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气相色谱仪的操作要点

　　移液管的操作要点与注意事项

　　移液管又称单标线吸量管，用于准确移取一定量液体，是实验室中日常检验常用的玻璃仪器。在含量测定中，移液管的质量好坏和使用方法的对终数据的准确性有很大影响。为保证所取液体体积的准确性与实验结果的可靠性，我们可以注意以下操作要点。

　　1、检查

　　使用前首先应检查移液管是否已标定，不能使用未经标定过的移液管;其次应检查管口和JD有无破损和堵塞，如有则不能使用;后应检查移液管是否洁净，使用不洁净的移液管会使液体附着在管壁较多，会使实际体积与所需体积偏离较大，或引入新的杂质。

　　2、润洗

　　吸取液体前需要润洗，润洗过程不能对待吸取液体造成污染，特别是当管壁未干有水珠时，吸取速度要快，保证吸出液体不回流，避免管内液体对带吸取液体造成稀释。如移液管JD有液体润洗前应用滤纸吸干，或直接换一根干燥洁净的移液管。一般润洗三次即可，可根据需要增加润洗次数。

　　3、吸取

　　吸取液体时移液管插入液面不能过深也不能过浅，过浅可能会造成吸空(吸空不仅会污染洗耳球，且如吸取的是强酸强碱等有毒试剂，吸空可能使液体溅出，很危险)，过深会使管壁外粘附液体较多而影响准确性。

　　4、放出

　　放出溶液前应食指微松开调节液面，如果食指或管口是湿的可能会放不出液体或者放出速度难以掌控，这时好用滤纸将手指和管口彻底吸干再重新吸取液体。且放出液体时需要用食指控制流出速度，是液体匀速的流出，有些液体容易挂液如果放出速度过快会导致管壁残余液体过多对结果影响较大需要注意。放出液体后应观察移液管JD液体是否过多，如过多需要继续靠壁并轻轻转动。

　　以上简单介绍了移液管的几点操作要点，在实际工作工我们还有更多需要注意的地方。我们不仅仅是需要注意移液管的使用，在平时的所以检验操作中应严格要求自己，注重细节，确保实验结果的准确度与可靠性。移液管的操作要点与注意事项,先和大家介绍到这，如果想要了解更多冻存管信息，可以关注天津本生生物，专业给生物医药客户提供生物实验室检测耗材，欢迎广大客户来电咨询：18502669006。

自动开口闪点测定仪适用标准： GB/T267-88 、ASTM D92、GB/T3536-2008，采用触摸屏代替键盘操作，液晶大屏幕LCD全中文显示人机对话界面，全屏触摸按键提示输入，方便快捷，开放式、模糊控制集成软件，模块化结构，符合国标、美国、欧盟等标准。应用于铁路，航空，电力，石油行业及科研部门等。

开口闪点测定仪操作时，需要注意的几点事项，下面我们给您介绍一下：

  1、务必使用带可靠接地的电源插座为仪器供电，测试过程中油杯及其附近有高热，禁止触碰！

  2、测试过程中必须有人值守，测试完毕如有样品燃烧及时用油杯盖盖住油杯，油杯盖有高热，禁止触碰！

  3、禁止用手扳动点火划扫杆，否则将造成仪器彻底损坏。

  4、仪器有点火装置，在通风厨内操作（不要开风机），防止外部气流造成测试误差。

  5、温度传感器由玻璃制成，使用时不要与其它物品相碰。

  6、每次换样品，都应将开口杯清洗干净，开口杯与加热器之间不应有其它物品间隔，以便保持良好的导热。

  7、测试头切勿用手或其它物品去压、抬，点火杆不要用手去推拉，以免造成机械损伤。

　　ELISA各个操作步骤的注意要点，珠式、管式及磁性球ELSIA，国外试剂均与特殊仪器配合应用，两者均有详细的使用说明，严格遵照规定操作，必能得出准确的结果。

　　一、标本的采取和保存

　　可用作ELISA测定的标本十分广泛，体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液)，有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外，其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只要待血清自然凝固、收缩后即可取得。除特殊情况外，在医学检验中均以血清作为检测标本。在ELISA中血浆和血清可同等应用。血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP为标记的ELISA测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。

　　血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久，其中的可发生聚合，在间接法ELISA中可使本底加深。一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠倒混和，不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作，也可加入适当防腐剂。

　　二、试剂的准备

　　按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水，包括用于洗涤的，应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。

　　三、加样

　　在ELISA中一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡。加标本一般用微量加样器，按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴，以免发生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加样。有此测定(如间接法ELISA)需用稀释的血清，可在试管中按规定的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中加入稀释液，再在其中加入血清标本，然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。加酶结合物应用液和底物应用液时可用定量多道加液器，使加液过程迅速完成。

　　四、保温

　　在ELISA中一般有两次抗原抗体反应，即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间，这一保温过程称为温育(incubation)，有人称之为孵育，在ELISA中似不恰当。

　　ELISA属固相免疫测定，抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例，加入板孔中的标本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会，只有最贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程，因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA反应总是需要一定时间的温育。

　　温育常采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃(冰箱温度)等。37℃是实验室中常用的保温温度，也是大多数抗原抗体结合的合适温度。在建立ELISA方法作反应动力学研究时，实验表明，两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2小时，产物的生成可达。为加速反应，可提高反应的温度，有些试验在43℃进行，但不宜采用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为彻底，在放射免疫测定中多使反应在冰箱中过夜，以形成最多的沉淀。但因所需时间太长，在ELISA中一般不予采用。

　　保温的方式除有的ELISA仪器附有特制的电热块外，一般均采用水浴，可将ELISA板置于水浴箱中，ELISA板底应贴着水面，使温度迅速平衡。为避免蒸发，板上应加盖，也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔，此时可让反应板漂浮在水面上。若用保温箱，ELISA板应放在湿盒内，湿盒要选用传热性良好的材料如金属等，在盒底垫湿的纱布，将ELISA板放在湿纱布上。湿盒应先放在保温箱中预温至规定的温度，特别是在气温较低的时候更应如此。无论是水浴还是湿盒温育，反应板均不宜叠放，以保证各板的温度都能迅速平衡。室温温育的反应，操作时的室温应严格限制在规定的范围内，标准室温温度是指20-25℃，但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。室温温育时，ELISA板只要平置于操作台上即可。应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。为保证这一点，一个人操作时，一次不宜多于两块板同时测定。