仪器网(yiqi.com)欢迎您!

| 注册 登录
网站首页-资讯-专题- 微头条-话题-产品- 品牌库-搜索-供应商- 展会-招标-采购- 社区-知识-技术-资料库-方案-直播- 视频

问答社区

提取细胞蛋白过程中超声处理有没有什么注意事项

激霸毛_p邮 2016-12-19 23:02:33 288  浏览
  •  

参与评论

全部评论(1条)

  • 帮帮网在身边 2016-12-20 00:00:00
    所用样品放在冰盒中,因为超声破碎会发大量的热,如果温度过高会使蛋白变性,设置功率,超4秒,停8秒,看你量的决定超的循环数,一般100次足够了. 要提蛋白的话不能说是用什么过滤,而是离心. 不知道楼上说的超声15秒能破碎多少细胞,反正我看没戏. 离心的话8000rpm就可以 ,当然看你提什么蛋白了,如果某一种蛋白的话,还学要做电泳之类的才可以彻底分开. 千万不要听楼上的,尤其是第二步,如果你辛辛苦苦提的蛋白给煮沸了,那蛋白不就变形了吗?你的工作就都白做了.

    赞(1)

    回复(0)

    评论

获取验证码
我已经阅读并接受《仪器网服务协议》

热门问答

提取细胞蛋白过程中超声处理有没有什么注意事项
 
2016-12-19 23:02:33 288 1
动物皮提取蛋白过程中如何去除 控制内毒素
 
2017-08-13 20:25:59 379 1
超声雾化的注意事项
 
2018-11-19 15:00:35 249 0
逻辑分析仪有没有什么注意事项?
 
2016-07-04 06:18:46 350 1
emsa过程中什么导致蛋白构象发生变化
 
2018-12-04 09:18:10 316 0
SDS法裂解细胞提取DNA过程中要注意哪些问题
 
2017-01-26 19:36:45 518 1
在细菌细胞dna的提取过程中为什么经溶菌酶
 
2017-12-15 07:47:58 514 1
细胞蛋白提取需要超声粉碎细胞吗
 
2016-07-13 10:28:45 505 1
如何在提取RNA过程中快速有效的处理样品
 
2018-07-11 23:10:40 610 1
mRNA提取注意事项
 
2010-11-18 22:06:34 287 1
请教:流式分选细胞前标本的处理以及注意事项
 
2017-04-23 08:02:09 464 1
请教:流式分选细胞前标本的处理以及注意事项
 
2017-04-23 12:07:14 428 2
细胞超声破碎仪可否高压灭菌
 
2018-12-09 08:22:54 385 0
细胞超声破碎293细胞 怎么判断破碎完全
 
2018-12-09 07:17:23 288 0
什么试剂可以增加蛋白和细胞结合力
 
2017-05-18 09:14:56 383 2
提取DNA过程中变黑褐色
请教高手:植物,氯仿异戊醇提取离心后(离心40min),上清液变成了褐色,Z后得到的粗DNA可见黑褐色的团块,请问里面有DNA吗?还有黑褐色团块是什么?谢谢!我们离心机不好用,达不到... 请教高手: 植物,氯仿异戊醇提取离心后(离心40min),上清液变成了褐色,Z后得到的粗DNA可见黑褐色的团块,请问里面有DNA吗?还有黑褐色团块是什么?谢谢! 我们离心机不好用,达不到万转,所以就离心时间长了点。。。 展开
2009-07-12 05:11:57 1614 5
CEMS维护过程中的注意事项

为保证CEMS测量数据准确可靠,每天检查CEMS各设备的工作情况,查看历史数据和数据报表,及时发现和排除设备存在的异常,提高系统的可靠性。需要做好以下日常维护保养工作:

1加热装置和制冷装置

加热装置和制冷装置是保护烟气分析仪的重要设备,是日常检查和维护的ZD关注对象。加热装置温度一般控制在130℃左右,在没有加热的情况下,烟气中水分进入分析仪,造成滤芯堵塞,分析仪损坏等,同时管路中形成酸雾,直接影响测量结果;制冷装置温度一般控制在4℃左右,如果冷凝器温度只能达到6℃及以上时需要进行维修或者更换。

