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微量水分测定仪测量的重复性差可能的原因有:

1.样品不均匀。例如它们有不同的成分。样品越不平均则需要更多的样品来获得较好重复性的结果。

2.选择的干燥时间太短。延长干燥时间或选择合适的关闭模式“每单位时间的重量丧失”。

3.样品没有完全干燥(例如:由于表面结皮)。尝试混合石英沙进行干燥。

4.选择的温度太高或样品氧化。降低干燥温度。

5.样品沸腾并不断飞溅从而改变温度。请清洗保护玻璃。

6.当保护玻璃污蚀时，加热量不能完全发挥,请清洁保护玻璃。

7.温度传感器被污染或损坏。请清洗温度传感器。

8.操作台不稳固。请应用稳固的操作台。

9.外部环境不稳定(振动等)。

导读

超微量分光光度计常用于核酸纯度分析、蛋白定量以及细菌生长浓度的定量，蛋白质重复性不好是我们遇到的最多的问题。

今天，我们从超微量分光光度的测样原理来分析一下这个问题。

一般来说，在进行超微量分析时，需要用移液枪将1-2 μL的蛋白质样品加到样品台上。

利用蛋白质的表面张力，采用样品拉伸原理，使样品形成液柱，从而进行检测。

殊不知这个过程就是影响蛋白质测定准确性和重复性不好的关键因素，几乎可以影响到蛋白质表面张力的因素都可导致其测试结果的不稳定。

现将这些因素总结如下：

元析B-600超微量分光光度计主机

B-600超微量分光

光度计蛋白质测量方法界面

01

温度导致样品挥发

首先，液体的温度与分子间引力有一定的关系。

温度升高，分子间引力将减弱，表面张力也会随之降低。这也解释了为何低温保存的核酸样品，更易形成液柱。

所以，要得到理想的测试效果，首先要确保实验室环境的温度和湿度，要预防仪器本身的发热对样品的影响。

然而，一款拥有封闭式点样台的超微量分光光度计可避免这一问题。

02

盐

无机盐作为一种非表面活性剂，具有水合作用，趋向于把水分子拖入水中,因此会增大表面张力，反之亦然。

因此，脱盐或低盐的样品，表面张力会降低，常见于蛋白纯化的流程。

例如在进行蛋白质结构分析或质谱分析时，样品需经过脱盐处理，这样的样品在进行浓度测量时，并不容易形成液柱。

03

表面活性剂

蛋白提取过程中经常使用的表面活性剂（清洁剂），如SDS、Triton X100，会大幅降低样品的表面张力，这些物质常会残留在样本中，难以完全去除。

尤其一些非离子型表面活性剂对蛋白质在界面吸附性的影响更加值得考虑。

04

固液接触表面

当使用移液器将微量样品加载到点样台后，会出现液体与固体的接触表面，点样台表面的亲水/疏水性质会影响液体的表面张力。

因此，使用拉伸法的主流品牌微量分光光度计，点样台表面具有疏水性涂层，会增大液体的张力。

水分测定仪是比较常用的仪器，凡是需要测定水分如食品等行业都必须用到水分测定仪，水分测定仪的运用范围广，作用大，它也是属于一种精密的仪器。因此在使用水分测定仪时一定要注意以下六点。

首先是水分测定仪在使用的时候系统必须全密闭，水分测定仪的液路部分连接一定要紧固，从试剂瓶到计量泵再到反应池，否则发生试剂泄漏将直接影响测试结果。如果系统没有密闭则对导致另外一个问题就是测试时由于试剂在试验中吸收空气水分，会导致滴定终点延迟。

水分测定仪的使用说明

第二是取样要准确，一般来说规定的需要取用10毫克水，就尽量使用10ul取样器，这对甲醇试剂和乙酯也是同样的道理。因为这样不但准确、速度快，还能够防止水滴粘附。同样取放完毕后应注意尽量缩短反应池打开的时间。

第三就是磁性搅拌速度调整：在反应池中，因为滴定试剂加入时在局部，与电极不在一处，因此搅拌速度以快到不形成湍流为止，这样可以快速达到终点。

第四就是滴定速度设定一定要先快后慢，并且在滴定时先快速以尽量缩短试验时间，在接近终点时应变慢，这样可提高计量精确度。

第五就是在每次试验完毕后，一定要排空系统中的试剂，然后用甲醇清洗干净，千万不能用水清洗系统，因为其不容易挥发，将造成下次试验时试剂标定不实。用甲醇清洗这样就能保证测量的准确性。

