细胞培养常见问题的原因及解决方法
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细胞培养常见问题的原因及解决方法
1. 培养液pH值变化太快:
CO2张力不对。培养瓶盖拧得太紧。NaHCO3缓冲系统缓冲力不足。培养液中盐浓度不正确。细菌、酵母或真菌污染。
按培养液中NaHCO3浓度增加或减少培养箱内CO2浓度,2.0g/L到3.7g/L浓度NaHCO3对应CO2浓度为5%到10%。(2)改用不依赖CO2培养液。
松开瓶盖1/4圈。
加HEPES缓冲液至10到25mM终浓度。
在CO2培养环境中改用基于Earle’s盐配制的培养液,在大气培养环境中培养改用Hank’s盐配制的培养液。
丢弃培养物或用抗生素除菌。
2. 培养液出现沉淀,但pH值不变:
用洗涤剂清洗后残留磷酸盐将培养基成分沉淀下来。冰冻保存培养液。
用去离子水反复冲洗玻璃器皿,然后除菌。
将培养液加热到37℃,摇动使其溶解如沉淀仍然存在,丢弃培养液。
3. 培养液出现沉淀,同时pH 发生变化:
细菌或真菌污染。
丢弃培养物或用抗生素除菌。
4. 培养细胞不贴壁:
胰蛋白酶消化过度;支原体污染;培养液中无贴壁因子。
缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度。
分离培养物,检测支原体。清洁支架和培养箱。如发现支原体污染,丢弃培养物。
5. 悬浮细胞成簇:
培养液中含钙、镁离子。支原体污染。蛋白酶过度消化使得细胞裂解释放DNA。
用无钙镁平衡盐溶液洗涤细胞,轻轻吹吸细胞获得单细胞悬液。
分离培养物,检测支原体。如发现支原体污染,丢弃培养物。
用DNase I处理细胞。
6. 原代细胞培养物污染:
原代培养组织在进入培养前已污染
培养前用含高浓度抗生素的平衡盐溶液反复冲洗组织。
7. 培养细胞死亡:
培养箱内无CO2。培养箱内温度波动太大。细胞冻存或复苏过程中损伤。培养液渗透压不正确。培养液种有毒代谢产物堆积。
检测培养箱内CO2
检查培养箱内温度
取新的保存细胞种
检测培养液渗透压。注意:大多数哺乳动物细胞能耐受渗透压为260–350mOsm/kg。加入额外试剂如HEPES或药物都有可能影响培养液渗透压。
换入新鲜培养液
8. 培养细胞生长减慢:
由于更换不同培养液或血清。培养液中一些细胞生长必需成分如谷氨酰胺或生长因子耗尽或缺乏或已被破坏。培养物中有少量细菌或真菌污染。试剂保存不当。
比较新培养液与原培养液成分,比较新血清与旧血清支持细胞生长实验。
增加起始培养细胞浓度。
让细胞逐渐适应新培养液。
换入新鲜配制培养液。
补加谷氨酰胺或生长因子。
用无抗生素培养液培养,如发现污染,丢弃培养物。或用抗生素除菌。
血清需保存在-5℃ 到-20℃。培养液需在2–8℃避光保存。含血清培养液在2–8℃保存,并在2周内用完。
接种细胞起始浓度太低,细胞已老化,支原体污染。
增加接种细胞起始浓度。
换用新的保种细胞。
分离培养物,检测支原体。清洁支架和培养箱。如发现支原体污染,丢弃培养物。
细胞培养常见问题的原因及解决方法,我司由具有行业背景和丰富市场经验的业人士组成,于为生命科学研究域提供产品,为广大科研工作者提供服务。 既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求,也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。
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- 细胞培养常见问题的原因及解决方法
细胞培养常见问题的原因及解决方法
1. 培养液pH值变化太快:
CO2张力不对。培养瓶盖拧得太紧。NaHCO3缓冲系统缓冲力不足。培养液中盐浓度不正确。细菌、酵母或真菌污染。
按培养液中NaHCO3浓度增加或减少培养箱内CO2浓度,2.0g/L到3.7g/L浓度NaHCO3对应CO2浓度为5%到10%。(2)改用不依赖CO2培养液。
松开瓶盖1/4圈。
加HEPES缓冲液至10到25mM终浓度。
在CO2培养环境中改用基于Earle’s盐配制的培养液,在大气培养环境中培养改用Hank’s盐配制的培养液。
丢弃培养物或用抗生素除菌。
2. 培养液出现沉淀,但pH值不变:
用洗涤剂清洗后残留磷酸盐将培养基成分沉淀下来。冰冻保存培养液。
用去离子水反复冲洗玻璃器皿,然后除菌。
将培养液加热到37℃,摇动使其溶解如沉淀仍然存在,丢弃培养液。
3. 培养液出现沉淀,同时pH 发生变化:
细菌或真菌污染。
丢弃培养物或用抗生素除菌。
4. 培养细胞不贴壁:
胰蛋白酶消化过度;支原体污染;培养液中无贴壁因子。
缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度。
分离培养物,检测支原体。清洁支架和培养箱。如发现支原体污染,丢弃培养物。
