4
- 高氯酸提取DNA和RNA
- 有一篇文献中使用高氯酸同时提取DNA和RNA,具体步骤如下:取2mL0.5% 组织匀浆液,加入 1mL0.6mol/L冷高氯酸,冰上放置10min后500g离心10min, 弃上清,沉淀物用2mL0.2mol/L高氯酸洗涤两次,两次洗涤后都以500g离心l0min,弃上清,将沉淀物溶解于2mL0.3mol/L... 有一篇文献中使用高氯酸同时提取DNA和RNA,具体步骤如下:取2mL0.5% 组织匀浆液,加入 1mL0.6mol/L冷高氯酸,冰上放置10min后500g离心10min, 弃上清,沉淀物用2mL0.2mol/L高氯酸洗涤两次,两次洗涤后都以500g离心l0min,弃上清,将沉淀物溶解于2mL0.3mol/L的KOH,37℃条件下培养60min,然后加入1mL1.2mol/L高氯酸,冰上放置10min,500g离心15min,收集上清液(I),沉淀物用2mL0.2mol/L高氯酸溶解后再离心,再收集上清液(II),集中上清液(I和II)用于RNA浓度的测定,沉淀物用于测定DNA的浓度。 不知各位有没有用过这种方法,高氯酸的作用是什么?请赐教! 展开
2009-07-09 00:49:16
684
2
- 请教用TRIZOL提取RNA
2018-12-01 12:41:09
249
0
- 求助细菌总RNA提取的
2018-05-13 00:44:25
304
1
- 怎样提取微生物群落的RNA
2011-10-04 12:20:51
391
1
- RNA的提取方法有哪些?
- 具体的方法和分类
2010-05-30 14:08:19
501
3
- 提取血浆后,剩下的血细胞还能提取DNA,RNA吗
2018-01-12 11:31:26
284
1
- RT-PCR是提取DNA还是RNA
2018-11-18 19:58:44
334
0
9月突出贡献榜
- 单位预算忏悔
- 饿啊地方
- 空中有牛
- 依然相信你会
- 本生(天津)健康科技有限公司
- 猫合宝
- 上海一科仪器有限公司
- 广东皓天检测仪器有限公司
- 武汉安德信检测设备有限公司
- 东莞市皓天试验设备有限公司
- futu888
- 牛牛麻麻2
推荐主页
最新话题
参与评论
登录后参与评论