DNA提取是为什么要加入两倍体积无水乙醇？

哈尔滨生殖保健 2015-03-17 23:31:51 2048 浏览

说是沉淀DNA，但是沉淀原理是什么，而且为什么是两倍体积

参与评论

登录后参与评论

全部评论(2条)

知訫莮孩 2015-03-18 00:00:00

溶解的原理是被溶解溶质的分子分散到溶解该物质的溶液分子间隙的过程，这个原理同样适用于DNA溶于水的过程，即DNA分子同水分子相互结合。乙醇分子和水的结合力大于DNA与水的结合力，故乙醇分子会抢占原来已经溶于水的DNA分子的位置，DNA分子因此被析出。为保证所形成的乙醇溶液的浓度，要加两倍以上体积的乙醇，这样能形成60%以上浓度的乙醇溶液，不一定是两倍，但是一定要高于这个值，否则DNA不容易析出。DNA提取的下一步加70%洗涤也是这个原理，其实量多量少不重要，关键是达到一定的条件。

赞(17)

回复(0)

评论

评论
登录后参与评论
CH68453622 2017-09-20 02:48:58

　　用无水乙醇沉淀DNA，这是实验中Z常用的沉淀DNA的方法。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶，乙醇与核酸不会起任何化学反应，对DNA很安全，因此是理想的沉淀剂。　　DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在，当加入乙醇时，乙醇会夺去DNA周围的水分子，使DNA失水而易于聚合。　　一般实验中，是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混合，其乙醇的Z终含量占67％左右。因而也可改用95％乙醇来替代无水乙醇（因为无水乙醇的价格远远比95％乙醇昂贵）。但是加95％的乙醇使总体积增大，而DNA在溶液中有一定程度的溶解，因而DNA损失也增大，尤其用多次乙醇沉淀时，就会影响收得率。折中的做法是初次沉淀DNA时可用95％乙醇代替无水乙酵，Z后的沉淀步骤要使用无水乙醇。也可以用0.6倍体积的异丙醇选择性沉淀DNA。一般在室温下放置15－30分钟即可。

赞(13)

回复(0)

评论

评论
登录后参与评论