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  °牵挂 2014-11-26 00:00:00

  　　用于CD4+、CD8+T细胞数的检测方法分为自动检测方法和手工操作法。自动检测方法主要是指使用流式细胞仪(主要有多平台三级程序法和单平台一步法)和专门的细胞计数仪。手工操作法包括几种手工操作试验，需要显微镜或酶联免疫设备(如ELISPOT等)。目前临床通常使用的是流式细胞仪。流式细胞仪是以流式细胞术为基础发展起来的计数和分析细胞的设备，主要仪器有BD公司的FACSClibur。和库尔特公司的ESP。流式细胞术是一项集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的现代细胞分析技术。目前，应用流式细胞仪测定全血中的CD4+T细胞亚群有两种方法：一种为多平台法，此方法操作复杂，费时，随机误差大；另一种为单平台法，较为简便、实用、省时和准确。但流式细胞仪不是简单的全自动仪器，需要操作人员具有较高的仪器操作技术水平和较全面的知识背景。从细胞荧光技术上分直接免疫荧光标记法和间接免疫荧光标记法，其中直接免疫荧光标记法操作简便，结果准确，易于分析，适用于同一细胞群多参数同时测定。虽然直标抗体试剂成本较高，但减少了间接标记法中较强的非特异荧光的干扰，因此更适用于临床标本的检测。间接免疫荧光标记法费用较低，二抗应用广泛，多用于科研标本的检测。但由于二抗一般为多克隆抗体，特异性较差，非特异性荧光背景较强，易影响实验结果，所以标本制备时应加入阴性或阳性对照。另外，由于间标法步骤较多，增加了细胞的丢失，不适用测定细胞数较少的标本。 　　

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