从植物蛋白水解液中提取复合氨基酸

老骥玩心难奈何 2013-09-09 22:57:12 471 浏览

请问如何从植物蛋白水解液（使用蛋白酶水解）中提取复合氨基酸，哪位知道请给一个详细的流程图，要详细点的。方法Z好常规些，我们的实验设备有限。... 请问如何从植物蛋白水解液（使用蛋白酶水解）中提取复合氨基酸，哪位知道请给一个详细的流程图，要详细点的。方法Z好常规些，我们的实验设备有限。展开

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zky914 2013-09-10 00:00:00

详细目录列表如下： 1- 蛋白水解物的制造方法资 2- 一种用酶水解法从蝇蛆中提取蛋白质和甲壳素及用甲壳素制备壳聚糖的方法料 3- 培养的蛋白水解物来 4- 重组腺苷酸环化酶及其用于筛选具有蛋白水解活性的分子的用途源 5- 蛋白水解物其制造方法以及含有该蛋白水解物的饮食品 : 6-一种多肽——人含糖基水解酶家族17特征性序列片段的蛋白-9.57和编码这种多肽的多核苷酸博 7 植物蛋白水解复合酶及其制备方法谷 8-蛇毒蛋白水解酶在制药中的应用资 9- 用非蛋白质水解激活的凝血酶受体的激动剂刺激软骨生长讯 10- 枯草蛋白酶309突变体吸附作用降低而水解作用增强 11蛋白水解产物和制备该产物的方法 0 12 禽类角质蛋白水解法制备酱油精的方法 7 13- 氨肽酶GX以及用它水解蛋白质的方法 5 14- 以含蛋白质的废料为原料酶法提取蛋白质水解物的方法及其产品 5 15- 编码蛋白水解酶之基因的分子克隆及表达 : 16-BG48618 制取棉籽蛋白的碱热水解法 2 17-BG48618 新的蛋白水解酶及其在洗涤剂中的应用 8 18-BG48618 一种水解植物蛋白的生产方法及用该方法制得的产品 5 19-BG48618 头孢菌素乙酰水解酶基因及由所说的基因编码的蛋白质 2 20-BG48618 水解角蛋白的方法 6 21-BG48618 加有YZ蛋白水解酶的硼－多羟基化合物配合物助洗剂的液体洗涤剂 6 22-BG48618 含有一种芳基硼酸以YZ蛋白水解酶的液体洗涤剂 2 23-BG48618 YZ蛋白水解酶的含纤维素酶的洗衣用液体洗涤剂 6 24-BG48618 固定化复合外肽酶蛋白质全水解及脱苦方法 25-BG48618 微生物菌种Ｗ，含该微生物的酶组合物，该微生物的应用及尤其水解角蛋白的方法 26-BG48618 用胃蛋白酶或动物胃粘膜水解动物血制备食用血红素 27-BG48618 水解蛋白工艺 28-BG48618 酶法水解蛋白食品的制备方法 29-BG48618 改性水解植物蛋白微球及其制备方法的用途 30-BG48618 一种从动物骨骼中提取酶水解蛋白质方法 31-BG48618 无异味水解蛋白的生产方法及应用 32-BG48618 生产蛋白质水解物的方法 33-BG48618 乳蛋白部分水解产物及其制备方法 34-BG48618 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一种新的多肽——人ATP依赖的丝氨酸蛋白水解酶12和编码这种多肽的多核苷酸 87-BG48618 一种新的多肽——人ATP依赖的丝氨酸蛋白水解酶11和编码这种多肽的多核苷酸 88-BG48618 一种新的多肽——人ATP依赖的丝氨酸蛋白水解酶9和编码这种多肽的多核苷酸 89-BG48618 一种新的多肽——人ATP依赖的丝氨酸蛋白水解酶13和编码这种多肽的多核苷酸 90-BG48618 一种新的多肽——人ATP依赖的丝氨酸蛋白水解酶9.1和编码这种多肽的多核苷酸 91-BG48618 一种新的多肽——人ATP依赖的丝氨酸蛋白水解酶21和编码这种多肽的多核苷酸 92-BG48618 一种新的多肽——人ATP依赖的丝氨酸蛋白水解酶15和编码这种多肽的多核苷酸 93-BG48618 一种新的多肽——人ATP依赖的丝氨酸蛋白水解酶79和编码这种多肽的多核苷酸 94-BG48618 一种新的多肽——人ATP依赖的丝氨酸蛋白水解酶10.2和编码这种多肽的多核苷酸 95-BG48618 一种新的多肽——人ATP依赖的丝氨酸蛋白水解酶12.2和编码这种多肽的多核苷酸 96-BG48618 一种新的多肽——人ATP依赖的丝氨酸蛋白水解酶18和编码这种多肽的多核苷酸 97-BG48618 一种新的多肽——人ATP依赖的丝氨酸蛋白水解酶9.2和编码这种多肽的多核苷酸 98-BG48618 一种新的多肽——人ATP依赖的丝氨酸蛋白水解酶12和编码这种多肽的多核苷酸 99-BG48618 一种新的多肽——人ATP依赖的丝氨酸蛋白水解酶11和编码这种多肽的多核苷酸 100-BG48618 一种新的多肽——人ATP依赖的丝氨酸蛋白水解酶11和编码这种多肽的多核苷酸 101-BG48618 一种新的多肽——人ATP依赖的丝氨酸蛋白水解酶10和编码这种多肽的多核苷酸 102-BG48618 一种新的多肽——人遍在蛋白C端水解酶9和编码这种多肽的多核苷酸 103-BG48618 一种新的多肽——人ATP依赖的丝氨酸蛋白水解酶35和编码这种多肽的多核苷酸 104-BG48618 一种新的多肽——人遍在蛋白C端水解酶13和编码这种多肽的多核苷酸 105-BG48618 一种新的多肽——人ATP依赖的丝氨酸蛋白水解酶34和编码这种多肽的多核苷酸 106-BG48618 一种获得蛋白质水解物的方法 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QuEChERS方法已经成为工业标准、净化和提取各种食品样品农药的行业标准。不幸的是，这个过程是手动的、多步骤的，可能很耗时，而且充满了错误。此外，有许多不同的QuEChERS试剂盒适用于各种食物类型，以至于让人不知所措。各种食物类型的QuEChERS试剂盒，要确定哪种试剂盒最适合一些特定的样品，也可能会让人无从下手。在本应用说明中，我们讨论了EDGE®自动萃取系统与Q-Matrix® Hydra的使用。EDGE的回收率与传统的QuEChERS方法相同，不同之处在于EDGE在一个自动平台上，包括样品冲洗、过滤和系统清洗。