5. 悬浮细胞成簇:
培养液中含钙、镁离子。支原体污染。蛋白酶过度消化使得细胞裂解释放DNA。
用无钙镁平衡盐溶液洗涤细胞,轻轻吹吸细胞获得单细胞悬液。
分离培养物,检测支原体。如发现支原体污染,丢弃培养物。
用DNase I处理细胞。
6. 原代细胞培养物污染:
原代培养组织在进入培养前已污染
培养前用含高浓度抗生素的平衡盐溶液反复冲洗组织。
7. 培养细胞死亡:
培养箱内无CO2。培养箱内温度波动太大。细胞冻存或复苏过程中损伤。培养液渗透压不正确。培养液种有毒代谢产物堆积。
检测培养箱内CO2
检查培养箱内温度
取新的保存细胞种
检测培养液渗透压。注意:大多数哺乳动物细胞能耐受渗透压为260–350mOsm/kg。加入额外试剂如HEPES或药物都有可能影响培养液渗透压。
换入新鲜培养液
8. 培养细胞生长减慢:
由于更换不同培养液或血清。培养液中一些细胞生长必需成分如谷氨酰胺或生长因子耗尽或缺乏或已被破坏。培养物中有少量细菌或真菌污染。试剂保存不当。
比较新培养液与原培养液成分,比较新血清与旧血清支持细胞生长实验。
增加起始培养细胞浓度。
让细胞逐渐适应新培养液。
换入新鲜配制培养液。
补加谷氨酰胺或生长因子。
用无抗生素培养液培养,如发现污染,丢弃培养物。或用抗生素除菌。
血清需保存在-5℃ 到-20℃。培养液需在2–8℃避光保存。含血清培养液在2–8℃保存,并在2周内用完。
接种细胞起始浓度太低,细胞已老化,支原体污染。
增加接种细胞起始浓度。
换用新的保种细胞。
分离培养物,检测支原体。清洁支架和培养箱。如发现支原体污染,丢弃培养物。
细胞培养常见问题的原因及解决方法,我司由具有行业背景和丰富市场经验的业人士组成,于为生命科学研究域提供产品,为广大科研工作者提供服务。 既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求,也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。
- 示波器探头常见问题及解决方法总结
示波器探头的主要作用是把被测的电压信号从测量点引入示波器进行测量。为保证测量的精度,选择合适的探头很重要。我们先了解下如何选择探头?普科科技PRBTEK为您分享:
1/示波器探头的量程怎么看?
示波器探头的量程一般无源探头Z大电压300Vrms,高压探头或者差分探头的量程可以根据型号查找规格书,不同衰减比档位下的量程不同。使用时根据当前档位确定允许输入的Z大电压。
2/示波器探头探针断了怎么办?
现在的探头一般都会配一根备用探针,用钳子把坏的探针顺向取下来,直接更换即可使用。如果没有备用探针,可以找当地经销商询一下原厂配件。
3/示波器探头测量的底噪太大怎么办?
把探头连接上示波器后看到示波器上波形噪声大,是正常的,这是因为没有构成闭合回路耦合进入空间噪声引起的。将探头正端和地线闭合连接,可以看到当前的真实底噪。
一般在测量过程中发现噪声过大,可以将地线摘掉,用接地弹簧测量,尤其是高频信号。
4/示波器探头测信号有过冲,振荡明显怎么办?
测量信号的上升沿出现明显过冲或震荡,一般是地线过长引起的。换一个接地弹簧就可以消除这种影响,测出真实的信号上升特性。
5/探头测电压不准确是什么原因?
探头测电压不准请先检查探头衰减比是否和示波器内设置一致,其次要考虑探头的负载效应,如果被测电路的输出阻抗大,那么一般的无源探头是测不了的,得换有源探头(有源单端/差分探头),这是因为阻抗分压引起的问题。
6/ 电源纹波测试如何选择合适的示波器探头?
电源纹波测试Z好用高阻无源探头1X档,优点是不需要经过示波器内部放大噪声小,信噪比高。测量时用接地弹簧作为地线,示波器设置带宽限制20MHz,根据需要选择通道耦合为AC耦合,这样就可以观察电源纹波等低频小信号测量了。
7 电流探头导线位置变化测值漂移,如何保证测量精度?
大电流测量时用类似柔性电流探头、罗氏电流探头,它的电流环比较大,通过的导线位置稍微移动就会影响测量值,这种情况建议固定好电流流经导线于电流环正中位置。如果希望减少位置引起的误差可以用电流环径小的电流探头。小电流建议用万用表或者皮安表测量。
8 普通的无源高阻探头可以测市电吗?
市电波形是220Vrms正弦波,用无源高阻探头10X档是可以测量的,其Z大输入电压一般是300Vrms,是大于市电有效值电压的。
但是注意无源探头1X档的CAT II等级只有150Vrms,也就是说在室内插座上用的环境下允许的Z大电压只能在150Vrms,不满足测市电220Vrms具备的耐压限值,虽然1X档位下通入示波器的电压是220Vrms,用1X档位直接测市电会损坏探头。
如果用同轴导线直接将市电引入示波器,这样的话虽然避免1X探头损坏,但从示波器Z大输入电压指标可以看出,此时安全等级降低到CAT I等级,原则上不适宜在实验室内进行这样的测量。所以测市电建议用高压探头相对安全。
9/手上只有普通示波器,怎样可以测浮地信号?
