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  沙漠之鹄 2017-09-19 01:15:10

  一、相关概念解释 分子杂交是利用某些分子与另外的一些分子特异结合而形成结合体的过程，狭义指核酸分子杂交即具有一定同源序列的两条核酸单链（DNA或RNA），在一定条件下按碱基互补配对原则经过退火处理，形成异质双链的过程。 核酸分子杂交利用的原理是碱基互补配对原则，核酸分子单链之间有互补的碱基顺序，通过碱基对之间非共价键（主要是氢键）的形成即出现稳定的双链区，这是核酸分子杂交的基础。杂交分子的形成并不要求两条单链的碱基顺序完全互补，所以不同来源的核酸单链只要彼此之间有一定程度的互补顺序（即某种程度的同源性）就可以形成杂交双链。核酸分子杂交可在DNA与DNA、RNA与RNA或RNA与DNA的二条单链之间进行。由于DNA一般都以双链形式存在，因此在进行分子杂交时，应先将双链DNA分子解聚成为单链，这一过程称为变性，一般通过加热或提高pH值来实现。使单链聚合双链的过程称为退火或复性。用核酸分子杂交进行定性或定量分析的Z有效方法是将一种核酸单链用同位素或非同位素标记成为探针，再与另一种核酸单链进行分子杂交。 DNA分子杂交技术指以某一特定DNA单链为探针，与另一DNA单链进行分子杂交的技术。 二、核酸探针的种类 探针根据标记方法不同可粗分为放射性探针和非放射性探针两大类，根据探针的核酸性质不同又可分为DNA探针，RNA探针，cDNA探针，cRNA探针及寡核苷酸探针等几类，DNA探针还有单链和双链之分。 DNA探针是Z常用的核酸探针，指长度在几百碱基对以上的双链DNA或单链DNA探针；cDNA（complementary DNA）是指互补于mRNA的DNA分子。将CDNA用同位素进行标记即CDNA探针；其它的探针可以据此得出相应的理解 三、分子杂交的类型 分子杂交的类型在高中主要有以下几种类型，DNA探针与DNA单链杂交（Southern杂交）；DNA探针与mRNA单链杂交（Northern杂交）；抗原-抗体杂交(western杂交） DNA分之杂交是DNA和DNA之间，检测目的基因是否整合到受体细胞染色体DNA上。抗原抗体杂交检测目的基因是否翻译出蛋白质。

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