噬菌体滴度的测定的方法具体操作步骤是什么？

mmciss 2014-04-29 14:17:27 593 浏览

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tilkut 2014-04-30 00:00:00

操作步骤 1. 在5~10ml LB培养基中接种单个ER2537克隆，振摇孵育直至对数生长中期(OD600~0.5) 2. 在细胞生长时，微波融化顶层琼脂糖凝胶，分装至无菌培养管内，每管3ml。维持在45℃备用。 3. 37℃预热LB/IPTG/Xgal培养板，备用。 4. 以LB培养基10倍比稀释噬菌体。建议稀释范围：对扩增的噬菌体培养上清，108-1011;对未扩增的筛选洗脱液，101-104。每次稀释都换用新的加样枪头，Z好使用气溶胶阻隔枪头以避免交叉污染。 5. 一旦ER2537培养物长至对数生长中期，分装至微量离心管中，每管200ml。 6. 将倍比稀释的噬菌体上清加入含细菌培养物的微量离心管中，一支微量离心管中仅加入一种稀释液10ml，快速涡旋，室温孵育1-5min。 7. 转移至含有45℃顶层琼脂糖凝胶的管中，快速涡旋混匀，立即倾倒至预热的LB/IPTG/Xgal平板上，轻缓摇动平板使顶层胶均匀分布。 8. 冷却平板5min，37℃倒置培养过夜。 9. 噬斑计数以噬斑数为100左右的平皿为准，噬斑数乘以稀释度即可获得每10ml噬菌体的滴度-噬斑形成单位(pfu)。生物帮上面有详细的步骤， http://www.bio1000.com/experiment/microbiology/ 微生物学实验技术，医学微生物学实验技术，微生物学检验，现代微生物学及实验实训技术，微生物学实验思考题。希望采纳

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噬菌体滴度的测定的方法具体操作步骤是什么？:

基因工程具体操作步骤: 我知道“提取目的基因，目的基因与运载体结合，将目的基因导入受体细胞，目的基因的检测和表达。”这么些个教材上的话，但是一直觉得教材没写清楚提取目的基因之后，就要经过前三步（... 我知道“提取目的基因，目的基因与运载体结合，将目的基因导入受体细胞，目的基因的检测和表达。”这么些个教材上的话，但是一直觉得教材没写清楚提取目的基因之后，就要经过前三步（如导入细菌体内）进行扩增，以得到大量目的基因（然后再来将这些目的基因导入另外的受体。。。）这时是否也需要进行目的基因的检测呢？怎样获取细菌内得到的大量目的基因？若是把目的基因导入植物细胞（如用土壤农杆菌），它是怎么把基因整合到植物的基因中去的？有谁能解答疑难，本人表示感激不尽！展开