浮地信号测试的原则是保证信号不对地发生短路。非浮地示波器或带电池示波器的话,可以通过差分探头进行浮地测量,测试安全直接且具有较好的共模Y制(类似的工频干扰)。如果简单测量可以通过示波器两通道接单端探头,用探头的正极端分别测浮地信号两端,两支探头的鳄鱼夹均接地。然后用示波器内部的通道运算功能CH1-CH2,得到浮地信号的电势差波形。
10/任何探头都要做探头补偿吗?
探头补偿主要针对无源探头内部阻抗匹配而做的必要测量准备工作,通过旋转预留的电容旋钮Ccomp进行探头补偿,消除畸变,保证测量准确,比如无源高阻探头、无源高压探头等。而一般的有源探头则需要通过探头内部调零和校准,实现准确测量,比如差分探头、电流探头。
11/示波器探头都通用吗
不通用。主要有三点区别:
第一看探头接口是否与示波器匹配;
第二看探头输入阻抗是否和示波器设置输入阻抗一致;
第三看探头校准是否可以在手上的示波器实现。
对于第一点举个例子:泰克示波器新款是TekVPI接口,甚至老型号的泰克TekConnect接口探头都不能直接用;此时需要泰克TDA-BNC转换器转换。
对于第二点举个例子:一些高端示波器只有50欧阻抗输入,此时不能直接接入高阻探头,必须使用专用的50低阻探头。类似的有些低端示波器只有高阻输入阻抗1M欧,此时不能直接接入50欧探头或者BNC线,需要找一个阻抗转换器进行转换接入。
第三点:一些电流探头是需要配合示波器设置进行调零和消磁甚至供电的,如果用在其他示波器上可能无法进行调零消磁校准,不能正常使用。
以上内容由普科科技PRBTEK整理,公司致力于示波器测试附件配件研发、生产、销售,涵盖产品包含电流探头、差分探头、高压探头、无源探头、电源纹波探头、柔性电流探头、近场探头、逻辑探头、功率探头和光探头等,满足客户多样化测试需求,库存充足,价格合理。详情访问官网www.prbtek.com
- 数字示波器八大常见问题及解决方法
随着计算机、半导体和通信技术的快速发展,作为我们在设计、调试产品中的好帮手示波器也在电子方面的应用越来越广泛,那对于示波器的使用中如果要想准确快速地对系统信号进行分析,那在测量时还有很多新的因素是必须要考虑的:例如仪器速度能否跟上被测信号的变化、带宽是否足够、测量方法会不会引入干扰,甚至还有所使用的探头是否合适等等。这些都是示波器使用中常见的一些问题,那我们碰到这些问题的时候该如何处理呢?安泰测试就来给大家说示波器常见问题的处理:
问题1:在选择示波器时,一般考虑Z多的是带宽,那么在什么情况下要对采样速率有所考虑呢?
答:带宽是取决于被测对象的。在带宽满足的前提下,希望Z小采样间隔(采样率的倒数)能够捕捉到您需要的信号细节。业界有些关于采样速率经验公式,但基本上都是针对示波器带宽得出的,实际应用中,Z好不用示波器测相同频率的信号。若在选型时,对正弦波选择示波器带宽应是被测正弦信号频率的3倍以上,采样率是带宽的4到5倍,也即实际上是信号的12到15倍;若是其它波形,要保证采样率足以捕获信号细节。若您正在使用示波器,可通过以下方法验证采样率是否够用:将波形停下来,放大波形,若发现波形有变化(如某些幅值)就说明采样率不够,否则无碍。另外也可用点显示来分析采样率是否够用。
问题2:为什么我的示波器有时候抓不到经过放大后的电流信号呢?
答:如果信号的确存在,但示波器有时能抓到有时抓不到,这就可能和示波器的设置有关系。通常可将示波器触发模式设置成Normal,触发条件设置成边沿触发,并将触发电平调到适当值,然后将扫描方式设置成单次方式。如果这种方式还不行,那就可能是仪器出了问题。
问题3:有些瞬时信号稍纵即失,如何捕捉并使其重现?
答:将示波器设置成单次采集方式(触发模式设置成Normal,触发条件设置成边沿触发,并将触发电平调到适当值,然后将扫描方式设置成单次方式),注意示波器的存储深度将决定您能采集信号的时间以及能用到的Z大采样速率。
问题4:如何测量电源纹波?
答:可以先用示波器将整个波形捕获,然后将关心的纹波部分放大来观察和测量(自动测量或光标测量均可),同时还要利用示波器的FFT功能从频域进行分析。
问题5:关于模拟和 数字示波器 比较的问题:1、模拟和数字示波器在观察波形的细部时,哪个更有优势(例如在过零点和峰值时,观察1%以下寄生波形)?2、数字示波器一般提供在线显示均方根值,它的精度一般是多少?
答:1)观察1%以下寄生波形,无论是模拟示波器还是数字示波器,观察精度都不是很好。模拟示波器的垂直精度未必比数字示波器更高,如有一款500MHz带宽的模拟示波器垂直精度是±3%,这并不比数字示波器(通常精度为1~2%)更具优势,而且对细节,数字示波器的自动测量功能比模拟示波器的人工测量更精确。
2)对于示波器的幅值测量精度,很多人用A/D位数来衡量。实际上,随着您所用的示波器带宽、实际采样率设置等,它会有所变化。若带宽不够,本身带来的幅值测量误差就很大,若带宽够了,采样设置很高,实际的幅值测量精度也不如采样率低时候的精度(您有时可参考示波器的用户手册,它可能会给出不同采样率下,示波器的A/D实际有效位数)。总的来讲,示波器测量幅值,包括均方根值的精度往往不如万用表 ,同理,测量频率它不如频率计数器。
问题6:每台示波器都有一个频率范围,比如10M、60M、100M...我手头用的示波器标称为60MHz,是不是可以理解为它Z大可以测到60MHz?可我用它测4.1943MHz的方波时都测不到,这是什么原因?
