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我们在拉制好玻璃微电极后，发现拉制的微电极并不能满足我们的实验需求，是因为锥体长度太短了？还是因为电极口径大小不合适？不要担心，下面我们会详细告诉你应该调整哪些参数，拉制出符合实验需求的玻璃微电极。

参数调试篇

01

膜片钳微电极参数调试方法

1) 测试速度中值

为什么要测试速度中值呢？膜片钳微电极的拉制过程就是通过加热使玻璃管融化，再多次施加拉力从而将玻璃管拉断。多次施加拉力的时候就产生了循环次数这个参数，而拉制速度是影响循环次数的重要因素。为了提高拉制结果的稳定性，我们需将循环次数稳定在一个值，而这个值往往对应着一个速度区间。通过找到速度区间的中值，来保证循环次数保持稳定，一般推荐的循环次数为4次和5次。

举例：推荐参数的速度为31，增加或减少速度值，找到循环5次的速度区间为25-35，循环4次的速度区间为36-44，则循环5次的速度中值为（25+35）*0.5=30，循环4次的速度中值为（36+44）* 0.5=40。

2) 选择速度

当然膜片钳微电极的阻抗也需要调试。

首先用户自行测试循环4次和循环5次的速度中值对应的阻抗，并与目标阻抗比较，选择阻抗更接近目标阻抗的速度中值进行调试。

举例：循环5次的速度中值30对应的阻抗为2M，循环4次的速度中值40对应的阻抗为6M，而目标阻抗为3±1M；则循环5次的速度中值对应的阻抗更接近目标阻抗，因此选择速度30；如果目标阻抗为5M，则选择速度40。

3) 在选择的速度基础上调试参数

注意：参数调试过程中应保证循环次数不变。

• 单行调试法

调节速度或热量，直到拉制出符合需求的微电极。速度调节范围±10，热量调节范围±15，应优先调节速度。

• 多行调试法

若采用单行调试法不能拉制出目标微电极，或者单行调试法调试后循环次数发生改变，则使用多行调试法。

举例：选择的速度30循环5次，则将设置参数分为5行，然后调节最后1-3行的热量或者速度，得到目标微电极的拉制参数。热量调节范围为±15，速度调节范围为±10。

02

其他微电极的参数调试方法

以推荐参数为基础，调节拉力或速度，应优先调整速度；若拉制的微电极与目标微电极差异较大，可同时调节拉力和速度。

如果是初次使用拉制仪怎么办？

也不用担心

我们以瑞沃德MP-500微电极拉制仪为例

提供详细的操作流程

操作流程篇

注：本设备使用过程中应放置在稳固水平的平台上，请勿放置在不稳定的平台上！

01

初始启动

连接电源后启动设备，系统进入开机启动界面。

等待 30s 待进度条加载完毕后，进入【主界面】

02

安装玻璃管

• 将左右拉杆移到最外侧，卡住拉杆，防止拉杆左右滑动；

• 先将玻璃管全部放在金属固定槽中，转动旋钮轻微固定玻璃管，注意此时玻璃管还可以推动；

• 按压两侧按钮释放拉杆，轻握拉杆扶手拉动两侧拉杆向中间靠近加热室；

• 轻微拧松旋钮，沿着拉槽轻轻推动玻璃管，小心从加热片中穿过，直到玻璃管左右的距离大致相等；拧紧旋钮，完成玻璃管安装。

注意：

玻璃管滑动时必须紧贴拉槽，否则可能损坏加热片！

拉动拉杆和拧紧旋钮时不能过度用力，否则可能导致玻璃管破裂！

03

测试软化点

本设备的加热装置通过电流使加热片的温度能够软化玻璃管。软化点是能够软化玻璃管的合适电流值，不同型号的加热片和玻璃管有不同的软化点。本设备配附3个型号的加热片和6个型号的玻璃管，每次更换加热片或不同型号的玻璃管时，用户应自行测试软化点并记录下来。

