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一文看懂防腐隔膜真空泵的九个安装步骤

郑州博汇精密科技有限公司 2022-06-10 08:32:06 305  浏览
  •        防腐隔膜真空泵有着真空度高、抗腐蚀性能佳、完全回收溶剂、操作维护简单等优点。原理是一个安装在偏心曲轴上的弹性膜片在电机的带动下做上下往复运动,是的腔体发生形变从而实现介质的抽入和排出。隔膜型实验室真空泵在转移、疏散以及压缩的过程中完全不需要油,真正实现了无污染传输。下面我们来介绍下防腐隔膜真空泵的安装步骤。

    防腐隔膜真空泵的安装步骤如下:

      1、对于有冷却水的隔膜真空泵,按规定接通冷却水。

      2、如隔膜真空泵口安装电磁阀时,阀与隔膜真空泵应同时动作。

      3、当隔膜真空泵排出气体影响工作环境时,可在排气口装接管道引离或装接油雾过滤器。

      4、隔膜真空泵应安装在地面结实坚固的场所,周围应留有充分的余地,便于检查、维护、保养。

      5、隔膜真空泵底座下应保持地基水平,底座四角处建议垫减震橡皮或用螺栓浇制安装,确保隔膜真空泵运转平稳,振动小

      6、隔膜真空泵与系统的连接管道应密封可靠,对小隔膜真空泵可采用金属管路连接密封垫采用耐油橡胶,对小隔膜真空泵可采用真空胶管连接,管道管径不得小于隔膜真空泵吸气口径,且要求管路短而少弯头。(焊接管路时应清除管道中焊渣,严禁焊渣进入隔膜真空泵腔。)

      7、在连接管路中,用户可在隔膜真空泵进气口上方安装阀门及真空计,随时可检查隔膜真空泵的极限压力。

      8、按电动机标牌规定连接电源,并接地线和安装合适规格的熔断器及热继电器。

      9、防腐隔膜真空泵通电试运转时,须取下电机皮带,确认隔膜真空泵转向符合规定方向方可投入使用,以防隔膜真空泵反转喷油。(转向按防护罩指示方向)。

        


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一文看懂防腐隔膜真空泵的九个安装步骤

       防腐隔膜真空泵有着真空度高、抗腐蚀性能佳、完全回收溶剂、操作维护简单等优点。原理是一个安装在偏心曲轴上的弹性膜片在电机的带动下做上下往复运动,是的腔体发生形变从而实现介质的抽入和排出。隔膜型实验室真空泵在转移、疏散以及压缩的过程中完全不需要油,真正实现了无污染传输。下面我们来介绍下防腐隔膜真空泵的安装步骤。

防腐隔膜真空泵的安装步骤如下:

  1、对于有冷却水的隔膜真空泵,按规定接通冷却水。

  2、如隔膜真空泵口安装电磁阀时,阀与隔膜真空泵应同时动作。

  3、当隔膜真空泵排出气体影响工作环境时,可在排气口装接管道引离或装接油雾过滤器。

  4、隔膜真空泵应安装在地面结实坚固的场所,周围应留有充分的余地,便于检查、维护、保养。

  5、隔膜真空泵底座下应保持地基水平,底座四角处建议垫减震橡皮或用螺栓浇制安装,确保隔膜真空泵运转平稳,振动小

  6、隔膜真空泵与系统的连接管道应密封可靠,对小隔膜真空泵可采用金属管路连接密封垫采用耐油橡胶,对小隔膜真空泵可采用真空胶管连接,管道管径不得小于隔膜真空泵吸气口径,且要求管路短而少弯头。(焊接管路时应清除管道中焊渣,严禁焊渣进入隔膜真空泵腔。)

  7、在连接管路中,用户可在隔膜真空泵进气口上方安装阀门及真空计,随时可检查隔膜真空泵的极限压力。

  8、按电动机标牌规定连接电源,并接地线和安装合适规格的熔断器及热继电器。

  9、防腐隔膜真空泵通电试运转时,须取下电机皮带,确认隔膜真空泵转向符合规定方向方可投入使用,以防隔膜真空泵反转喷油。(转向按防护罩指示方向)。

    


