全部评论(1条)
-
- a520131400701 2016-12-30 00:00:00
- rna提取后做dna消化怎么做 对于某些用途(例如用BAL31进生活化或用T4噬菌体多核苷酸激酥标记质粒DNA的限制切片段的5'端),必须获得无RNA污染的DNA制品。尽管在通过氯化铯-溴化乙锭梯度平衡离心所制备的质粒DNA中,这样的RNA污染物的质量已很少,但其中的RNA分子数仍可能相当可观,并可在限制酶消化反应的全部5'端中占据较大的比例。通过下述方法,可以从质粒制品中去除RNA。通过Bio-Gel A-150m或Sepharose CL-4B进行层析 1、 制备质粒DNA。 2、 有等体积的经TE(pH8.0)平衡后的酚抽提1次。 3、 将至多1ml的水相铺在经TE(pH8.0)和0.1%SDS平衡的Bio-Gel A-150m或Sepharase CL-4B(1x10cm)柱上。 4、 将DNA装入层柱并在柱的上部连接上含0.1%SDS的TE(pH8.0)的贮液瓶,立即开始以0.5ml流出液为1流进行收集。 5、 当收集到15份时,关闭柱底部,为明确质粒DNA的分布情况,可在每份收集物中取10μg样品,通过0.7%琼脂糖凝胶电泳或溴化乙锭荧光进行分析。 6、 将含质粒DNA的组成合并在一起,加2倍体积的乙醇于4℃沉淀10min,然后以4℃大于10 000rpm离心15min,以回收DNA。
-
赞(12)
回复(0)
热门问答
- rna提取后做dna消化怎么做
2016-12-29 11:05:16
303
1
- 提取血浆后,剩下的血细胞还能提取DNA,RNA吗
2018-01-12 11:31:26
284
1
- 提取总RNA的过程中,如何判断DNA是否被DNAase消化完全?
2012-07-29 11:00:56
536
6
- 高氯酸提取DNA和RNA
- 有一篇文献中使用高氯酸同时提取DNA和RNA,具体步骤如下:取2mL0.5% 组织匀浆液,加入 1mL0.6mol/L冷高氯酸,冰上放置10min后500g离心10min, 弃上清,沉淀物用2mL0.2mol/L高氯酸洗涤两次,两次洗涤后都以500g离心l0min,弃上清,将沉淀物溶解于2mL0.3mol/L... 有一篇文献中使用高氯酸同时提取DNA和RNA,具体步骤如下:取2mL0.5% 组织匀浆液,加入 1mL0.6mol/L冷高氯酸,冰上放置10min后500g离心10min, 弃上清,沉淀物用2mL0.2mol/L高氯酸洗涤两次,两次洗涤后都以500g离心l0min,弃上清,将沉淀物溶解于2mL0.3mol/L的KOH,37℃条件下培养60min,然后加入1mL1.2mol/L高氯酸,冰上放置10min,500g离心15min,收集上清液(I),沉淀物用2mL0.2mol/L高氯酸溶解后再离心,再收集上清液(II),集中上清液(I和II)用于RNA浓度的测定,沉淀物用于测定DNA的浓度。 不知各位有没有用过这种方法,高氯酸的作用是什么?请赐教! 展开
2009-07-09 00:49:16
684
2
- 请教:用蛋白酶K消化组织提取DNA,灭活后是否需
2017-04-02 15:11:04
336
1
- RT-PCR是提取DNA还是RNA
2018-11-18 19:58:44
334
0
- 提取的DNA怎么做PCR
2018-11-20 16:48:05
433
0
- 做DNA怎么做在哪做
2017-05-12 20:03:32
426
1
- ctab法提取dna 提取DNA、RNA前为什么要进行高压灭菌
2012-06-19 11:08:50
1333
5
- 腹水能提取DNA或RNA吗
2017-02-28 04:12:25
521
1
- trizol法提取rna 如何去除dna
2016-12-17 07:13:03
716
1
- 提取dna和rna方法有什么区别
2018-12-10 21:09:35
316
0
- 提取RNA与提取DNA方法的区别与联系?
2010-06-07 13:10:51
732
4
- 为什么DNA和RNA的提取方法不同?
- 二者的原理有何不同?
2008-12-14 05:17:06
551
3
- ctab法提取rna和dna的异同
2017-10-19 22:53:08
651
1
- 如何从组织中提取RNA和DNA
2017-05-30 10:30:19
551
1
- 提取RNA时如何去除DNA的污染
2018-06-26 01:16:40
438
1
- DNA的粗提取与鉴定怎么做!
- 生物
2012-08-02 21:43:15
540
1
- DNA的粗提取与鉴定怎么做!
- 生物... 生物 展开
2012-08-02 21:37:58
534
2
- RNA提出来后,DNA酶如何使用?
2011-01-09 10:16:17
251
2
9月突出贡献榜
- 单位预算忏悔
- 饿啊地方
- 空中有牛
- 依然相信你会
- 本生(天津)健康科技有限公司
- 猫合宝
- 广东皓天检测仪器有限公司
- 武汉安德信检测设备有限公司
- 上海一科仪器有限公司
- futu888
- 牛牛麻麻2
- 东莞市皓天试验设备有限公司
推荐主页
最新话题
参与评论
登录后参与评论