答:60MHz带宽示波器,并不意味着可以很好地测量60MHz的信号。根据示波器带宽的定义,若输入峰峰值为1V的60MHz正弦波到60MHz带宽示波器上,您在示波器上将看到0.707V的信号(30%幅值测量误差)。如果测试方波,选择示波器的参考标准应是信号上升时间,示波器带宽=0.35/信号上升时间×3,此时您的上升时间测量误差为5.4%左右。测量误差为5.4%左右。示波器的探头带宽也很重要,若使用的示波器探头包括其前端附件构成的系统带宽很低,将会使示波器带宽大大下降。如若使用20MHz带宽的探头,则能实现的Z大带宽是20MHz,如果在探头前端使用连接导线,将会进一步降低探头性能,但对4MHz左右方波不应有太大影响,因为速度不是很快。
另外还要看一下示波器使用手册,有的60MHz示波器在1:1设置下,其实际带宽将锐减到6MHz以下,对于4MHz左右的方波,其三次谐波是12MHz,五次谐波是20MHz,若带宽降到6MHz,对信号幅值衰减很大,即使能看到信号也不是方波,而是幅值被衰减了的正弦波。当然,测不出信号的原因可能有多种,如探头接触不好(该现象很容易排除),建议用BNC电缆连接一 函数发生器 ,检验该示波器本身有没有问题,探头有没有问题,如有问题,可和厂家直接联系。
问题7:有些瞬时信号稍纵即失,如何捕捉并使其重现?
答:将示波器设置成单次采集方式(触发模式设置成Normal,触发条件设置成边沿触发,并将触发电平调到适当值,然后将扫描方式设置成单次方式),注意示波器的存储深度将决定您能采集信号的时间以及能用到的Z大采样速率。
问题8:如何理解“考核波形采样率够不够时,将波形停下来,放大波形,若发现波形有变化(如某些幅值)就说明采样率就不够,否则无碍。也可用点显示来分析采样率是否够用”?
答:这里有一个实例,当时被测对象是一种看上去很随机且高速变化的信号,用户将触发电平设在-13V左右。波形采集下来后想放大测量细节时,却发现改变示波器时基(SEC/DIV)设置时,信号幅值突然变小,当时将示波器改成点显示,发现好像是点数(存储深度)不够,但比较点显示和矢量显示后,发现若矢量显示有一定可信性,那么就是当前的两个采样间隔(采样率的倒数)中信号有突变,但未能被采集到(采样间隔不够细,即采样率不够高)。换了一台同样存储深度但采样率较高的示波器,发现问题消失了。
存储深度也会影响示波器能用到的实际Z大采样率。存储深度太浅可能是个问题,因为存储深度可能限制能实际用到的Z大采样速率,但实质上是采样率不够,丢失了信号细节。存储深度不够深,可能会导致实际采样率不高,这一点跟厂家提供的指标关系不大。
如果您在示波器选型、使用或者售后过程中有任何问题,欢迎咨询安泰测试网。
- 高纯氮气发生器的常见问题解决方法
高纯氮气发生器采用先进的色谱分离方法技术可以连续产生高纯度的氮气,将空气压缩泵供给的气体导入分子筛,氧气、二氧化碳、水份及其他杂质在通过分子筛除去,只允许氮气通过分子筛并进入蓄气池,在储气罐里调节合适的压力和流速后就可以直接使用。分子筛筒采用自动可再生装置,分子筛无需进行更换。
高纯氮气发生器的常见问题解决方法:
1、运行中出现响声:
解决方法:用扳手对仪器上螺母适当调整松紧度,不要太紧;若不行,需拆开仪器外壳,对内部进行清洗(响主要是因内部有杂质),若清洗完还不行,须更换新的。
2、在氮气压力达不到设定值时,应观察流量表,若流量显示比平时偏大,基本上就可以断定整个体系存在漏气的问题:
解决方法:先关闭电源,卸下气路,氮气出口需要用密封螺帽封紧,然后打开氮气发生器电源,看压力能否达到设定值,并看流量显示能否达到“000”,如果流量显示能回零,说明仪器本身不存在漏气,之后就请检查气体输出口以后的管路,及用气设备是否漏气。若流量显示不能回零,则存在漏气点,请用皂液检查干燥管是否存在漏气现象。
3、开机无法工作,显示板无显示:
解决方法:先检查电源是否有点,插头等是否插好,然后再检查是否完好,仪器显示板排线插件是否插好。位于仪器后面电线插座内,用小“一”字改锥或尖的金属工具向外撬即可取出,看仪器内电路板指示灯是否亮,若不亮,检查电路板上是否烧掉,若烧掉须换3A,换后仍不显示,须换电源。
4、开机10分钟后显示数字有但不升压,无气体输出:
解决方法:检查插件是否脱落松动,用表对插件进行测量,若没有220V电压,需更换电源。
- 高纯氮气发生器的常见问题解决方法