2022-06-10 08:32:06 305 0
防腐隔膜真空泵打不出液体的8个原因

      防腐隔膜真空泵是容积泵中一种特殊的形式,主要用气动和电动两种方式来控制,对各种腐蚀性液体,带颗粒的液体,高粘度、易挥发、易燃、剧毒的液体来说,用隔膜泵是很好的选择。

  防腐隔膜真空泵是依靠一个隔膜片的来回鼓动而改变工作室容积的吸入和排出液体的,隔膜泵主要由传动部分和隔膜缸头两大部分组成。传动部分是带动隔膜片来回鼓动的驱动机构,它的传动形式有机械传动、液压传动和气压传动等。其中应用较为广泛的是液压传动。隔膜泵的工作部分主要由曲柄连杆机构、柱塞、液缸、隔膜、泵体、吸入阀和排出阀等组成,其中由曲轴、连杆、柱塞和液缸构成的驱动机构与往复柱塞泵相似。但是防腐隔膜真空泵有时候会打不出液体,下面小编为大家介绍八方面原因。

  1、防腐隔膜真空泵本身就有问题,像一些小作坊生产出来的隔膜泵自己在厂里不测试就直接卖到市场上了,买到这样的防腐隔膜真空泵只能返厂。

  2、空压机起源过低会气量不足(正常气压是5-7公斤)。

  3、低级的错误就是把泵的进出口接反了,泵是进口在下,出口在上。

  4、防腐隔膜真空泵泵体内的易损件磨损了,这种情况下比较容易解决,更换一下易损件即可。

  5、进气口的气源压力不够,一般国产防腐隔膜真空泵的气源压力范围一般在2-7kg,大于或者小于这个值泵都不能正常工作。

  6、进液口管道密封不好,这样的话,泵是正常工作,但是由于吸不上液体,所以泵也是打不出液体的。

  7、防腐隔膜真空泵泵体内的阀球和球座密封不好,打出的液体立马又回流回去了,这种情况下,泵体是出液体的,但是流量很小,扬程非常低。

  8、液体比重过大,或者说浓度过大,泵的吸程达不到,所以这种情况下,泵在工作,但是打不出液体。

  以上就是防腐隔膜真空泵打不出液体的有可能出现的8个原因,供大家对照参考。


2022-06-13 10:25:57 169 0
防腐隔膜真空泵质量好的国产品牌,哪家好?
 
2012-02-15 12:21:44 373 4
BHPT隔膜真空泵机械密封的安装要求和具体方法

      BHPT隔膜真空泵有着真空度高、抗腐蚀性能佳、完全回收溶剂、操作维护简单等优点。BHPT隔膜真空泵原理是一个安装在偏心曲轴上的弹性膜片在电机的带动下做上下往复运动,是的腔体发生形变从而实现介质的抽入和排出。BHPT隔膜真空泵在转移、疏散以及压缩的过程中完全不需要油,真正实现了无污染传输,因此BHPT隔膜真空泵还被称为干泵。

  下面我们来介绍下BHPT隔膜真空泵机械密封的安装与方法:

  1、BHPT隔膜真空泵机械密封对机器精度的要求:(以真空泵的机械密封为例)(1)安装机械密封部位的轴(或轴套)的径向跳动公差大不超过0.04~0.06mm.

  (2)转子轴向窜动不超过0.3mm.

  (3)密封腔体与密封端盖结合的定位端面对轴(或轴套)表面的跳动公差大不超过0.04~0.06mm.

  2、BHPT隔膜真空泵密封件的确认:

  (1)确认所安装的密封是否与要求的型号一致。

  (2)安装前要仔细地与总装图对照,零件数量是否齐全。

  (3)采用并圈弹簧传动的机械密封,其弹簧有左、右旋之分,须按转轴的旋向来选择。

  3、实验室真空泵密封件的安装方法:

  安装方法随机械密封型式、机器的种类不同而有所不同,但其安装要领几乎都相同,安装步骤和注意事项如下:

  (1)安装尺寸的确定:安装时,应按产品的使用说明书或样本,保证机械密封的安装尺寸。

  (2)装入前,轴(轴套)、压盖应无毛刺,轴承状况良好;密封件、轴、密封腔、压盖都应该清洗干净。为减少摩擦阻力,轴上安装机械密封的部位要薄薄地涂上一层油,以进行润滑,考虑到橡胶O形圈的相溶性,若不宜用油,可涂肥皂水。浮装式静环不带防转销的结构,不宜涂油,应干式装入压盖。

  (3)先将静环与压盖一起装在轴上,注意不要与轴相碰,然后将动环组件装入。弹簧座或传动座的紧定螺钉应分几次均匀拧紧在未固定压盖之前,用手推补偿环作轴向压缩,松开后补偿环能自动弹回无卡滞现象,然后将压盖螺拴均匀地锁紧。

  以上就是BHPT隔膜真空泵机械密封的安装方法介绍,希望大家对这类产品有更进一步的了解!