简介

作为消费者，我们想知道食品中哪些东西可能是有害的，包括杀虫剂、填充物和任何可能从包装中浸出的东西。作为一个制造商，我们需要确保我们的产品是安全的，并且在污染物的允许范围内。农药分析尤其值得关注，因为接触农药的长期影响是有据可查的。虽然使用QuEChERS方法进行农药测试已经非常常规，但仍有改进的空间。以自动化的方式在更短的时间内实现更完整的提取，多年来一直是食品制造商的要求。随着检测限的不断降低，批量发布的周转时间变得更加紧迫，一种更快更有效的提取方法是必要的。

在这个实验中，QuEChERS和EDGE自动溶剂萃取技术将被比较。QuEChERS在一个多步骤的手工清理和提取过程中使用盐和吸附剂。使用QuEChERS，提取一个样品的总时间为20至60分钟。EDGE自动溶剂萃取系统在一次7分钟内完成了样品的萃取和清理。EDGE自动溶剂萃取系统在一个7-9分钟的周期内完成样品萃取和清理，包括样品漂洗、过滤和系统清洗。Q-Matrix Hydra的使用进一步简化了提取过程，它能就地去除湿样品中的水分，因此不需要对样品进行额外处理。

材料和方法

试剂

一个草莓CRM（T19253QCSale）购自FAPAS。Q-Matrix Hydra是CEM公司的产品。乙酸钠、硫酸镁和伯仲胺是从Silicycle公司批量购买的。样品通过EDGE或QuEChERS方法进行提取。使用含1%乙酸的乙腈作为提取、冲洗和洗涤溶剂。

QuEChERS方法

将一部分10克的草莓CRM称量到一个50毫升的离心管中。向该管中加入体积为10mL的含1%乙酸的乙腈，并在VWR模拟涡旋混合器上涡旋1分钟。将1.5克醋酸钠和6克硫酸镁加入管中，盖上盖子，摇晃1分钟，然后在Thermo CL2离心机上以6000rpm离心5分钟。

将1mL的乙腈加入到一个20mL的离心管中，其中含有150mg的硫酸镁和50mg的伯胺。摇动试管1分钟，并以6000rpm离心5分钟。上清液转移到一个小瓶中进行分析。所有的样品和空白都是一式三份。