注意：每次更换加热片或不同型号的玻璃管时，务必测试软化点！

• 在【主界面】点击【测试】进入【软化点测试】界面

• 按下显示屏右侧的绿灯按键【START】，开始测试。

• 得到软化点测试值，记下该测试值。

• 重新测试软化点，建议重复测试 3 次，取最大值，即为软化点。

注意：测试软化点之后，玻璃管会被拉断，建议更换玻璃管后再拉制！

04

编辑参数

如图所示界面，用户可编辑各参数值。

05

拉制模板

在【主界面】点击【拉制模板】选择瑞沃德预设的模板进行拉制。

1) 选择加热片类型，本设备配附的加热片都是方框形。

当玻璃微电极用于在体微量注射时，建议选用 HF-2545B 型号的加热片！

2) 选择玻璃管规格。

当玻璃微电极用于在体微量注射时，建议选用型号为 B-15086-10F、B-10078-10F、B-12069-10F、B-150110-10F 的玻璃管！

当拉制膜片钳微电极时，建议选用型号为 B-15086-10F、B-12069-10F、B-150110- 10F、B-12094-10F 的玻璃管！

3) 选择微电极用途。

4) 最后，系统根据以上三个选项生成程序参数，用户可选择将当前模板作为一个新程序或者覆盖当前程序的参数。

06

开始拉制和暂停拉制

绿色按键【START/STOP】键为多功能按键，可开始拉制或暂停拉制；红色按键【RESET】键可重启系统。

工作原理：通过对铂铱合金片通恒定电流产生高温融化插入合金片框中的毛细玻璃管，通过重力作用或者施加额外拉力将中间融化的毛细玻璃管向两侧分步拉断成尖端对称的两个玻璃微电极。

相信到这里拉制仪的参数调节以及使用方法，大家应该都有了大概的了解。工欲善其事，必先利其器，想更好把控膜片钳和注射类等各个实验场景，一台工作“好助手”少不了——瑞沃德MP-500微电极拉制仪，将从人性化、智能、高效和安全等方面让您的实验变得更简单。

• 加热片固定卡槽

• 一体插拔式湿度控制室

• 全彩电容双语操作界面

• 微电极拉制稳定高效

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是否有时候，你也对微电极拉制仪耗材的选用拿不准：

不同实验，玻璃管选厚壁还是薄壁？

如何判断何时更换加热片？

到了什么程度要更换干燥剂？……

耗材没选对，往往直接影响实验结果！别急，本期干货从玻璃管、加热片、干燥剂三大部分，带你轻松get微电极拉制仪耗材选用！

PART.01 玻璃管篇

1、玻璃管材质类型有哪些，如何选择？

主要有3类，硼硅酸盐玻璃（Borosilicate, B）、铝硅酸盐玻璃（Aluminosilicate, A）和石英（Quartz, Q），均属于硬质玻璃。普遍使用的是硼硅酸盐玻璃，熔点最低（约800℃），应用广泛，包括膜片钳电极、细胞注射电极等等；石英熔点最高（约1700℃），电极尖端最硬，比较昂贵，较少使用。

2、玻璃管包装信息代表什么含义？

以瑞沃德的毛细玻璃管为例，型号B-15086-10F，B代表硼硅酸盐玻璃材质，150代表外径（outer diameter, OD）为1.5mm，86代表内径（inner diameter, ID）为0.86mm，10代表玻璃管长度为10cm，F代表带芯玻璃管（Filament）。重点关注内外径参数，其对电极尖端大小影响不同。

3、玻璃管的薄壁和厚壁如何区分，不同实验场景如何选择呢？

一般是将内径/外径的比例＜0.6称为厚壁玻璃管，≥0.7称为薄壁玻璃管，通常内外径之比在0.5-0.75，但其实两者无严格界限。厚壁拉制出的电极颈部较长，尖端较小，电容噪声较低，适合作为膜片钳记录电极等；薄壁拉制出的电极尖端较大，电阻较低，适合各种注射电极。