第六就是在日常生活中水分测定仪应该远离强磁场，避免工作时电子显示跳动，出现不正常现象。尤其是对手动的水分测定仪，因为必须使用玻璃自动滴定管计量试剂和甲醇溶剂，而玻璃滴定管本身因为平衡压力的关系，又必须与外界接通。所以就要更加注意到这一点。

微量水分测定仪电解液的使用注意事项

1. 在正常的测定过程中，每100毫升电解液可与不小于1克的水进行反应，若测定时间过长，电解液敏感度下降，应更换新的电解液。

2. 阴极室中的电解液，如果在滴定过程中发现释放出强烈的气泡或电解液被污染，成淡红褐色，此时空白电流会增大，测量的再现性要降低，还会使到达终点的时间加长，这种情况应更换电解液。

3. 滴定时间超过半小时，仪器尚不能稳定，此时应旋转搅拌旋扭停止搅拌，观察砂芯下部阳极铂网上是否有明显的棕色碘产生，如果没有或产碘很少，则应更换电解液。

4. 必须小心，不要吸入或用手接触电解液，如与皮肤接触，应用水彻底冲洗干净。

由于这种试剂含有毒成分，所以试验室内要通风良好。

微量水分测定仪的安全使用

1．人身安全及保护措施

确保所使用的电源要有可靠接地线！如未接地，可能导致人身伤亡事故。

请不要在有爆炸危险性的环境内工作！仪器外壳并非完全气闭，存在因火星、气体进入造成爆炸的可能性。

使用化学品和溶剂时，请遵照制造商的使用指导和通用实验室安全规范！

所有卡尔·费休试剂都易燃并有毒性。如果皮肤不慎接触了卡尔·费休试剂，请立即用大量的水冲洗。如果眼睛不慎接触了卡尔·费休试剂，请立即用大量的水冲洗并注意咨询医生。

2 操作安全保护措施

2.1 不要打开仪器外壳，请将仪器送至得利特（北京）科技有限公司指定的维修部门维修。

2.2仪器不得安装在有腐蚀性气体的室内，腐蚀性气体可使仪器电路腐蚀，缩短仪器的寿命。

2.3仪器不得安装在室温低于5℃或高于40℃的场所。

2.4仪器不能放在阳光直接照射的地方。

2.5仪器不得安装在操作频繁的大用电量电气设备附近。

2.6仪器不得安装在湿度大的场所或者自来水排出管的附近。

2.7仪器不得安装在电源波动超出规定数值的地方。

  卡尔费休法简称费休法是测定物质水分的各类化学方法中，对水Z为专一、Z为准确的方法。虽属经典方法但经过近年改进，提高了准确度，扩大了测量范围，已被列为许多物质中水分测定的标准方法。
  卡尔费休法有滴定法与库仑电量法两种方法。 适用于许多无机化合物和有机化合物中含水量的测定。 是世界公认的测定物质水分含量的经典方法。可快速测定液体．固体．气体中的水分含量，是Z专一、Z准确的化学方法，为世界通用的行业标准分析方法。广泛应用在石油、化工、电力、医药、农药行业及院校科研等原理。
  利用卡尔费休法测定物质中水分是一种重要而灵敏的化学分析方法,但除了有一个非常好的测定仪器外,必须对测定的物质中有无干扰物质存在,根据物质中水分的含量确定适当的进样量,克服各种影响测定精度的因素,细心操作,才能得到好的测定结果。
  1935年卡尔－费休（KarlFischer）首先提出了利用容量分析测定水分的方法，这种方法即是GB6283《化工产品中水分含量的测定》中的目测法。目测法只能测定无色液体物质的水分。后来，又发展为电量法。随着科技的发展，继而又将库仑计与容量法结合起来推出库仑法。这种方法即是GB/7600《运行中变压器油水分含量测定法（库仑法）》中的测试方法。分类目测法和电量法统称为容量法。卡氏方法分为卡氏容量法和卡氏库仑法两大方法。两种方法都被许多国家定为标准分析方法，用来校正其他分析方法和测量仪器。