样品制备

将2.5克的Q-Matrix Hydra和5或10克的草莓CRM称量到装有S1 Q-Disc®组合（C9+G1+C9夹层）的Q Cup®中。使用Q-Screen®工具将一个QScreen®放置在每个样品的顶部。将Q-Cups和50mL聚丙烯锥形管放在一个架子上，然后将架子滑到EDGE的位置。对EDGE进行编程，对5克样品采用标准的农药残留法，对10克样品采用改良的农药残留法，其中包括搅拌和多次漂洗以提高分析物的回收率。提取物被转移到Q-Dry™溶剂蒸发器中，蒸发到<5毫升。然后用含1%乙酸的乙腈将提取液稀释到5毫升。所有的样品和空白都是一式三份。提取物被转移到小瓶中进行分析。

用EDGE方法检测5克样品中的杀虫剂

Q-Disc: S1 Q-Disc stack (C9+G1+C9 夹层)

样品量: 5 g

循环1

提取溶剂：乙腈加1.0%醋酸（v/v）

顶部添加：25毫升

底部加入：0 mL

冲洗：5 mL

温度：40 ºC

保持时间: 03:00 (mm:ss)

洗涤1

洗涤溶剂：乙腈加1.0%乙酸（v/v）

洗净量：10mL

温度：40 ºC

保持时间：00:03 (mm:ss)

用EDGE方法检测10克样品中的杀虫剂

Q-Disc: S1 Q-Disc stack (C9+G1+C9 夹层)

样品量: 10 g

循环1

提取溶剂：乙腈加1.0%醋酸（v/v）

搅拌：02:00 (mm:ss)

顶部添加：15mL

底部添加：0毫升

冲洗：5 mL

温度：40 ºC

保持时间: 04:00 (mm:ss)

循环2（仅漂洗）

提取溶剂：乙腈加1.0%醋酸（v/v）

顶部添加：0毫升

底部添加：0 mL

冲洗：10 mL

温度：- - -

保持时间：- -:- -

洗涤1

洗涤溶剂：乙腈加1.0%乙酸（v/v）

洗净量：10mL

温度：40 ºC

保持时间：00:03 (mm:ss)

分析

每种提取物的体积为2μL，被注入带有Xevo TQD三重四级质谱仪的Waters Acquity UPLC中。使用Restek ARC-18,2.7µm,100x2.1mm色谱柱进行分离，流速为0.4mL/min。洗脱程序为7分钟，从95%的A（水加10mM乙酸铵和0.2%甲酸）和5%的B（甲醇加10mM乙酸铵和0.2%甲酸）到100%的B。每种农药的定量都使用了MRM转换。每个样品都进行了一式三份的分析。

结果和讨论

EDGE在7-9分钟内有效的提取了草莓CRM中的杀虫剂，包括过滤、冷却和系统清洗。表1显示了EDGE和QuEChERS对草莓CRM中多种农药的回收数据。在EDGE和QuEChERS的提取过程中，获得了可比的回收率。值得注意的是，QuEChERS方法是为草莓这样的基质开发的，所以应该有良好的回收率。EDGE 能够与QuEChERS方法在标准基质（如草莓）上的效率相匹配，证明它可以成为一种合适的替代方法。QuEChERS方法是一个繁琐的手工操作过程，而EDGE提供了一个简单的自动提取优势，它们回收率相当。

表1.通过EDGE和QuEChERS提取的草莓CRM回收数据

总结

在EDGE自动提取系统上使用的提取过程允许在一个步骤中有效的提取草莓的CRM。通过一种自动化方法，农药被有效的提取出来，其回收率与传统的QuEChERS工艺相当。在EDGE上增加搅拌功能，与不使用搅拌时相比，EDGE增加了搅拌功能，可以提取更多的样品，使用更少的溶剂。样品数量的增加使人们对样品的均匀性有了更大的信心。此外，与QuEChERS方法相比，至少实现了节省60%的时间，促使样品产量的增加和实验室整体生产率的提高。

在这项研究中，草莓CRM的湿食品样品是重点。然而，同样的方法也适用于所有的食品样品，湿的和干的，以及广泛的农药。一些农药是众所周知易受温度影响的。对于温度敏感的样品，可以在EDGE上进行室温提取。EDGE具有高效的农药提取方法，是那些希望拥有简单的自动化、对所有食品样品可实现重复结果的测试实验室的理想选择。

2023-01-08 12:01:30 196 0

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