4、玻璃管带芯的作用是什么？

带芯的目的是为了便于灌注电极内液，尽快 排出电极内的气泡。这个“芯”指的是玻璃管内部侧壁上与玻璃管煅烧在一起的玻璃细管，在灌注电极内液时可以引导液体迅速到达尖端。如细胞内记录电极，尖端直径小于1μm时，灌注内液变得很困难，需要使用带芯的电极。

PART.02 加热片篇

1、加热片的类型有哪些，如何选择？

主要包括槽形加热片与盒形加热片，后者使用更为普遍。盒形加热玻璃管比较均匀，无中轴偏离情况，拉制时间较短，特别适合拉制膜片钳电极、显微注射电极等。

2、加热片的不同长度和宽度对拉制效果有什么影响？

加热片越宽，拉制出的电极颈部越长；加热片越窄，电极的颈部越短，尖端较小。

3、如何判断何时更换加热片？

加热片对于拉制电极的稳定性至关重要，当有以下情况时需进行加热片的更换：

a. 加热片表面坑坑洼洼，颜色灰暗，类似很旧的铝箔；

b. 加热片形状扭曲，凹陷明显，被玻璃管触碰过（如下图左图）；

c. 加热片的使用时间过长，或使用非常频繁，呈现变薄的状态。

4、加热片被烧坏的原因可能有哪些？

可能原因有：

a. 初次使用/更换玻璃管/更换加热片后，没有进行软化点测试直接调用程序拉制电极，此时的热量可能远大于软化点，从而导致烧坏加热片；

b. 热量值过大。在调试过程中，通过不断增加热量以获得高电阻或小口径的电极，当热量增加到一定程度时，会烧毁加热片。

因此，初次使用/更换玻璃管/更换加热片后首先要进行软化点测试，增加热量时一般不超过软化点的15%。

PART.03 干燥剂篇

1、干燥剂的组成及作用方式是什么？

干燥剂主要由无水硫酸钙组成，用于吸收空气冷却系统中的水蒸气。干燥剂对于拉制电极稳定性较为重要，当空气冷却系统湿度增大时，拉制出的电极尖端口径大小波动较大。因此需要多加注意干燥剂的颜色变化。

2、如何判断何时更换干燥剂？

干燥剂干燥状态下为蓝色或者蓝紫色，吸潮后变成粉红色。当干燥剂大部分为粉红色时（一般2/3时），需要更换干燥剂，保证拉制效果稳定。

通过阅读以上内容，相信很多小伙伴都有种豁然开朗的感觉~更加了解拉制仪配套耗材的选择及使用，可以大大提升我们的实验效率。

欢迎选购瑞沃德高品质带芯毛细玻璃管以及加热片，部分型号如下：

更有瑞沃德MP-500微电极拉制仪火热免费试用中，快来申请吧~

拉制玻璃微电极时，你是否总是问题重重

需要拉制电阻稳定的玻璃微电极，调试麻烦还不稳定？

注射针总是太软，尖端过脆而导致注射失败？

新手入门，有没有可以直接用的模板，不用自己调参数？

……

面对这些问题，包括北京大学、中国科学院大学、耶鲁大学、北海道大学在内的全/球100+高校及科研院所都有一种相同的绝招，那就是选择瑞沃德MP-500微电极拉制仪。

 01 智能设置满足多种电极需求

覆盖各类微电极实验需求，内置主流玻璃管和加热片的相关参数，并提供参考拉制程序，方便大家调用适合自己实验的参数，不用反复调试耗时耗力。15s即可完成参数设置，大大提高实验效率。除原有程序外，可额外储存150个用户自定义程序，各程序可复制粘贴，直接复用模板，不用大家反复调用参数。