高纯氮气发生器采用的色谱分离方法技术可以连续产生高纯度的氮气,将空气压缩泵供给的气体导入分子筛,氧气、二氧化碳、水份及其他杂质在通过分子筛除去,只允许氮气通过分子筛并进入蓄气池,在储气罐里调节合适的压力和流速后就可以直接使用。分子筛筒采用自动可再生装置,分子筛无需进行更换。
高纯氮气发生器的常见问题解决方法:
1、运行中出现响声:
解决方法:用扳手对仪器上螺母适当调整松紧度,不要太紧;若不行,需拆开仪器外壳,对内部进行清洗(响主要是因内部有杂质),若清洗完还不行,须更换新的。
2、在氮气压力达不到设定值时,应观察流量表,若流量显示比平时偏大,基本上就可以断定整个体系存在漏气的问题:
解决方法:先关闭电源,卸下气路,氮气出口需要用密封螺帽封紧,然后打开氮气发生器电源,看压力能否达到设定值,并看流量显示能否达到“000”,如果流量显示能回零,说明仪器本身不存在漏气,之后就请检查气体输出口以后的管路,及用气设备是否漏气。若流量显示不能回零,则存在漏气点,请用皂液检查干燥管是否存在漏气现象。
3、开机无法工作,显示板无显示:
解决方法:先检查电源是否有点,插头等是否插好,然后再检查保险是否完好,仪器显示板排线插件是否插好。保险位于仪器后面电线插座内,用小“一”字改锥或尖的金属工具向外撬即可取出,看仪器内电路板指示灯是否亮,若不亮,检查电路板上保险是否烧掉,若烧掉须换保险3A,换后仍不显示,须换电源。
4、开机10分钟后显示数字有但不升压,无气体输出:
解决方法:检查插件是否脱落松动,用表对插件进行测量,若没有220V电压,需更换电源。
- 你问“沃”答 | 冷冻切片有哪些常见问题?对应的原因及解决方法是什么?
在冷冻切片的过程中,你是否也遇到:
切片有划痕
切片厚度不均
组织黏在防卷板上……
想要制作一张高质量的组织切片,不仅需要长期的反复练习,更需要借鉴前人的经验。本期我们将从大家实际冷冻切片中遇见的问题着手,查找原因并给出对应的解决办法。
问题01:箱体结霜
原因:
1、切片机窗户打开时间过长;
2、机器自身温控性能差。
解决方案:
1、不使用机器时注意关好玻璃窗;
2、做除霜处理;
3、瑞沃德冷冻切片机制冷和温控性能可以有效避免结霜问题,同时可设置自动除霜和手动除霜。
问题02:切片发黏
原因:
组织、刀片、防卷板都可能温度过高,导致片子回温湿润。
解决方案:
1、当机器到达设定温度后,再制冷一段时间再切片,保证箱体内部硬件冻透;
2、适当延长样本冷冻时间或者把样本放在速冻台快速冷冻位点制冷。
问题03:切片开裂,不能正常展开
原因:
1、组织过冻,脆性增加;
2、刀片或防卷板上有碎屑或者有细微缺口;
3、组织包埋不规则,有细微隆起。
解决方案:
1、调高样本头温度,适当缩短组织冷冻时间;
2、清理防卷板和刀片处,或更换刀片和防卷板玻璃面;
3、再次修片,修出平整截面再切片或重新包埋。
问题04:片子在防卷板上卷曲(进不了防卷板)
原因:
防卷板与刀片边沿距离不合适。
解决方案:
调整防卷板,使其细微向前移一些。
问题05:样品剐蹭到防卷板
原因:
防卷板与刀片边沿距离不合适。
解决方案:
调整防卷板,使其细微向前移一些。
问题06:片子有划痕
原因:
1、刀片有缺口;
2、防卷板有缺口。
解决方案:
1、更换刀片或者侧向位移换新的刀口;
2、更换防卷板玻璃面或侧向位移换新的防卷板区域。
问题07:切片震颤或有杂音
原因:
1、组织与样本托之间未冷凝稳固;
2、刀片、刀架和样本头未锁紧;
3、组织过硬且包埋不规则。
解决方案:
1、重新用包埋剂将组织与样品托包埋冷冻;
2、检查刀片、刀架和样本头是否锁紧;
3、增加切片厚度。
问题08:切片厚度不均
原因:
1、刀架角度不合适,刀片背面有碎屑或结冰,切片速度不一致;
2、刀片和样品头未锁紧;刀架未锁紧。
解决方案:
1、通过调整刀架间隙角(出厂默认是5°)从而调整刀片角度,清理刀片锁紧位置和更换刀片,调整切片速度;
2、检查刀片、刀架和样本头是否锁紧。
问题09:组织粘在防卷板上
原因:
1、防卷板温度过高或位置不合适;
2、防卷板带静电;
3、脂肪等组织粘在防卷板边沿。
解决方案:
1、切片前,防卷板先冷冻一下或调整防卷板位置;
2、更换防卷板玻璃另一侧试试效果;
3、清理防卷板边沿再切片。
问题10:防卷板抬起后,片子卷曲
原因:
1、防卷板温度过高;
2、包埋剂包埋不均匀。
解决方案:
1、切片前,防卷板先冷冻一下;
2、组织包埋的厚度和形状尽量规则,再用毛笔辅助展片。
问题11:载玻片无法贴片
原因:
载玻片温度偏低。
解决方案:
1、载玻片温度升高后再贴片;
2、载玻片贴片前放置于箱体外部。
