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请教:流式分选细胞前标本的处理以及注意事项

loveMacArthur 2017-04-23 08:02:09 464  浏览
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参与评论

全部评论(1条)

  • lxm690724 2017-04-24 00:00:00
    具体步骤都繁琐且每实验都尽相同能告诉些原则: 第步设计选标记表面抗体标记标记诱导细胞激影响游实验些都要弄明白 第二步选择所要用仪器兼容荧光素比实验室仪器没紫外激光选用紫外荧光才能激发荧光素仪器能识别 第三步准备单细胞悬液要根据实验材料培养细胞整块组织或者悬浮细胞同需要找自优化原则限度细胞且保持细胞处于非粘附状态 第四部染色 第五部选根据实验要求收集管或者9陆孔盘每孔细胞根据实验要求

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流式高手来PK | 流式分选小技巧投票评选


为期10天的流式分选小技巧征集已经结束啦,大家对流式分选都有很多心得哦。经过5位贝克曼应用和市场专家的评选,有11位小伙伴的作品入围本轮大众投票。


让我们先来“康康”其中两个吧~


小技巧1:

对于单克隆的孔板分选,可以适当稀释样本。放慢进样流速。得到活率更好的单细胞。对于细胞团块:在样本里加入适当的EDTA和DNAase来防止。对于极脆弱的细胞分选:可以让仪器运行时的进样压差控制在0.5以内。


小技巧2:

在细胞制备、培养阶段,如果该培养细胞是贴壁细胞,需用先用胰酶消化细胞,然后收集待测样品细胞,离心、洗涤、封闭后标记荧光素偶联抗体即可。



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2022-12-01 20:08:12 153 0
流式高手来PK | 流式分选小技巧有奖征集


你有没有被这些问题困惑:

什么方法可以提高分选的细胞得率?

分选样本制备的时候怎样避免团块?

液流如何才能保持稳定?

……

遇到这些问题

你又是怎样用聪明的小脑袋解决的呢?


比如当我们发现分选细胞死亡率高,可以通过调整collecting buffer改善。以293T细胞为例,collecting buffer中添加FBS或BSA可以显著降低细胞死亡率至5%以下[1]。



你有什么流式分选的小技巧呢?

快来参与流式高手PK大赛,

把你的分选小技巧分享给大家吧!

还有惊喜好礼等着满满才气的你哦~




2022-11-22 20:20:26 171 0
微波消解仪常见的样品前处理设备注意事项

      微波消解技术是利用微波的穿透性和激活反应能力加热密闭容器内的试剂和样品,可使制样容器内压力增加,反应温度提高,从而大大提高了反应速率,缩短样品制备的时间。

      在日常分析中,大量样品必须在规定的时间内完成消解工作,因此要求微波消解系统操作必须简便,不需要过多复杂的附件。

  微波消解仪使用的几个常见问题
  微波消解仪作为一种常见的样品前处理设备,使用上有哪些注意事项呢?
  一:样品前处理酸的选择需要考虑哪些因素?
  答:样品前处理酸的选择应该考虑仪器的需要、不同基质的样品需要选用不同酸的类型。
  二: 样品前处理是否需要赶酸?
  答:一般需要,主要是降低空白值和保护分析仪器。
  三:无机物样品前处理中酸的纯度如何保障?
  答:自行购买高纯度试剂,可以根据需要对不同厂家、批次的试剂做空白试验。
  四:实验中使用的器皿如何清洗?应该注意什么?
  答:运行相应的清洗程序、泡酸(1:1硝酸浸泡24小时),使用前使用纯水冲洗,洗好的器皿不要长时间暴露在空气中。
  五:哪些种类的样品前处理的时候需要预消解?
  答:对于蛋白质含量高的样品、油脂含量高的等反应剧烈的样品需要预处理。
  六 是否一定要使用容量瓶定容?
  答:通常使用容量瓶定容,但经过计量的比色管也可以定容。
  微波消解样品前处理的核心在尽量降低消解剂使用量,减少前处理时间的同时,Z大限度得保证待测元素全部转化为可溶性的无机盐类物质,并且降低干扰物质的引入,降低待测元素测定难度。
  


(来源:北京国环高科自动化技术研究院)

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新品抢先试 用 | 纳米磁珠细胞分选 ,Get最方便的细胞分选方法!

提到细胞分选实验,大家首先想到就是流式细胞分选,该方法使用荧光抗体标记单细胞悬液,再通过调节合适的电压、补偿等,可以将目的细胞与非目的细胞区分开来。

由于可以对多参数、不同荧光强度的细胞进行鉴定、分类、定量和分离,流式分选技术在同时进行多标记的细胞分选时,其地位无可替代。但是当需要快速获得某种分选后的细胞时,流式分选的操作较为复杂,且花费的时间过长,对细胞的刺激也比较大。

因此,使用免疫纳米磁珠进行快速细胞分选的方法应运而生,该方法不仅对细胞刺激性小、速度快,而且操作简单,稍等片刻就可快速获得目的细胞。

(▲瑞沃德细胞分选新品)

新品来袭,自主研发

瑞沃德细胞分选产品包括自主研发的磁珠分选试剂盒和细胞分选柱,能在短时间内通过简单、快速的操作分选得到高纯度、高活率的目标细胞。


使用流程

同时,纳米级别磁珠无需洗脱,分选得到的细胞可直接应用于流式分析、细胞培养、单细胞测序等下游实验。


结果展示

纯度

*注:小鼠脾 脏细胞样本CD3分选后纯度流式检测结果,A为分选后阴性管(流出组分),B为分选后阳性管(滞留组分)。

Marker激活情况

注:小鼠脾 脏细胞样本CD3分选后激活Marker CD69检测结果,A为分选后Day0检测结果,B为分选后用CD3/CD28单抗激活Day3检测结果


应用场景多,助力科学研究

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肿瘤学研究

神经生物学研究

干细胞研究

细胞治疗

四大特点,轻松获取目标细胞

1、可获得高纯度,高活率,高得率的目的细胞

2、获得细胞可直接用于细胞培养,测序等下游实验

3、温和,低刺激,不改变细胞原本生物学特性

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