02 兼具操作高效与维护便捷

采用全彩电容触摸屏，反应灵敏，双语操作系统上手难度低。兼具系统自检功能，可自动检测所有拉制仪部件是否处于正常工作状态，保证机器运转，减少排除故障时间。

  03 独有人性化设计提升使用体验

一体插拔式湿度控制室，拆卸方便，避免潮湿空气对于拉制结果的不利影响。加热合金片固定卡槽设计，使得更换不同型号加热片更加便捷，减少时间成本，增加稳定性，减少系统误差。

 04 全方位守护操作者与仪器安全

特有的棕色滚筒式前面板，易于翻开且有效阻隔加热片升温后的强刺激光，避免夹持臂的快速运动带来的安全隐患。同时软件兼具安全加热模式，避免加热片因温度过高损坏，保护客户及仪器安全。

自MP-500微电极拉制仪上市以来，获得了大家越来越多的关注与支持，助力国内外100+高校及科研院所的科研工作者们膜片钳、显微注射、微流控、细胞捕获等实验成功开展。

听听使用者怎么说？ 

1.“瑞沃德拉制仪参数设置很简单，以前摸索条件需要很久，现在根据提供的模板就能调节到合适的长度和开口，非常方便。”来自北京中医药大学生命科学学院整合医学中心老师们评价道。

2.“使用瑞沃德拉制仪拉制出的注射针长度和硬度都挺合适，而且还有内置的参数模板可以直接调用，对新手友好。”来自重庆医科大学基础医学院老师和同学们评价道。

3.“瑞沃德拉制仪拉制膜片钳电极时，微调模板参数就可以获得需要的口径和电阻，省时省力，稳定性不错，触摸屏用起来很灵敏。”来自西南医科大学心血管医学研究所医学电生理研究室老师评价道。

4.“我们主要用来拉制大鼠病毒注射针，用模板参数拉出就可以直接用，长度和硬度比较合适，操作流程也简单。”来自邵阳学院基础医学系同学们评价道。

此外，瑞沃德MP-500微电极拉制仪还可与MM-500电动显微操纵器、R-480玻璃微电极注射泵组成显微注射实验解决方案，除了覆盖常见病毒注射、眼球注射实验之外，还可针对线虫、斑马鱼等模式生物的胚胎、幼体实现精密显微注射，欢迎大家来咨询、免费试用MP-500微电极拉制仪~

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随着示波器的普及，现在示波器探头的耐压要求也越来越高了，普通的10:1的探头已不满足不了测试需要了，100:1、1000:1的探头需求逐渐上升，高压探头就粉墨登场了，那么在测试高压的过程中应注意些什么呢？PRBTEK探头培训学院建议大家看以下几点：

     1. 首先在测试的时候要时刻注意人身安全，人体不能接触高压部分或离高压比较近的部位，确保机器和人生安全。
     2. 测试时，探头的接地鱼夹一定要接地良好，这一点要特别注意，困为有很多高压探头，不光是靠示波器的内阻1M欧分压，而且还会在探头内部添加分压电阻形成。
     3. 高压探头也需要进行校准，这与普通10:1探头的校准方式一样。
     4. 高压探头的带宽，示波器高压探头其实带宽很低，大多客户使用的时候，带宽要求也很低，基本都在几百KHz,每条探头都有种降频曲线，也就是电压越高，带宽越低。
    市面上2000V 高压探头，失真度小，精度高，带宽高，全屏蔽，无干扰等优点，是测试电压在2000V左右的理想选择。

4000V高压探头，失真度偏高，精度偏低，前端不屏蔽，易受干扰，不适合测试小信号，但对上千伏电压的信号测试还是可以的。

如果你还想了解高压更高的探头，或者是测脉冲电压的，可以了解一下北极星/NorthStar或者是皮尔森/Pearson的探头，如果大家在选择高压探头过程中有什么问题，欢迎访问普科科技PRBTEK网。