- 直流电马达颤动的原因及解决方法
- 我将一个使用干电池的刮胡刀上的马达接到电源源适配器上,马达颤动。都是用直流电怎么会有这个差别?哪位大哥知道了原因和解决方法,Z好是有电路图,小弟不胜感激。... 我将一个使用干电池的刮胡刀上的马达接到电源源适配器上,马达颤动。都是用直流电怎么会有这个差别?哪位大哥知道了原因和解决方法,Z好是有电路图,小弟不胜感激。 展开
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示波器对于电子工程师来说再熟悉不过了,纹波测试,检查频率,查看信号质量,测量上升时间、下降时间和过冲,并行总线解码分析等等它都能用到, 被誉为电子工程师的“眼睛”,而其中泰克品牌的示波器更是众多电子工程师备受青睐的品牌了,任何仪器使用久了,难免会生病,今天安泰测试就给大家分享一下泰克示波器出现黑屏原因及解决方法。
泰克示波器出现黑屏是什么原因呢?所谓黑屏,就是示波器的荧光屏看起来没有任何光点,好像没有开机一样。造成这种现象的主要原因有以下几种:
一、示波器的辉度不合适
示波器辉度被调整而引起黑屏的现象一般出现于,上次使用者由于测试需要降低了辉度(比如在昏暗的灯光下,过强的辉度会刺眼);教师在考核学生时,故意将示波器辉度调整为较小;维修者的习惯性操作。但是,这个问题不容忽视,当出现黑屏时,首先检查辉度旋钮,并将其拧到较大,是一个良好的习惯。
二、示波器没有触发扫描
辉度合适的情况下,仍然可能出现黑屏。
当示波器的触发方式为常态(Normal),如果输入通道没有接入有效信号,或者接入的信号幅度没有达到设定电平(Level),将不会引起X轴偏转板上锯齿波的产生。在多数情况下,荧光屏的左边(以观察者为基准)将会出现一个不移动的光点。但是,如果此时X轴基准位置(X_Position)不正确,将使得此光点不出现在屏幕上。这也就造成了黑屏。
解决的方法就是让示波器出现扫描线。因为,X_Position可以将一个光点移出屏幕,但是却无法将宽达8cm左右的扫描线整个移出。 将触发方式选择为自动触发(Auto)就可以让示波器产生扫描线。
三、示波器Y基线位置(Y_Position)不合适
如果示波器的Y轴基线位置不合适,即便产生扫描线,也有可能使得扫描线处于屏幕的上方或者下方,仍然可能出现黑屏。这种情况下,通过旋转 Y_Position旋钮,可以很快找回扫描线,而消除黑屏。
四、不合适的被测信号
通过上述分析,可以得出,消除黑屏的一般步骤是:旋转辉度至大(保证辉度正常)→将触发方式设为自动(保证扫描线产生)→将X位置旋钮旋至中间→满幅度调整Y_Position(找回扫描线)。
但是,即便此时,也有可能仍然黑屏。当被测信号是一种特殊信号,也有可能让观察者难以看到,而误认为是黑屏。当输入信号为上下沿均很陡的方波,由于Y轴增益的不合适,使得方波的高低电平均超出了Y轴显示范围,这种波形在荧光屏上仅仅出现了几条很陡的竖线。当示波管老化,或者其它原因,非常容易造成观察者难以察觉。
将输入耦合开关置于GND,示波器将关断输入信号而显示0线,就可以回避这个问题。
因此,按照下述步骤操作,一般均可顺利消除黑屏,除非示波器真的损坏了。
旋转辉度至大(保证辉度正常)→将触发方式设为自动(保证扫描线产生)→将输入耦合开关置于GND(保证不受到奇异被测信号的影响)→将X位置旋钮旋至中间→满幅度调整Y_Position(找回扫描线)。
当然,泰克示波器故障也可以直接到安泰测试进行维修,我们提供免费的检测,我们专修以下示波器故障:
1、电源故障:不能开机;
2、通道故障:输入阻抗异常;无基线;无信号;带宽不足;
3、显示故障:花屏;黑屏;
4、按键故障:按键无反应;调节旋钮无响应;
5、接口故障:不认存储介质;不能与控制系统联机;
6、其他使用问题等。
如果您也有以上故障需要维修,欢迎咨询安泰测试,公司依靠精良的检修设备,过硬的维修技术,合理的维修价格,GX的维修周期和完善的售后服务,打破了原厂的垄断局面,为客户节省60%维修费用,缩短维修周期。
- 氢气发生器故障原因的解决方法
氢气发生器作业原理:
一、用电解法发生氢气,以氢氧化钾水溶液为电解液,以贵金属做电极,釆用新的膜别离技能将氢气和氧气彻底别离,并在电解池中釆用了过渡族金属催化技能,使产氢纯度含氧量小于 3PPM。
二、氢气发生器程序釆用了高灵敏度、模糊操控主动盯梢系统,取消了稳压阀,完成了主动恒流、恒压、使压力安稳精度规模小于0.001MPa并可根据色谱仪所需氢气用量巨细完成0-300ml/min全主动调节,当用户中止用气时,仪器主动中止产氢,因此杜绝了体系超压的现象,以确保安全。