郑州博汇精密科技有限公司生产的隔膜真空泵是广大客户不错的选择,期待与您的合作!

2022-06-27 10:41:08 379 0
高倍生物显微镜正确九个操作步骤

        高倍生物显微镜可广泛用于生物学、细菌学、组织学、YL、农牧业、纺织纤维、药物化学等研究工作,在YL中可进行临床试验,在学校实验室可供教学之用。光学显微镜的构造主要分为三部分:机械部分、照明部分和光学部分。它的机械部分包括底座、镜柱、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、调节器。照明部分包括反光镜、聚光镜、光圈。光学部分包括目镜、物镜。

  实验中使用高倍生物显微镜的正确步骤!
  1、使用高倍生物显微镜时,首先应注意显微镜的接电规格(110V或220V)并插接正确的插座。
  2、由保存箱中取出显微镜或移开防尘套,取出时应以右手持镜臂,左手托住镜座。取出后应检查显微镜是否髒污,如有髒污应以拭镜纸沾些许95%酒精除去接物镜上的尘埃或污染物。
  3、打开并调整适当光源,避免灯源过高度太强,使微生物检体乾凅死。
  4、以塑胶吸管取出待观察之微生物置于载玻片上,再用盖玻片以45度角盖下,避免产生气泡。
  5、将已制作完成的检体标本置于显微镜载物台上,以玻片夹固定两端;操作者的左眼对準接目镜观察,调整光源与光圈使显微镜视野亮度均匀,通常先以低倍接物镜开始检测为生物
  6、眼镜就接目镜位置,转动粗调节轮使低倍物镜下降几乎与检体玻片相接,待物象出现后,再转动细调节轮反覆微调,直到影像清晰为止。
  7、镜检时两眼同视,寻找适当目标,将目标调到视野ZY观察。
  8、更换高倍生物显微镜观察,并利用细调节轮对準焦距,重新调整光圈至适当亮度,再转动细调节轮反覆微调,直到物象清晰为止。
  9、观察时两眼同时张开以左眼观察,右眼描绘结果。由于高倍率物镜焦距很浅,因此必须一方面转动细调节轮,一面描绘结果。描绘时不可有操作者的主观意识,且所观察之实验结果应全数绘入,不可选择性填入。
  以上就是高倍生物显微镜正确的使用步骤,以供参考!


2020-05-06 14:24:27 688 0
高倍生物显微镜正确九个操作步骤

        高倍生物显微镜可广泛用于生物学、细菌学、组织学、YL、农牧业、纺织纤维、药物化学等研究工作,在YL中可进行临床试验,在学校实验室可供教学之用。光学显微镜的构造主要分为三部分:机械部分、照明部分和光学部分。它的机械部分包括底座、镜柱、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、调节器。照明部分包括反光镜、聚光镜、光圈。光学部分包括目镜、物镜。

  实验中使用高倍生物显微镜的正确步骤!
  1、使用高倍生物显微镜时,首先应注意显微镜的接电规格(110V或220V)并插接正确的插座。
  2、由保存箱中取出显微镜或移开防尘套,取出时应以右手持镜臂,左手托住镜座。取出后应检查显微镜是否髒污,如有髒污应以拭镜纸沾些许95%酒精除去接物镜上的尘埃或污染物。
  3、打开并调整适当光源,避免灯源过高度太强,使微生物检体乾凅死。
  4、以塑胶吸管取出待观察之微生物置于载玻片上,再用盖玻片以45度角盖下,避免产生气泡。
  5、将已制作完成的检体标本置于显微镜载物台上,以玻片夹固定两端;操作者的左眼对準接目镜观察,调整光源与光圈使显微镜视野亮度均匀,通常先以低倍接物镜开始检测为生物
  6、眼镜就接目镜位置,转动粗调节轮使低倍物镜下降几乎与检体玻片相接,待物象出现后,再转动细调节轮反覆微调,直到影像清晰为止。
  7、镜检时两眼同视,寻找适当目标,将目标调到视野ZY观察。
  8、更换高倍生物显微镜观察,并利用细调节轮对準焦距,重新调整光圈至适当亮度,再转动细调节轮反覆微调,直到物象清晰为止。
  9、观察时两眼同时张开以左眼观察,右眼描绘结果。由于高倍率物镜焦距很浅,因此必须一方面转动细调节轮,一面描绘结果。描绘时不可有操作者的主观意识,且所观察之实验结果应全数绘入,不可选择性填入。
  以上就是高倍生物显微镜正确的使用步骤,以供参考!