在电生理和显微注射等实验时

是否常常感叹工作并不是很顺畅

拉制仪容易受环境影响，导致结果不稳定

更换配附件不方便，增加很多无效工作量

系统操作界面陈旧，使用起来很不简便

设置参数费时费力，稳定性还不好

一点变化调一遍，调一遍要调一天

瑞沃德新发布的MP-500微电极拉制仪

一机搞定上述所有问题

超全功能为你带来全新的使用体验

       瑞沃德MP-500微电极拉制仪是为解决膜片钳和显微注射等实验中的微电极问题所研发的高精度程控水平微电极拉制仪。

      MP-500有着前卫智能的操作界面及加热片限位槽等人性化设计，集安全与人性化于一体，满足微电极相关实验需求的同时，增强了用户体验，是进行微电极相关实验的优秀选择。可应用于电生理、显微注射技术、细胞捕获、显微探针等电极相关的科研方向。

TA能为你带来什么？

独有人性化设计让操作便捷

1、       一体插拔式湿度控制室，拆卸过程容易、减少更换加热片的时间成本；避免潮湿空气对于拉制结果的不利影响。

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智能设置满足多种电极需求

1、     满足众多场景实验需求。  

2、     内置主流玻璃管和加热片的相关参数，并配有参考拉制程序，降低使用门槛。15s即可完成参数设置，大大提高实验效率。除原有程序外，可额外储存99个用户自定义程序，各程序可复制粘贴。

兼具操作GX与维护便捷

1、       全彩电容触摸屏，反应灵敏；双语操作系统上手难度低。

2、       系统自检功能，可自动检测所有的拉制仪部件是否处于正常工作状态，保证机器运转安全，减少排除故障时间。

全方位守护操作者与仪器安全

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       此外，瑞沃德MM-500显微操纵器、R480玻璃微电极注射泵、71000全自动定位仪都可以与MP-500微电极拉制仪组成脑区、细胞等微量注射及其他相关实验方案哦，欢迎咨询。

我们在拉制仪的使用过程中，偶尔会遇到一些令人头疼的小问题：

课题组人太多，程序储存数量不够用；

拉制病毒注射用的电极，在拉制模板中没有合适的玻璃管参数；

操作不当加热片容易损坏，增加更换频率。

碰到以上情况，虽不影响拉制仪在实验过程中的正常使用，但是我们难免会为实验不顺畅而感到烦心！想客户之所想，急客户之所急，瑞沃德迎来了MP-500微电极拉制仪的优化升级！让大家做实验无后顾之忧~

MP-500微电极拉制仪详情

三大升级，让操作更舒适便捷

1. 用户程序增加至储存150个用户自定义程序，满足更多记录需求，且可复制粘贴使用。

2. 在内置主流玻璃管和加热片的相关参数的基础上，新增注射泵使用的玻璃管参数（专注于病毒注射等实验），并配有参考拉制程序，降低使用门槛。15s即可完成参数设置，大大提高实验效率。

3.安全加热模式调整为默认开启，控制温度调节范围在软化点值的±10%，避免误操作以及加热片温度过高而损坏，保护使用者及仪器安全。

还有更多优势，助力微电极相关实验

•  适用范围广，智能设置可满足多种电极拉制需求；

• 人性化设计，一体插拔式湿度控制室与加热片固定卡槽，提升操作性；

• 全彩电容触摸屏操作灵敏，系统自检功能维护便捷；

• 全方位守护操作者及仪器安全。

瑞沃德MP-500微电极拉制仪、MM-500电动显微操纵器、R-480玻璃微电极注射泵可组成显微注射实验解决方案，除了覆盖常见病毒注射、眼球注射实验之外，还可针对线虫、斑马鱼等模式生物的胚胎、幼体实现精密显微注射。

显微注射实验解决方案

为了更好地帮助客户快速开展实验，2022年6月-9月，瑞沃德特推出显微注射组合限时购买优惠活动，详情见下图海报！如您正有此实验的需求，还可识别下方二维码免费试用噢~