上面提到了卡尔费休测定法有容量法和电量法，他们的区别如下：
一、卡尔费休容量法水分测定仪
　　卡尔费休容量法（滴定法）每测定一次样品，要进行以下5个基本的步骤：

1、先向滴定池中注入一部分溶剂；

2、滴定一部分卡尔费休试剂，使其平衡；

3、注入被测样品；

4、再向滴定池中滴定卡尔费休试剂；

5、排放废液。简单的说，就 是每测定一次要更换一次试剂。

该方法是根据所注入的卡尔费休试剂的量和试剂的滴定度换算出水分含量，因为卡尔费休试剂受环境湿度、光照以及密封等因素的影 响，滴定度是随时变化的，从而导致测定误差。在测定试验过程中，每测定一次，要把上次用过的废液排放掉重新滴定新的卡尔费休试剂，给环境造成污染，试剂的 消耗量很大，操作很繁琐，测定精度低。
  自动型的容量法水分测定仪，也是需要以上5个基本步骤，只是增加了自动滴定、自动排废液等功能。

二、卡尔费休库仑法（电量法）微量水分测定仪
  卡尔费休库仑法（电量法）微量水分测定仪是在电解池平衡的情况下，只需要一个操作步骤，就是注入样品，仪器会根据样品中含水量的多少，自动的进行电解使其 再次达到平衡后，根据电解所消耗的电量，换算出水分含量，并在仪器上数字显示出结果，所以精度、准确度更高，测定速度快。库仑法的试剂加上一次可以连续长期的使用，不需要频繁更换，试剂的用量省，测定成本低，操作简单。
   以上是卡尔费休微水测定仪的两种不同的测量方法，大家在选择的时候可以根据实际需要和国标要求，选择适合的卡尔费休微量水分测定仪。
  旭鑫仪器公司生产并销售的卡尔费休微量水分测定仪有三款

ST-1503微量水分测定仪

ST-1513全自动微量水分测定仪

ST-1523全自动微量水分测定仪

三款仪器从ST-1503到ST-1523是一个不断更新进步的阶段，自动化程度越来越高，从需要人工加药清洗发展到具仪器本身具有自动排加液的功能。具体参数问题请电话咨询010-53519848。

       如果假设涉及的是理想、WM的样品表面，那么这里的重复性所指的纯粹是测量方法的重复性。在这种情况下，目前好的仪器可以达到的测量测量重复性在0.1-0.3°。而这一结果也得到许多实际测量的支撑，有不少学者研究过液体在相当WM的固体样品表面（同一晶面）的接触角值，测量结果的重复性基本上符合这里提及的数值。

       对于通常的样品表面，我们遇到过的比较WM的工业产品表面的接触角测量的可重复性在1°以内（接触角值在100-120°范围），这一重复性包括前进接触角测量的可重复性和采用固定操作步骤而获得的所谓的静态接触角值的可重复性。但我们也时常遇到一些样品，即使同样采用固定操作步骤，获得的静态接触角值的可重复性或波动幅度在3-5°。

       对于普通的表面，如果其接触角滞后性的幅度在几十度的范围，一般情况下，前进接触角值的可重复性要比通过简单测量获得的静态接触角值的可重复性好得多。后者的可重复性，即使采用固定操作步骤，在很大程度上取决于难免存在的、微小的操作上的差异可能对液滴ZH展现的接触角值的影响，而这又与样品本身的属性紧密相关。

       另外，前面讨论的结论都是基于样品表面属性基本均匀（化学/物理/几何均匀性）的前提。如果样品表面本身就不符合这一前提，那么测量得到的数值的波动幅度不但包含了前面提及的测量的因素，更是包括了样品表面本身的属性波动，这也是为什么通过测量液滴在固体表面不同位置上的接触角值，可以样品对表面均一性或不均一性进行表征的基础。

微量水分测定仪使用试剂的注意事项

1.新更换的试剂为深褐色，进入样品测量时，仪器显示为过碘。此时是不能进行测量的，需加入适量的纯水来调整试剂平衡点。可先用100微升的进样器抽取90微升纯水注入。当试剂颜色明显变浅时，要注意控制进样量，直至进入过水状态。