2020-04-20 09:45:00 743 0
隔膜泵,真空泵和隔膜真空泵的区别
 
2016-12-04 21:36:42 519 1
隔膜真空泵的工作原理

       一、隔膜真空泵的工作原理:在连杆做上下运动时,带动隔膜做张开与闭合的动作,使隔膜腔内的空间产生变化而使气体压力产生变化来达到吸气和排气的目的,类似于人体肺的工作原理。

  二、隔膜真空泵特点

  抗化学腐蚀的隔膜泵是干运行的,并终生免润滑。所有与气体接触的部位如隔膜,气管,单向阀等都做特氟龙(聚四氟乙烯PTFE)处理并用碳纤维加固,完全保证了泵的抗化学腐蚀性能。隔膜采用三明志结构(即多层结构),表层是用碳纤维加固的PTFE涂层,下面是多层特种纤维,以增加隔膜的韧性和强度。

  隔膜真空泵产品在出厂前都会经过抗疲劳测试数据,隔膜真空泵在不间断运行的情况下,可以至少工作5,000-10,000小时。其中如果隔膜泵空运行(不接容器,始终处在1个大气压中) 抗疲劳能力会接近下限,如有容器(即真空环境中) 抗疲劳能力接近上限并有可能远大于10,000小时。

  三、隔膜真空泵的应用

  1) 旋转蒸发器/分子蒸馏;提供的真空系列产品特别是隔膜泵广泛应用于真空蒸馏。隔膜泵可单独使用或与旋转蒸发器配套使用。

  2) 反应釜;隔膜真空泵可与各种低压反应釜和玻璃反应设备相配套。

  3) 真空浓缩;隔膜真空泵可与各类真空浓缩器相配套。

  5) 真空干燥箱/凝胶

  6) 真空抽滤

  四、隔膜真空泵的使用

  真空泵工作环境温度5-40℃, 最高进入气体温度60℃。

  真空泵只能抽气体,不要抽液体。

  只能抽真空,不能加压。

  我们建议在隔膜泵排气端连接一回收瓶收集泵口排出的液体,以便确保排出的液体不郁积在泵的排气口,这样即可保护隔膜泵也有利于工作环境。

  隔膜真空泵的隔膜属于易磨损件,正常使用情况下,一到二年更换一次。

  隔膜真空泵可以终年不停地持久工作,不会对泵造成损伤,也不需要进行特别的维护。

  如果发现泵内凝结了少量的冷凝液,请用气压载阀及时地把冷凝液排出。

 


2023-05-26 10:30:01 128 0
耐腐蚀隔膜真空泵的性能

      耐腐蚀隔膜真空泵适合于化学、制药、石化等行业对腐蚀性气体的处理,如抽滤,减压蒸馏,旋转蒸发,真空浓缩,离心浓缩,固相萃取等使用。

  耐腐蚀隔膜真空泵具有优异的耐化学腐蚀设计,所有与气体接触部分,均为聚四氟乙烯(PTFE)材料,不仅进气口到出气口的化学腐蚀性气体有很好的耐受性,而且对冷凝液有很好的耐受性。抽气腔和驱动部件所在的腔室是密封分离的,确保机械部件的使用寿命。

耐腐蚀隔膜真空泵性能说明:

  1、起动压强:单位为Pa,它是指泵无损坏起动并有抽气作用时的压强。

  2、压缩比:是指泵对给定气体的出口压强与入口压强之比。

  3、何氏系数泵抽气通道面积上的实际抽速与该处按分子泻流计算的理论抽速之比。

  4、抽速系数:泵的实际抽速与泵入口处按分子泻流计算的理论抽速之比。

  5、返流率:泵的返流率单位是g/cm2.s。它是指泵按规定条件工作时,通过泵入口单位面积的泵流质量流率。

  6、水蒸气允许量:水蒸气的允许量单位是kg/h,它是指泵在正常环境条件下,气镇泵在连续工作时能抽除的水蒸气质量流量。

  7、极限压强:泵的极限压强单位是Pa,是指泵在入口处装有标准试验罩并按规定条件工作,在不引入气体正常工作的情况下,趋向稳定的最小压强。

  8、抽气速率:泵的抽气速率单位是m3/s或l/s,是指泵装有标准试验罩,并按规定条件工作时,从试验罩流过的气体流量与在试验罩位置测得的平衡压强之比。

  9、zuida允许水蒸气入口压强:zuida允许水蒸气入口压强单位是Pa。它是指在正常环境条件下,气镇泵在连续工作时所能抽除的水蒸气的zuida入口压强。

 郑州博汇精密科技有限公司生产的DP系列隔膜真空泵就具有以上特点,快来选购吧!


2022-06-27 09:51:04 164 0
隔膜真空泵的正确使用方法

       隔膜真空泵是一种无油无污染的真空抽取设备,主要用于真空环境的制取,可以和旋转蒸发仪、反应釜等配套使用,降低溶剂的沸点,使反应在真空环境下进行等。真空隔膜泵主要由电机、偏心机构、隔膜、阀片和气室等组成。隔膜是由聚四氟乙烯等复合材料制成,阀片材料为PEEK,气室则由PTFE喷涂材料制成,所以真空隔膜泵具有很好的耐腐蚀性能。

       真空隔膜泵使用起来比较简单,但不当的使用方法会降低真空隔膜泵的使用寿命,导致真空度降低、甚至隔膜损坏等故障,那么如何正确使用真空隔膜泵呢?

      首先,真空隔膜泵是用来抽取各种气体环境下的设备,随着真空度的不断上升,蒸汽就会越来越多,这样就不可避免地会被抽入隔膜泵中,为了防止这种情况,一般隔膜泵厂家会配备小型的干燥过滤器,所以,使用前要将干燥过滤器连接在隔膜泵和系统之间。干燥过滤器使用一段时间,发现里面有一定量水时,且真空隔膜泵真空度达不到以前的水平时,及时更换干燥过滤器,将消音器去掉后,空载运行1~2小时即可恢复到正常状态。

      第二,真空隔膜泵是靠隔膜往复运动来实现真空制取的,因此,隔膜泵的发热还是比较大的,一般情况下,没有散热措施的真空隔膜泵表面能达到75~80℃,容易烫伤人,所以,一般建议连续工作时间不超过2小时。为了克服这种问题,郑州博汇精密科技有限公司研发生产的DP-630系列真空隔膜泵,采用低温升电机,在泵体外面设计了美观大方的外壳,并配置了大风量轴流风机,使热量得到很好的散热效果,机壳外表温度45℃左右,而内部的电机温度也很好地降低到68℃以下,有效地延长了整机的使用寿命。另外,DP-630G更配备了高精度的液晶真空表,使真空度一目了然。

       第三、真空隔膜泵主要用于抽取真空,如果想用于打压(正压状态)操作,一般不得大于0.1MPa,否则,易导致隔膜损坏。

      第四、真空隔膜泵工作时要放到通风良好的地方,且尽量远离热源。

      正确使用真空隔膜泵,将有效提高真空隔膜泵的使用寿命,减少故障的发生。

      郑州博汇精密科技有限公司生产的DP系列隔膜真空泵外观美观、真空度高,温度低,噪音低,性价比高,可达到国际水平,是您不错的选择哟!

