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关于PCR反应液纯化回收后再电泳的问题

ccc13597972438 2014-03-08 14:07:14 536  浏览
  • 如题 我跑RACE 每一次PCR的反应液用TAKARA miniBEST 的纯化Kit回收 回收之后的溶液和后续的巢式PCR产物一起跑电泳 这样才能对比结果 可是每次在加样的时候就发现 回收产物取5ul与1ul 6X Loading Buffer混合后加样 混合液沉降不下去 会随着枪头的拔出被提到... 如题 我跑RACE 每一次PCR的反应液用TAKARA miniBEST 的纯化Kit回收 回收之后的溶液和后续的巢式PCR产物一起跑电泳 这样才能对比结果 可是每次在加样的时候就发现 回收产物取5ul与1ul 6X Loading Buffer混合后加样 混合液沉降不下去 会随着枪头的拔出被提到加样孔外面 然后很快就扩散到TAE里面消失掉了 因为之前没做过回收产物的电泳 不知道问题出在哪里 是要用别的BUFFER呢还是溶液需要稀释? 有的能沉降下去有的不能…… 各路大神快来救命吧…… 展开

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全部评论(1条)

  • 习惯成自然PAP 2014-03-09 00:00:00
    按说不会,loading里面的蔗糖就是帮助沉降的,注意把loading和样品混合重复。不行试试10X loading buffer。

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关于PCR反应液纯化回收后再电泳的问题
如题 我跑RACE 每一次PCR的反应液用TAKARA miniBEST 的纯化Kit回收 回收之后的溶液和后续的巢式PCR产物一起跑电泳 这样才能对比结果 可是每次在加样的时候就发现 回收产物取5ul与1ul 6X Loading Buffer混合后加样 混合液沉降不下去 会随着枪头的拔出被提到... 如题 我跑RACE 每一次PCR的反应液用TAKARA miniBEST 的纯化Kit回收 回收之后的溶液和后续的巢式PCR产物一起跑电泳 这样才能对比结果 可是每次在加样的时候就发现 回收产物取5ul与1ul 6X Loading Buffer混合后加样 混合液沉降不下去 会随着枪头的拔出被提到加样孔外面 然后很快就扩散到TAE里面消失掉了 因为之前没做过回收产物的电泳 不知道问题出在哪里 是要用别的BUFFER呢还是溶液需要稀释? 有的能沉降下去有的不能…… 各路大神快来救命吧…… 展开
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