2.为了使测量结果更加真实有效，我们建议新试剂刚好进入过水状态后，再注入5微升纯水，仪器找到平衡点后，即可进行仪器标定和样品测量工作。

3.仪器使用间隔时间较长，在下次使用时，可多轻摇几下电解池瓶，使试剂更快地吸收瓶壁的水分，仪器进入平衡点会较快。

4.在正常的测定过程中，每100毫升试剂可与不小于0.4克的水进行反应。若测定时间过长，试剂敏感性下降，应更换新试剂。

5.电解池中的试剂 ，如果在电解过程中发现释放出大量的气泡或试剂被污染成淡红褐色，此时空白电流会增大，测定的再现性降低，同时，到达终点的时间加长，这种情况应立即更换试剂。

6.注意不要吸入或用手接触试剂。如与皮肤接触，及时用清水冲洗干净。

7.试剂有腐蚀性，请妥善保管。

微量水分测定仪常见故障与处理

1、显示电极开路

 　原因是测量电极未接通，应检查从搅拌器测量电极插座一直到与主机连接插座以及与主板连接部分是否有断开部分。另外还包括电极引线本身，如果两根线全部断开，显示电极开路。

2、显示电极短路

  　原因有两种，1是试剂严重过碘，这时的显示正常，只要加入适量的水，这种显示便消失回到正常画面。2是测量电极两铂金探头直接相连或者引线部分有相连之处，需将相连的部分分开即可。

3、状态显示00001，而试剂未过碘

   当试剂微过碘时，状态显示00001。过碘程度较深时，状态也是这种显示。当JF-3（1.0）型以下的仪器电极两铂金探头相连时，则显示这种状态，需要检察铂金探头和测量电极引线部分是否有相连的地方。

4、状态显示数值在3~4千以上，长时间运行不下降

   这种情况说明阳极室试剂中，有一定量或有大量水存在。这时应该观察阴极室内是否有大量气泡生成，如果有气泡说明仪器正在电解，阳极室内试剂中有过量的水存在而导致试剂失效，这种情况需要更换试剂。如果阴极室内无气泡产生，说明电解电流未加到电解电极上，这时要检查与电解电极相连接的所有连线和接点是否相通（加到电解电极上的电压大约40伏直流电压）。另外，电解电极阴极铂网被晶体物质或油样完全包围或者陶瓷半透膜密实后无通透性，也会使电解电流加不上，此时需将晶体物质或油样等干扰因素排除，使电解电流能够及时加上。

5、状态值超过48且不稳定 

    这种情况说明阳极室内不断有水或碘离子不断侵入，这时需要检查电解池所有密封点的密封程度，特别是进样塞内的胶垫，对于刚刚开起的仪器，阴极室液面较高，试剂通过半透膜向阳极室渗透碘离子的缘故。另外电解池内壁吸附的水在不断向试剂中扩散，都会使状态值高且不稳定。但对于具有空白自动扣除功能的仪器来说，这种情况不会影响测量结果。对于半透膜处理不好的电极，状态超过平衡状态zui高点而且需要尽快使用时，可以将电解电极内试剂抽出三分之二或全部抽出，再加入3毫升过碘试剂即可。

6、搅拌子有时不转或转速不平稳

    先检查搅拌器磁盘是否旋转有受阻现象，或顶丝不够紧连动性不好。另外看搅拌子是否使用时间过长。中间支点磨损严重，使得旋转时摩擦阻力过大所导致。

７、状态值特高五千甚至一万以上，试剂颜色逐渐变深

    这种现象有三种情况：一种是试剂过少铂金探头脱离液面、另一种是测量电极其中一根引线断开、再一种是时钟芯片记忆不准。

８、电位不断从平衡点下滑

    如果阴极室的试剂过碘而且液面较高时，阴极室内的碘会通过半透膜向阳极室内渗透所导致。这时需将阴极室液面降低就可以了。

９、兰色液晶背光变暗

    兰色液晶背光供电电压在一千伏以上。如果两根引线绝缘程度不够大时，形成漏电流。可使背光供电电压和电流下降。灯管两端引线与灯管端头连接不牢固，使电阻增大。也会使背光变暗。另外背光灯管老化。光效降低会使背光变暗，这种需要更换灯管。