    


2022-06-09 15:31:42 302 0
耐腐蚀隔膜真空泵的使用教程

耐腐蚀隔膜真空泵的使用教程:

耐腐蚀隔膜真空泵是一种常用的实验室设备,主要应用于医疗医药产品分析、精细化工、生化制药、食品检验技术等领域中。其使用步骤为:

  1、将真空泵平稳地放在操作台面上。

  2、将过滤装置或需抽真空的装置和真空泵紧密连接起来,应使系统具有良好的气密性。可在真空泵的进出口和过滤器的出气口外层抹上酒精等润滑剂,这样连接胶管更方便。

  3、检查电压是否符合规定的要求,电源有良好的接地并确定关机的情况下,打开电源开关,这个时候会有电机声。当真空泵外接负载时,真空表就会逆时针转动,当指针指向0.08Mpa时,真空泵就会达到大数据工作压力。

  4、过滤结束后,关闭电源。

  耐腐蚀隔膜真空泵运转前,先向气室充气,其气压大于泵的工作压力。驱动隔膜真空泵,调至工作压力,此时可见到泵的出水胶管剧烈抖动。取一针状物,顶在气嘴处放气,随着放气的进行,出水胶管的抖动现象将逐渐消失。出水胶管平稳后,停止放气。

  郑州博汇精密科技有限公司生产的隔膜真空泵,有多个型号,外形简洁美观的一体化箱体设计,操作简单、便捷,干式运行,环保、洁净,可替代循环水式真空泵和旋片式真空泵。经过1500小时疲劳测试,可持久稳定工作。欢迎新老客户参观考察,来电询价!

  


2022-09-01 15:38:16 205 0
隔膜真空泵你选对了吗?

       作为实验室常用仪器,各种隔膜真空泵大同小异,要选一款符合实际所需的隔膜真空泵,购买前应多做功课。您需要了解这些情况:

     1.隔膜真空泵的性能指标

  隔膜真空泵的主要指标有两个:极限抽气速率和极限压力(也称Jue对真空度),极限抽气速率的大小可以判定,其所能应用的被抽气装置的容量大小,极限压力决定了隔膜真空泵所能达到的极限Jue对真空度. ( 注:Jue对真空度与表压真空度有对应关系,但Jue对真空度不会因为地理位置的改变,大气压力的改变而发生变化,而表压真空度则充满不确定性.建议使用Jue对真空度压力显示.) 

  2.耐腐蚀性能

      优秀的隔膜真空泵可应用在大多数实验场景,拥有优秀的耐腐蚀性能.不管是隔膜/阀片/管路等与气体接触部分,都做了特殊处理。

  3.连续运行性能稳定

       多数的隔膜真空泵在连续运行后,发热严重,没有配置散热装置,同时真空度波动较大。

       郑州博汇精密科技有限公司生产的DP系列隔膜真空泵可长时间运行,性能稳定,具有高度的耐腐蚀性能。

推出的隔膜真空泵DP-630G,压力显示采用数显表,显示隔膜真空泵的jue对真空度和当前大气压值,方便用户做数据记录。

  如果需要,请联系我们!

 


2022-05-20 15:08:45 91 0
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干货分享 | 一文带你看懂寡核苷酸药物代谢产物分析

治 疗性寡核苷酸有着独特的基因表达调控优势,随着其成药性潜力被不断挖掘,与其相关的研发、生产和商业化进程得到快速发展。与传统化学药物的研究过程类似,寡核苷酸药物临床前均需要进行体外和体内的代谢行为研究,阐明药物药效及代谢途径。


寡核苷酸药物的代谢行为

寡核苷酸药物的代谢行为与小分子药物存在很大不同,它几乎不经肝微粒体酶代谢,主要通过血液和靶器官中核酸内切酶和核酸外切酶水解磷酸酯键形成小的核酸片段。从3’-端通过核酸外切酶水解生成主要代谢产物,其次是5’-端通过核酸外切酶水解产物及核酸内切酶产生的代谢物。为了提高寡核苷酸药物的稳定性、药效及安全性,药物会被化学修饰,包括硫代磷酸、2’-O-甲氧基乙基核糖、N-乙酰化半乳糖胺修饰。寡核苷酸药物的药代动力学性质与核酸磷酸主链及核糖的化学修饰类型密切相关。



寡核苷酸药物代谢产物鉴定

目前寡核苷酸药物代谢产物鉴定的主要分析方法是基于LC-HRMS开展的,通过全扫描和二级碎片信息的采集,获得寡核苷酸及其代谢产物信息。沃特世高分辨质谱Xevo G3 QTof结合waters_connectINTACT MassCONFIRM Sequence应用程序平台,为寡核苷酸代谢物鉴定提供有效解决方案。