2蠕动泵检查

蠕动泵用于排出制冷器冷凝筒内的水和密封取样气路。如果蠕动泵长时间不工作,冷凝水会进入采样泵和分析仪,造成设备损坏。

3反吹系统检查

反吹系统检查时,检查反吹气源压力是否在正常范围内。手动反吹时,将系统切至维护状态进行反吹。自动反吹是在PLC控制系统中设置好反吹时间并将测量数据进行保持,不会因反吹而发生控制系统调节异常或者设备损坏。

4烟气分析仪的定期标定

烟气分析仪需要定期进行零点和量程标定。CEMS监测站房都配有每种被测介质因子的高中低三种浓度的标准气体和高纯氮,标定完毕通入另一浓度的标准气进行比对。标定周期为每半年至少一次。自动零点校准根据现场设备实际情况设置为8-12个小时自动进行一次零点标定,避免出现零点漂移,保证分析测量的准确性。

5参数量程的一致性

 

在分析仪和标准气体的选择方面要注意,分析仪量程要根据烟气中所测介质因子的设计浓度来选择,量程不应超过污染源排放允许限值的两到三倍,保证烟气分析仪所测量数据的准确度;标准气体的选择要根据分析仪的量程和所测介质因子通常浓度来选择,不宜过高或者过低(量程的百分之80-100以内)。上位机、PLC及数据采集仪的量程设置应保持一致。


2021-01-22 14:35:06 420 0
细胞提取RNA求助
 
2016-12-29 20:34:55 307 1
细胞过滤网使用注意事项

  细胞过滤网使用注意事项

  细胞过滤网最主要的用途如下:

  快、方便的方法以替代纱布过滤;

  理想方法用于制备流式细胞分析样品,包括:从扁桃体、胸腺和淋巴结来源的血细胞的单细胞县液制备,

  干细胞、经酶消化的哺乳动物组织或类器官来源的细胞、癌细胞;

  原代细跑培养物和免疫原的样本制备;

  过滤去除血清灭活中产生的凝集蛋白;

  细胞过滤网一般分为两种主要的材质,一类是尼龙等塑料制品,一类是不锈钢的材质。虽然过滤网在细胞类实验中高频出现,但是还是有很多细节会被使用者忽略。下面整理了细胞过滤网的具体使用细节,供大家参考。

  1,过滤网前处理

  一次性独立包装的细胞过滤网无需进行前处理,选择对应目数进行操作即可。不锈钢细胞过滤网,使用前要洗干净、但不能泡酸,可以直接用锡箔纸包好湿式消毒。

  2,使用注意

  滤网有不同的目数,要依据具体的实验要求选择对应

  流式实验中,200 目与 300 目,区别不是很大,但是使用 300 目时,研磨要轻柔,以免结缔组织混入细胞内影响实验结果。

  目的是获取原代细胞进一步培养时,要注意无菌操作,研磨不同组织及时更换过滤网

  3,过滤筛的清洗

  一次性细胞过滤筛不建议去做清洗消毒,可能会造成滤网的不均匀,影响下次实验结果

  不锈钢细胞滤网,用稀碱清洗一下去掉上面残留的细胞和组织,然后用去垢剂溶液(如新洁而灭)浸泡清洗,自来水冲净,dH2O蒸馏水3遍,ddH2O重蒸水3遍,包装灭菌即可

  细胞过滤网是取得单细胞悬液提供一种简单操作的实验方法,底部由尼龙筛网构成。常用于器官培养、组织转运、组织切片或移植。适合于干细胞和原代细胞过滤,常与流式细胞仪配套使用,是流式细胞分选实验的ZJ选择。

  优势:

  *提供三种规格配合不同类型的细胞样品:40 µm, 70 µm, and 100 µm

  *三种颜色可区分不同规格:蓝色、白色、黄色

  *网孔平均分布,提供一致可靠的实验结果

  *顶端延伸边缘可使用手术钳无菌操作

  *模塑聚丙烯框架可着色标记,易于操作和分辨

  *可与 50ml 锥形离心管匹配使用

  *伽玛射线灭菌

  *无 DNase/RNase 、无热源,无内毒素

  细胞过滤网使用注意事项,本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。

2021-08-31 14:04:07 675 0
细胞超声破碎 怎么判断破碎完全
 
2015-10-29 20:13:10 712 2

9月突出贡献榜

推荐主页

最新话题