１０、测量结束时仪器自动复位

    如果仪器的体积或密度和质量等参数，有设置成零或者是不符合数字规则的数字，被仪器默认时，导致仪器在计算浓度时分母无法确定而使仪器返回初始状态。

　1.润滑油的过滤性差：

　　润滑油的过滤性，有的地方也称为可过滤性、滤过性，是指润滑油是否能够顺畅地流经过滤器。因此，首先要检测你所用的齿轮油是否具有良好的过滤性。油的粘度大，相对比较粘稠，流动性低于低粘度油，但是有些情况下，高粘度油难以过滤不是因为粘度大，而是其他原因。润滑油的过滤性与三个因素紧密相关：润滑油的添加剂种类，润滑油里含有难溶物、以及液压油的水解稳定性。油里一些添加剂会影响过滤性，包括固体添加剂、粘度指数改进剂。润滑油里如果含有一些沉淀物、氧化副产物、难溶物、析出的石蜡、油的调配技术差，都会导致油里含有难以滤过的杂质。另外，油的水解稳定性差，也会影响过滤性。

　　润滑油在生产过程中搅拌不均，添加剂没有充分溶解，或者润滑油里含有某些固体添加剂，容易被高精度的滤芯滤掉，这样不但堵塞滤芯，而且影响润滑油的性能。虽然大部分润滑油添加剂都是液态，易溶于基础油，可以顺利的通过高精度滤芯。但是，有些添加剂例外。某些聚合物添加剂，例如粘度指数改进剂，低温时(30℃ 以下)，分子链会凝聚成团，容易被滤掉。有些情况下，甚至过滤精度不高的滤芯都会出现这个问题，当油温升高，这个问题就消失，因为粘度指数改进剂的分子在高温时舒展开来，不结团，容易透过滤芯。

　　2.油温低：

　　温度会影响油的粘度，进而影响油的过滤性。低温会使油的粘度增加，因此，在冷启动时，润滑油的粘度会变得更大，而当设备运转起来后，油温会增加，油的粘度会降低。如果油是在冷启动时才发生过滤困难，那么可以把油适当加热，或者使用低温性能好一点的齿轮油。许多过滤器都有旁通阀，在冷启动时，油的粘度大引起过滤困难，旁通阀会打开，让油通过。当运行一段时间后，油温上升，油的粘度降低，又通过滤芯正常过滤。

　　3.流速过高：

　　油的流速过高，会造成油压高。因此，在保证流量的前提下，适当降低油的流速，可以避免油压过高。齿轮油用的精滤器或者离线过滤器大部分都在低流速下使用。一般来说，流速可低至1加仑/分钟。

　　4.滤芯尺寸：

　　有些滤芯的过滤面积较大，可以适应高粘度润滑油的过滤，能适应的流速也更高。里如造纸机轴承油使用的滤芯，皱褶多，过滤面积较大，但价格较贵。不过从长远来看，值得使用。

　　5.滤芯的材质：

　　适用于高粘度油的过滤介质应具有这样的特征：滤孔密集、过滤材料的纤维较细。许多质量较好的液压油滤芯属于这种类型，购买时查看滤芯说明，PQ曲线可以查看油流/粘度之间的关系，以及对油压的影响。深度过滤器不适用于高粘度齿轮油。

　　6.油里含有杂质：

　　油里如果含有杂质，也是过滤困难的原因。另外，齿轮油氧化会产生一些难溶沉淀物或者胶状物，影响油的过滤性。齿轮油里如果含有水分，也会造成滤芯堵塞，影响过滤。润滑油里混入其它物质，例如混入不同种类、不同品牌的润滑油、或者盐类、化学物质等等。这些物质进入润滑油，与油发生化学反应后产生沉淀物，造成滤芯堵塞。

　　润滑油里混入杂质的原因很多，例如密封损坏、密封选用、安装不良;没有做好防污染措施，导致润滑油里进入杂质，例如新买的机器没有进行清洗就投入使用，防锈涂层或者脱落的油漆进入油里;久置的机器没有清洗，润滑油在储运和转移中进入杂质;磨损产生的碎屑导致滤芯堵塞等等。

