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怎么用电泳判定蛋白质是同源二聚体还是异源二聚体

111教师节快 2016-12-17 07:02:51 609 浏览

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饭桶877 2016-12-18 00:00:00

怎么用电泳判定蛋白质是同源二聚体还是异源二聚体可以通过非变性电泳来判断蛋白质是单体还是二聚体，非变性电泳就是Native-PAGE，区别于正常的SDS-PAGE就是不加入SDS 和疏基乙醇等变性剂的条件下，对保持活性的蛋白质进行聚丙烯酰胺凝胶电泳。根据Native-PAGE跑出的蛋白分子量与理论分子量对比可以判断是否为单体还是二聚体。另外通过凝胶过滤层析也可以判断出单体还是二聚体

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纯化后的蛋白做western，出现很明显的两条带，请问是二聚体吗:

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SDS-PAGE蛋白质电泳问题: 刚开始跑，在浓缩胶就不在一条线上，有的已经移动一小节了有的还没开始动，但是跑着跑着大约到分离胶时就又到一条线了上了，不知道怎么回事。电泳时感觉加的样有散的趋势，上样20ul，跑着跑着就连成一条线了，对结果有影响没？原因？解决办法！电泳时条带歪了... 刚开始跑，在浓缩胶就不在一条线上，有的已经移动一小节了有的还没开始动，但是跑着跑着大约到分离胶时就又到一条线了上了，不知道怎么回事。电泳时感觉加的样有散的趋势，上样20ul，跑着跑着就连成一条线了，对结果有影响没？原因？解决办法！电泳时条带歪了在Z下面总是乱七八糟的，染色后偏下的地方总是一块不规则紫色的，不是带状。灌胶时胶漏了，对电泳结果有影响没，是不是得重配？分离胶或者浓缩胶配好后使用什么方法使其混匀，用玻璃棒搅拌还是振荡器镇或其他方法以上是我电泳以来的所有问题，感谢所有回答人员。展开

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