寡核苷酸药物代谢物产物鉴定中的分析难点

1)色谱分离

寡核苷酸药物分子具有强极性,利用常规反相色谱分离方法较难保留,通常使用反相离子对色谱(IP-RPLC)、亲水色谱(HILIC)、离子交换色谱(IEX),其中IEX和IP-RPLC的分离度优于HILIC,但是IP-RPLC跟质谱兼容性更好。由于寡核苷酸药物代谢物复杂,且存在与母药性质非常接近的n-1代谢物,给分离带来很大挑战。所以目前寡核苷酸药物代谢产物鉴定以IP-RPLC为常用方法,使用三乙胺(TEA)、N,N-二异丙基乙胺(DIPEA)、乙酸三乙胺(TEAA)等和六氟异丙醇(HFIP)组成离子对试剂。


由于寡核苷酸药物分子的多负电性,在色谱分离系统中存在非特异吸附问题,严重影响色谱分离度和低含量代谢物的发现。沃特世ACQUITY Premier系统采用Max Peak高性能表面技术,能够减少金属敏感分析物的非特异性吸附,减少分析物损失,提高分析重现性。针对寡核苷酸药物色谱分离难点,Premier技术可以显著改善寡核苷酸药物的峰形回收率重现性,无需系统和色谱柱钝化。


图1. 全硫代磷酸化寡核苷酸反义药物GEM91 ACQUITY Premier方案和标准方案比较。


2) 高分辨质谱分析及代谢产物鉴定

通过Xevo G3 QTof提供高质量分辨率、灵敏度和可靠性,全扫描和二级碎片采集MSE技术结合,全面获得寡核苷酸及代谢产物的质谱信息。寡核苷酸的代谢产物鉴定和未知代谢物序列确认过程复杂,需要专业的软件进行辅助识别和分析。


waters_connect INTACT Mass应用程序,可以自动进行寡核苷酸质量确认,实现更快的样品分析。可定制的化合物库,允许终端用户输入自定义同位素模型,支持自动化核酸确认。


waters_connect CONFIRM Sequence应用程序平台可以自动确认治 疗药物及其代谢物的核酸序列,对未知代谢物进行序列确认。给定一个目标核酸序列,CONFIRM Sequence应用程序将自动生成一个预测碎片列表,并搜索这些碎片离子的二级质谱数据,标注所有匹配。该应用程序可以自动处理来自Xevo G3 QTof的MS/MS数据。当处理完成时,一个可视化的“点图”将显示寡核苷酸序列和所有已发现的片段以及序列覆盖率的百分比。


图2.核酸药物完整分子量分析结果。



图3. 核酸二级序列确认


案例分享

以ASO药物Eluforsen作为研究对象开展代谢物鉴定工作,利用LC-QTof平台实现Eluforsen及其代谢物的成功分离和检测,Eluforsen及其代谢物代表性色谱图见图4。结合UNIFI的数据处理功能,成功鉴定Eluforsen的代谢产物主要以3’端和5’-端的水解产物为主,结果见表1。利用LC-QTof平台也可以实现代谢产物形成速率的测定,结果见图5。


图4. 核酸药物Eluforsen及其代谢物的代表性提取离子流图。


图5. 小鼠肝脏匀浆中Eluforsen 3’端水解产物的形成速率。(50 μg/mL eluforsen与肝脏匀浆孵育0, 24, 48, 72, 96, 120 h)


表1. 纯化核酸酶和小鼠肝脏匀浆孵育后体外产生的Eluforsen代谢物以及小鼠和猴子肝脏和肺样品中体内产生的代谢物。


4) 总结

寡核苷酸药物因特殊的结构特点具有极性大、负电性等特性,给代谢物分离和鉴定都带来很大的挑战。沃特世Premier UPLC技术可以有效解决寡核苷酸药物非特异性吸附问题,提高IP-LC分离性能提升低含量代谢物的检出率。Xevo G3 QTof全扫描和二级采集MSE技术结合,提供更全面的寡核苷酸及代谢产物质谱信息,利用waters_connect平台的数据处理能力实现寡核苷酸药物代谢产物鉴定和未知物确证。沃特世持续致力于提供更满足客户需求的寡核苷酸药物代谢研究的解决方案,助力客户加速药物研发


参考文献:

1. Jaeah Kim, Babak Basir, Chopie Hassan, et. al., Molecular Therapy: Nucleic Acids, 2019, 17, 714-725.

2. Ju Liu, Jing Li, Chris Tran, et. al., Bioanalysis, 2019, 11(21), 1967-1981.



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