       防腐隔膜真空泵有着真空度高、抗腐蚀性能佳、完全回收溶剂、操作维护简单等优点。原理是一个安装在偏心曲轴上的弹性膜片在电机的带动下做上下往复运动，是的腔体发生形变从而实现介质的抽入和排出。隔膜型实验室真空泵在转移、疏散以及压缩的过程中完全不需要油，真正实现了无污染传输。下面我们来介绍下防腐隔膜真空泵的安装步骤。

防腐隔膜真空泵的安装步骤如下：

　　1、对于有冷却水的隔膜真空泵，按规定接通冷却水。

　　2、如隔膜真空泵口安装电磁阀时，阀与隔膜真空泵应同时动作。

　　3、当隔膜真空泵排出气体影响工作环境时，可在排气口装接管道引离或装接油雾过滤器。

　　4、隔膜真空泵应安装在地面结实坚固的场所，周围应留有充分的余地，便于检查、维护、保养。

　　5、隔膜真空泵底座下应保持地基水平，底座四角处建议垫减震橡皮或用螺栓浇制安装，确保隔膜真空泵运转平稳，振动小

　　6、隔膜真空泵与系统的连接管道应密封可靠，对小隔膜真空泵可采用金属管路连接密封垫采用耐油橡胶，对小隔膜真空泵可采用真空胶管连接，管道管径不得小于隔膜真空泵吸气口径，且要求管路短而少弯头。(焊接管路时应清除管道中焊渣，严禁焊渣进入隔膜真空泵腔。)

　　7、在连接管路中，用户可在隔膜真空泵进气口上方安装阀门及真空计，随时可检查隔膜真空泵的极限压力。

　　8、按电动机标牌规定连接电源，并接地线和安装合适规格的熔断器及热继电器。

　　9、防腐隔膜真空泵通电试运转时，须取下电机皮带，确认隔膜真空泵转向符合规定方向方可投入使用，以防隔膜真空泵反转喷油。(转向按防护罩指示方向)。

治 疗性寡核苷酸有着独特的基因表达调控优势，随着其成药性潜力被不断挖掘，与其相关的研发、生产和商业化进程得到快速发展。与传统化学药物的研究过程类似，寡核苷酸药物临床前均需要进行体外和体内的代谢行为研究，阐明药物药效及代谢途径。

寡核苷酸药物的代谢行为

寡核苷酸药物的代谢行为与小分子药物存在很大不同，它几乎不经肝微粒体酶代谢，主要通过血液和靶器官中核酸内切酶和核酸外切酶水解磷酸酯键形成小的核酸片段。从3’-端通过核酸外切酶水解生成主要代谢产物，其次是5’-端通过核酸外切酶水解产物及核酸内切酶产生的代谢物。为了提高寡核苷酸药物的稳定性、药效及安全性，药物会被化学修饰，包括硫代磷酸、2’-O-甲氧基乙基核糖、N-乙酰化半乳糖胺修饰。寡核苷酸药物的药代动力学性质与核酸磷酸主链及核糖的化学修饰类型密切相关。

寡核苷酸药物代谢产物鉴定

目前寡核苷酸药物代谢产物鉴定的主要分析方法是基于LC-HRMS开展的，通过全扫描和二级碎片信息的采集，获得寡核苷酸及其代谢产物信息。沃特世高分辨质谱Xevo G3 QTof结合waters_connectINTACT Mass和CONFIRM Sequence应用程序平台，为寡核苷酸代谢物鉴定提供有效解决方案。

寡核苷酸药物代谢物产物鉴定中的分析难点

1)色谱分离

寡核苷酸药物分子具有强极性，利用常规反相色谱分离方法较难保留，通常使用反相离子对色谱（IP-RPLC）、亲水色谱（HILIC）、离子交换色谱（IEX），其中IEX和IP-RPLC的分离度优于HILIC，但是IP-RPLC跟质谱兼容性更好。由于寡核苷酸药物代谢物复杂，且存在与母药性质非常接近的n-1代谢物，给分离带来很大挑战。所以目前寡核苷酸药物代谢产物鉴定以IP-RPLC为常用方法，使用三乙胺（TEA）、N,N-二异丙基乙胺（DIPEA）、乙酸三乙胺（TEAA）等和六氟异丙醇（HFIP）组成离子对试剂。