氢气发生器选用膜渗透技能和液位差自流式电解池,一步提纯到位,纯度高达99.999%以上,选用先进技能科学地解决了返液现象,是实验室运用的抱负氢气发生器。
由于氢气的纯净度、流量和压力对色谱仪的正常运行影响非常大,因此氢气发生器的故障应及时排除。
三、氢气发生器工作原理:
氢气发生器的工作原理是以电解的方法产生氢气,以贵金属做电极,采用新的XY膜分理技术,特制的电解液体在分离池阴极上的电解产生高纯氢气,阳极产生氧气,氧气释放到大气中,氢气经过净化,干燥后输出。
氢气发生器的程序控制采用了高灵敏度压力控制系统和流量自动跟踪系统,使压力的稳定性小于0.001Mpa。流量自动跟踪系统可根据用气设备所需氢气的用量大小自动跟踪调节。当用气设备停止用气时,仪器会自动停止产气,杜绝了系统超压现象,以保安全使用。
四、氢气发生器的安装与使用:
1、将氢气发生器从包装箱中取出,观察氢气发生器的表面有无运输造成的损伤,并核对装箱单上的品名数量是否齐全。
2、氢气发生器安放场所应符合以下几点要求:具有良好的通风性;远离散热器或暖气管道等热源区域;无震动、阳光直射、粉尘、腐蚀性气体、环境干燥。
五、氢气发生器不能启动时:
故障原因:
(1)电路没有接通;
(2)氢气开关电源损坏;
(3)在压力为0空载运行时电解池烧坏。
检查方法:
(1)检查电路;
(2)用万用表测量电解池的电压是否在2.3V左右。
排除方法:
(1)修理电源;
(2)更换损坏的氢气开关电源;
(3)更换电解池。
- 液相色谱柱的异常情况及解决方法
在液相色谱上遇到的问题有很多,例如HPLC 色谱柱的一些常见问题时有出现,可能会令很多实验员感到非常沮丧。那么今天,恒谱生带您了解这些是什么以及如何解决它们可以让您避免数小时的挫败感。
一、无峰值:
可能有多种因素会导致 HPLC 输出中不出现峰或出现非常小的峰。正常读数应该又大又细的峰值,高度也是会有不一样的。小峰或没峰可能代表检测器灯已关闭,没有流动相流量和样品丢失或变质,或者检测器、积分器、进样器阀或记录器这些有问题存在。
其实先要确保探测器是打开状态,然后检查所有连接情况。确保自动进样器样品瓶中有足够的液体和样品中无气泡情况出现,并使用新的标液重新进行系统的检查。
二、无流量:
如果没有出峰,很有可能是HPLC 色谱柱中没有流量;也可能意味着泵已关闭或流量因某种原因中断或受阻;同时泵头中也可能存在泄漏或空气滞留。
如果泵关闭,需要启动泵并检查储液器中的流动相液位和整个系统的流量情况。检查样品环是否有其他障碍物或气塞,并确保流动相组分可混溶且流动相是否能够进行正常脱气。继续检查系统松动情况,检查泵是否有泄漏等其他问题。
三、压力问题:
要是压力低于平常或无压力这有可能是系统某处发生泄漏或空气滞留;要是系统压力过高,那么泵、进样器、在线过滤器、保护柱、分析柱或管路都可能有问题。
如果是检查发现是低压,那就要检查整个色谱系统是否存在泄漏、泵密封件故障或阀门损坏的情况等。如果是高压的话,先从移除保护柱和分析柱,并用接头替换,将进样器重新连接到检测器。以 2-5 mL/min 的速度运行泵,并开始查找原因,。如果问题是出现在分析柱上,请在分析柱与检测器断开连接时反转,并冲洗色谱分析柱;在必要的时候更换入口滤芯或更换柱子。
四、裂峰:
如果发现峰出现在中间下降形成M形,那么可能是分析柱入口可能存在一些污染;也可能在色谱柱入口处有筛板被堵塞了或存在了不均匀的空隙;还有可能是样品溶剂与流动相不相容。
如果是入口处有污染,请反转并冲洗色谱柱,并在需要时更换筛板。还可以用具有相同键合相功能的薄膜颗粒重新填充色谱柱顶部,并继续以反向流动方向使用色谱柱;如果是问题出在样品上,请调整流动相中的样品,因为样品和流动相中的 pH 值差异会导致分峰。
五、尾峰和前峰:
发现峰不是直线上升和下降,而是开始在前面或后面就形成轻微的倾斜,则称为前端或尾部。这通常可能是保护柱或分析柱受损或是色谱柱过载。如果有拖尾峰,请先移除保护柱并尝试分析,必要时就需要更换。如果需要恢复或更换分析柱。一定要检查流动相的组成和色谱柱的性能。有前峰的话,请尝试注入更小的体积或稀释样品;如果溶剂有问题请调整溶剂,并使用 50 柱体积的 HPLC 级乙酸乙酯以标准流速的两倍或三倍冲洗极性键合相柱,然后在开始分析之前使用中等极性溶剂。
今天恒谱生分享的知识先到这啦,希望对您的工作有所帮助!
