现有的测序技术有哪些，技术原理和应用有哪些。

梦雪幻柳 2012-11-01 17:45:31 397 浏览

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fwjb4naio 2012-11-02 00:00:00

你有邮箱么，我发你

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abc040621 2012-11-07 00:00:00

这要写出来得多少字··简单说下吧。 diyi代测序：以ABI公司为代表的sanger测序，测序仪为3730.原理是利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物，直到掺入一种带有荧光标记的终止核苷酸为止，通过捕获荧光来进行分析，Z后得到一系列的峰图，分析可得知其序列。第二代测序就多了，罗氏为代表的454测序，illumina的solexa测序以及ABI的solid测序，各有特色。不过现阶段应该是illumina的solexaZ为普遍。测序原理都是SBS（边合成边测序），具体LZ度娘吧，资料很多。

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热解吸技术的应用有哪些？

通常，以下四种类型样品基质中有可热解吸的挥发性组分时，可使用热解吸技术：
    ①食品中的挥发性香味和风味化合物组成；
    ②固体基质中可热降解的化合物组成，诸如聚合材料中的增塑剂、添加剂、单体等；
    ③样品基质中的不想要的组分，诸如商品中残存的溶剂等；
    ④有目的地收集样品基质中挥发性组分，诸如在吸附管上采集空气中的挥发性有机污染物（VOCs）。
    diyi类样品是食品。分析化学家已经使用热解吸技术用于食品分析有许多年了，不但可测定天然食品中的香味物质，而且可测定食品中的残存物和污染物。诸如：在50℃条件下，可收集红苹果的香味组分。将苹果放进一个密闭的可控制温度的容器中（具有95mm 直径和可进行温度控制）。然后使用真空泵将容器中空气抽出并通过一个Tenax捕集阱，其出口流量为25ml/min收集10min。再将捕集阱中热解吸（275℃保持2min）出来的样品输送到色谱中的分离柱［0.53mm（i.d.）］并进行测定（FID）。使用此种采样方法可以比较食品风味的变化情况，监测与一种食品相关的挥发性有机物的状况，鉴定食品在整个时间过程中它们可能发生的变化。
    第二类是样品中的添加剂，诸如聚合物产品中的增塑剂、添加剂等。这些样品经热解吸的降解产物有助于纵火（arson）案件中残存瓦砾（debris）分析测定，有助于土壤中污染物的定性测定，有助于聚合物材料的性能分析等等。例如：被污染的20mg土壤样品直接放在石英管中并快速加热到400℃使用铂丝）后，通过GC-MS 在线测定，经载气吹扫通过一个0.25mm（i.d.）的毛细管并直接进入MS可以快速地测定出芘和荧蒽等多环芳烃，无需经过其他任何样品制备程序。还有，使用上述的装置可查看聚合物样品中的增塑剂。将1mg聚氯乙烯塑料加热到300℃时，可测定出一个非常强的色谱峰——邻苯二甲酸-2-乙基己酯。

第三类样品是物质中残存的挥发性组分测定，如制药中的残存溶剂、聚合物中残存单体和其他的低聚物（oligomers）。例如：10mg硅胶样品被加热到275℃并保持30min后，经氦气吹扫（30ml/min0）出来的组分被收集在Tenax捕集阱中。然后，在300℃条件下热解吸并反向吹扫捕集阱将解吸产物药送到大口径毛细管柱进行GC/FID测定。色谱测定结果表明，至少有15个甲基硅氧烷的低聚物被测定出来。
Z后一类样品是使用吸附剂管采集环境大气样品中的挥发性有机污染物。环境样品经采样管预浓缩后，通过热解吸并将解吸产物吹扫出来，直接输送到GC或者在柱上再冷聚焦后进行GC分析。结果表明，在canister采样器中取出100ml 空气样品通过Tenax捕集阱，然后热解吸进入GC/PID。测定的挥发性组分包括2-和3- 氯乙烯、甲苯、乙苯、二甲苯等。

热解吸与气相色谱或者质谱联用，具有广泛应用范围，可解决复杂类型样品的分析测定。包括环境材料、燃料资源、食品、制药、聚合物和其他各种商品。热解吸进样的主要特点是可用于复杂材料的分析，无需使用溶剂并可实现自动化。
被测物质从吸附材料上被全部地解吸出来是基础，即通过加热使样品中有机物挥发出来而不发生降解且不产生不想要的合成产物。由此，控制样品温度、加热速率和采样时间是很重要的。因为有机物与特定的吸附材料具有很宽范围的挥发性和亲和性，控制采样参数有助于富集样品并传输到色谱仪器。优化这些分析过程常常涉及到采样体积、温度、载气流速、吸附剂选择、吸附效率、色谱测定条件、与仪器的接口等等。

    无需溶剂的热解吸样品制备技术具有几个优点：
    ①热解吸可进行的样品组分的色谱分析，而不是一部分，由此使灵敏度大大增加。早期的热解吸技术主要应用在环境样品分析中，可完成样品中10-12水平的物质浓缩和测定。
    ②在色谱分析中没有溶剂峰，可进行宽范围挥发性物质分析，色谱保留值短的样品组分不会受到溶剂峰的干扰。
    ③热解吸不使用溶剂，减少和消除了由于溶剂汽化和废弃物对环境污染产生的影响。
    热解吸的缺点是：样品完全解吸可能需要较长的时间，需要考察和计算采样量，样品处理的费用可能较高。大的和重的污染样品或者含有较不挥发性组分的样品，常常需要很长的吹扫时间以完全地收集它们。热解吸是一种非常灵敏的技术，所以常常被用来测定小体积样品，但是，令人关切的问题是样品的代表性，特别是应用于庞大的样品样本时。此外，除了热解吸装置本身的较高的费用之外，冷捕集和二次冷聚焦过程增加了样品处理的时间和费用。

（来源：广州踏实德研仪器有限公司）

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