由于寡核苷酸药物分子的多负电性，在色谱分离系统中存在非特异吸附问题，严重影响色谱分离度和低含量代谢物的发现。沃特世ACQUITY Premier系统采用Max Peak高性能表面技术，能够减少金属敏感分析物的非特异性吸附，减少分析物损失，提高分析重现性。针对寡核苷酸药物色谱分离难点，Premier技术可以显著改善寡核苷酸药物的峰形、回收率和重现性，无需系统和色谱柱钝化。

图1. 全硫代磷酸化寡核苷酸反义药物GEM91 ACQUITY Premier方案和标准方案比较。

2) 高分辨质谱分析及代谢产物鉴定

通过Xevo G3 QTof提供高质量分辨率、灵敏度和可靠性，全扫描和二级碎片采集MSE技术结合，全面获得寡核苷酸及代谢产物的质谱信息。寡核苷酸的代谢产物鉴定和未知代谢物序列确认过程复杂，需要专业的软件进行辅助识别和分析。

waters_connect INTACT Mass应用程序，可以自动进行寡核苷酸质量确认，实现更快的样品分析。可定制的化合物库，允许终端用户输入自定义同位素模型，支持自动化核酸确认。

waters_connect CONFIRM Sequence应用程序平台可以自动确认治 疗药物及其代谢物的核酸序列，对未知代谢物进行序列确认。给定一个目标核酸序列，CONFIRM Sequence应用程序将自动生成一个预测碎片列表，并搜索这些碎片离子的二级质谱数据，标注所有匹配。该应用程序可以自动处理来自Xevo G3 QTof的MS/MS数据。当处理完成时，一个可视化的“点图”将显示寡核苷酸序列和所有已发现的片段以及序列覆盖率的百分比。

图2.核酸药物完整分子量分析结果。

图3. 核酸二级序列确认

案例分享

以ASO药物Eluforsen作为研究对象开展代谢物鉴定工作，利用LC-QTof平台实现Eluforsen及其代谢物的成功分离和检测，Eluforsen及其代谢物代表性色谱图见图4。结合UNIFI的数据处理功能，成功鉴定Eluforsen的代谢产物主要以3’端和5’-端的水解产物为主，结果见表1。利用LC-QTof平台也可以实现代谢产物形成速率的测定，结果见图5。

图4. 核酸药物Eluforsen及其代谢物的代表性提取离子流图。

图5. 小鼠肝脏匀浆中Eluforsen 3’端水解产物的形成速率。（50 μg/mL eluforsen与肝脏匀浆孵育0, 24, 48, 72, 96, 120 h）

表1. 纯化核酸酶和小鼠肝脏匀浆孵育后体外产生的Eluforsen代谢物以及小鼠和猴子肝脏和肺样品中体内产生的代谢物。

4) 总结

寡核苷酸药物因特殊的结构特点具有极性大、负电性等特性，给代谢物分离和鉴定都带来很大的挑战。沃特世Premier UPLC技术可以有效解决寡核苷酸药物非特异性吸附问题，提高IP-LC分离性能，提升低含量代谢物的检出率。Xevo G3 QTof全扫描和二级采集MSE技术结合，提供更全面的寡核苷酸及代谢产物质谱信息，利用waters_connect平台的数据处理能力实现寡核苷酸药物代谢产物鉴定和未知物确证。沃特世持续致力于提供更满足客户需求的寡核苷酸药物代谢研究的解决方案，助力客户加速药物研发。

参考文献：

1. Jaeah Kim, Babak Basir, Chopie Hassan, et. al., Molecular Therapy: Nucleic Acids, 2019, 17, 714-725.

2. Ju Liu, Jing Li, Chris Tran, et. al., Bioanalysis, 2019, 11(21), 1967-1981.

耐压测试仪调试的参数是多少？