- 氮气发生器的常见故障及解决方法
氮气发生器是集氮、氢、空发生器为一体的仪器,它是在高纯氮发生器、高纯氢发生器和低噪音空气泵的基础上,融合现代,为适应市场的需要而开发、设计并向市场推出的一代产品。氮气发生器以崭新的结构设计,简单的工作程序,竭诚为操作者提供更加便捷、可靠的工作条件。采用的开关电源,提高了电解效率。操作简便,只需启动电源开关,仪器即可产气,输出压力稳定,氮、氢、系统设有流量显示,更醒目直观。不消耗电解质,电解质只起离子转换作用并不消耗,所以只需补充蒸发和电解损失的少量蒸馏水。设有多级保护装置,是、可靠、方便的结合。即可间断使用,又可连续使用且产气稳定、不易衰减。可取代高压钢瓶,使化验室仪器化。
氮气发生器可以根据用户使用气量的大小来进行自动控制排水;采用了航空材料作为二次减震装置,大大降低了仪器的噪音问题。氢气电解分离池采用了进口不锈钢316L材质,氢电解分离池电解面积大为325cm2,采用了贵金属作为电解材料及特殊材料作为分离膜加大了电解速率提高了气体纯度。
再好的设备也会有故障的时候,下面就来说说氮气发生器的常见故障及解决方法:
1、当氢气部份压力达不到设定值时,先观察流量表,如流量显示较平时偏大,基本可断定整个体系有漏气点。
处理方式:关闭电源,卸下气路,将氢气出口用密封螺帽封紧,开启电源,看压力能否达到设定值,并看流量显示能否达到“000”,如果流量显示能回零,说明仪器本身不存在漏气,请检查气体输出口以后的管路,及用气设备是否漏气。如流量显示不能回零,则仪器存在漏气点,请用皂液检查干燥管是否存在漏气现象。
2、当空气部份压力达不到设定值时,频繁启动时,可能存在漏气。
处理方式:关闭电源,卸下气路,将出口用密封螺帽封紧,开启电源,当压力上升,空压机停止工作后观察空压机是否会在30分钟内再次启动,如果空压机未在短时间内启动,说明仪器本身不存在漏气,请检查气体输出口以后的管路,及用气设备是否漏气。
氮气发生器的轴承损坏原因有很多,如灰尘侵入、安装不当或湿气侵入等,这是轴承早期损坏的常见原因。以下是对一些大型轴承常见损坏原因的分析及相应的解决方法,以延长轴承的使用寿命。
1、偏心率:偏心率、倾斜度或过大载荷可能导致几何应力集中或表面剥落。解决方法:轴承座和挡肩的精密加工。
2、润滑不足:润滑不足或不当可能导致部件磨损或轴承严重变形。解决方法:改善润滑系统,定期适当补充或更换润滑剂。
4、电流:当轴承旋转时,带电可能导致沟槽或刻痕。当轴承静止时,电气操作的不正确接地将导致轻微的防烧伤措施:在焊接除轴承以外的零件之前,减少或防止电流通过合适的聚酯连接件流过轴承。
3、操作不当:安装、操作或拆卸不当可能导致保持架变形或缺陷。解决方法:使用适当的操作、安装和拆卸工具。
5、生锈和腐蚀:与水接触可能导致轴承部件的腐蚀和生锈。轴承的腐蚀损坏可能导致运行中的防剥落措施:定期检查密封,确保良好的密封效果,正确存放轴承。
6、外部材料:磨粒污染和碎屑侵入可能导致轴承工作表面磨损、擦伤和凹陷。解决方法:清除侵入的颗粒和碎屑,更换润滑剂,并检查密封系统。
- 细胞培养的步骤及注意事项
细胞培养的步骤及注意事项
一、 复苏
1. 把冻存管从液氮中取出来,立即投入37℃水浴锅中,轻微摇动。液体都融化后(大概1-1.5分钟),拿出来喷点酒精放到超净工作台里。
2. 把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中(用培养基把冻存管洗一遍,把粘在壁上的细胞都洗下来),1000转离心5分钟。
3. 把上清液倒掉,加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动,使培养皿中的细胞均匀分布。
4. 标好细胞种类和日期、培养人名字等,放到CO2培养箱中培养,细胞贴壁后换培养基。
5. 3天换一次培养基。
二、 传代
1. 培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。
2. 把原有培养基吸掉。
3. 加适当的胰蛋白酶(能覆盖细胞就行),消化1-2分钟。
4. 细胞都变圆后加如入等体积的含血清的培养基终止消化。
5. 用移液枪吹打细胞,把细胞都悬浮起来。
6. 把细胞吸到15ml的离心管中,1000转离心5分钟。
7. 倒掉上清液,加1-2ml培养基,把细胞都吹起来。
8. 根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中。一般,癌细胞分5个,正常细胞传3个。继续培养。
三、 冻存把细胞消化下来并离心(同上)。用配好的冻存液把细胞悬浮起来,分装到灭菌的冻存管中,静止几分钟,写明细胞种类,冻存日期。4℃ 30min,-20℃ 30min,-80℃过夜,然后放到液氮灌中保存。 冻存液的配制: 70%的完全培养基+20%FBS+10%DMSO. DMSO要慢慢滴加,边滴边摇。
细胞培养的步骤及注意事项,先和大家介绍到这,如果想要了解更多离心管的信息,可以关注天津本生生物,业给生物医药客户提供生物实验室检测耗材,欢迎广大客户来询。
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