自动微量水分测定仪的维护与保养

1.电解液的维护

把电解液存放于通风良好，环境温度小于35℃，低温无下限，相对湿度不大于75％的地方。

2.硅胶垫的更换

样品注入口的硅胶垫，过久的使用，会使穿过硅胶垫的针孔变得无收缩性，使大气中的水分进入滴定池而产生测量误差，这时应更换。

3.硅胶更换

当干燥管里的硅胶由蓝色变至浅蓝色或红色时，应更换新的硅胶。

4.滴定池磨口的保养

大约一星期内要转动一下滴定池的磨口连接处，在不能轻松转动时，要小心取下，清洗干净磨口和插口，并重新涂上薄薄的一层真空脂，（注意：真空脂不易涂得过多，否则会进入滴定池而造成测量误差）如果不这样及时检查，时间过长，真空脂就会变硬，磨口连接的零件就可能粘结而拆卸不下来。因此要经常保养好，使它们便于拆卸清洗。

5.滴定池磨口粘结处理

如果滴定池磨口连接处牢固地粘结在一起，不易拆卸时，按如下程序处理：

5.1排去滴定池中的电解液，并冲洗干净。

5.2在磨口结合处周围注入少量的丙酮，然后用手轻轻地转动磨口处零件，即可拆卸。

5.3如仍不能拆卸，请将滴定池放入2升的烧杯中，慢慢加入浓度为5％的氯化钾溶液浸泡，其液面必须十分注意，不要让测量电极、阴极室电极的引线套端头进入液体，浸泡约十几个小时或者24小时后，即可拆卸（此方法可重复进行）。

　红外测温仪测量反射物体不准确，因为反射物体会反射。红外测温仪经过反射后，不仅测量目标的红外辐射，还测量被测温仪感应到的反射面、环境温度甚至太阳光等其他红外辐射能量，因此会不准确。

　　首先，测温距离太远

　　根据原理，外置测温仪可以分为单色测温仪和双色测温仪(辐射比色测温仪)。对于单色测温仪，测量温度时，被测目标区域应充满测温仪的视场。建议被测目标的尺寸应超过视场的50%。如果目标尺寸小于视场，背景辐射能量将进入测温仪的光声支路，干扰温度测量读数，产生误差。相反，如果目标大于测温仪的视场，则测温仪不会受到测量区域外背景的影响

　　可测量目标的有效直径在不同的距离上是不同的，所以在测量小目标时要注意目标距离。红外测温仪的距离系数k定义为被测目标的距离l与被测目标直径d的比值，即k=l/d。

　　第二，选择被测物质发射率

　　1.红外测温仪一般用黑体刻度(发射率=1.00)，但实际上物质的发射率小于1.00.因此，当需要测量目标的真实温度时，必须设置发射率值。材料发射率可以从《辐射测温中有关物体发射率的数据》中找到。

　　2.红外测温仪不能通过玻璃测量温度。玻璃有特殊的反射和透射特性，所以不允许红外测温。但是温度可以通过红外窗口测量。红外测温仪不要用于测量光亮或抛光金属表面(不锈钢、铝等)的温度。).

　　第三，强光背景下目标的测量

　　如果被测目标有明亮的背景光(尤其是太阳光或强光照射)，会影响测量的精度，因此可以用物体遮挡直射目标的强光，以消除背景光的干扰。

　　第四、其他原因

　　1.只测量表面温度，红外测温仪无法测量内部温度。环境温度。如果测温仪突然暴露在20或更高的环境温差下，仪器可以在20分钟内调整到新的环境温度。

　　2.蒸汽、灰尘、烟雾等。它会阻塞仪器的光学系统并影响温度测量。为避免损坏红外测温仪，请用压缩空气清除大颗粒和灰尘，然后用布擦拭。用一块干净、略湿的布轻轻擦拭体温计本体。如有必要，可以用水和少量温和的肥皂浸泡布料。另外，使用完毕后，请尽快将红外体温计放在镜头盖上，放入携带箱中保存。

请问水分测定仪有哪些种类？

      快速水分测定仪应用于一切需要快速测定水分的行业，只要是颗粒状、粉末状、片状物、无挥发性液体均可测量，如：制药业、化学工业、电子及半导体行业、塑胶原料、橡胶、烟草、茶叶、食品、淀粉、饲料、煤炭、型砂、污水污泥、乳业等等。禾工HM系列水分测定仪是企业生产过程中和实验室水分测定仪器的Z佳选择。

上海禾工科学仪器有限公司 

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