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本生阐述:离心管的选择及注意事项!

本生(天津)健康科技有限公司 2021-07-16 11:04:37 959  浏览
  •   本生阐述:离心管的选择及注意事项!

      离心技术主要用于各种生物样品的分离和制备,生物样品悬浮液盛放在离心管中在高速旋转下,由于巨大的离心力作用,使悬浮的微小颗粒(如细胞器、生物大分子的沉淀等) 以一定的速度沉降,从而与溶液得以分离。而离心管就是离心试验中的实验耗材之一,以下便是本生生物小编的一些详解,不妨来看看:

      离心管的分类:

      1、塑料离心管

      塑料离心管的优点是透明或者是半透明的,它的硬度小,可用穿刺法取出梯度。缺点是易变形,抗有机溶剂腐蚀性差,使用寿命短。塑料离心管都有管盖,它的作用是防止样品外泄,尤其是用于有放射性或强腐蚀性的样品时防止样品外泄是很重要的一点;管盖还有一个作用是防止样品挥发以及支持离心管,防止离心管变形。在挑选这一点的时候还要注意检查管盖是否严密,在试验时能否盖严,以到达倒置不漏液;我们都知道在塑料离心管中,常用材料有聚乙烯PE),聚碳酸酯(PC),聚丙烯(PP)等,其中聚丙烯PP管性能会相对较好,所以,我们在挑选塑料离心管时尽可能的考虑聚丙烯的塑料离心管。

      2、玻璃离心管

      使用玻璃管时离心力不宜过大,需要垫橡胶垫,防止管子破碎,高速离心机一般不选用玻璃管。离心管盖子封闭性不够好,液体就不能加满(针对告诉离心机且使用角转子)以防外溢,失去平衡。外溢后果是污染转子和离心腔,影响感应器正常工作。超速离心时,液体一定要加满离心管,因为超离需要抽高真空,只有加满才能避免离心管变形。

      3、钢制离心管

      而钢制离心管强度大,不变形,能抗热,抗冻,抗化学腐蚀,它的应用也是相当广泛但使用时同样也应避免接触强腐蚀性的化学药品,如强酸、强碱等。尽量避免这些化学物质的腐蚀。

      超滤离心管使用方法和注意事项:

      1、选择合适的超滤离心管,主要考虑MWCO和浓缩体积,通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤离心管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤离心管。

      2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤离心管需要插在冰上预冷。

      3、质量和ZX二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。不同离心机的转速rpm换算成g之后,有所不同。离心机的加速度调至档,减小对膜的压力。注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开离心机,否则离心机出问题时,无法时间处理,后果不可预测!

      离心管的选择及注意事项!先和大家介绍到这,如果想要了解更多离心管的信息,可以关注天津本生生物,本生给生物医药客户提供生物实验室检测试剂及耗材,欢迎广大客户来询。

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本生阐述:离心管的选择及注意事项!

  本生阐述:离心管的选择及注意事项!

  离心技术主要用于各种生物样品的分离和制备,生物样品悬浮液盛放在离心管中在高速旋转下,由于巨大的离心力作用,使悬浮的微小颗粒(如细胞器、生物大分子的沉淀等) 以一定的速度沉降,从而与溶液得以分离。而离心管就是离心试验中的实验耗材之一,以下便是本生生物小编的一些详解,不妨来看看:

  离心管的分类:

  1、塑料离心管

  塑料离心管的优点是透明或者是半透明的,它的硬度小,可用穿刺法取出梯度。缺点是易变形,抗有机溶剂腐蚀性差,使用寿命短。塑料离心管都有管盖,它的作用是防止样品外泄,尤其是用于有放射性或强腐蚀性的样品时防止样品外泄是很重要的一点;管盖还有一个作用是防止样品挥发以及支持离心管,防止离心管变形。在挑选这一点的时候还要注意检查管盖是否严密,在试验时能否盖严,以到达倒置不漏液;我们都知道在塑料离心管中,常用材料有聚乙烯PE),聚碳酸酯(PC),聚丙烯(PP)等,其中聚丙烯PP管性能会相对较好,所以,我们在挑选塑料离心管时尽可能的考虑聚丙烯的塑料离心管。

  2、玻璃离心管

  使用玻璃管时离心力不宜过大,需要垫橡胶垫,防止管子破碎,高速离心机一般不选用玻璃管。离心管盖子封闭性不够好,液体就不能加满(针对告诉离心机且使用角转子)以防外溢,失去平衡。外溢后果是污染转子和离心腔,影响感应器正常工作。超速离心时,液体一定要加满离心管,因为超离需要抽高真空,只有加满才能避免离心管变形。

  3、钢制离心管

  而钢制离心管强度大,不变形,能抗热,抗冻,抗化学腐蚀,它的应用也是相当广泛但使用时同样也应避免接触强腐蚀性的化学药品,如强酸、强碱等。尽量避免这些化学物质的腐蚀。

  超滤离心管使用方法和注意事项:

  1、选择合适的超滤离心管,主要考虑MWCO和浓缩体积,通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤离心管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤离心管。

  2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤离心管需要插在冰上预冷。

  3、质量和ZX二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。不同离心机的转速rpm换算成g之后,有所不同。离心机的加速度调至档,减小对膜的压力。注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开离心机,否则离心机出问题时,无法时间处理,后果不可预测!

  离心管的选择及注意事项!先和大家介绍到这,如果想要了解更多离心管的信息,可以关注天津本生生物,本生给生物医药客户提供生物实验室检测试剂及耗材,欢迎广大客户来询。

2021-07-16 11:04:37 959 0
离心管的选择及注意事项

  离心管的选择及注意事项

  本生(天津)健康科技有限公司供应:移液器吸嘴,ELISA试剂盒,动物血清,全系荧光定量PCR耗材,产品包括:PCR单管、八联管、96孔板、384孔板。

  离心技术主要用于各种生物样品的分离和制备,生物样品悬浮液盛放在离心管中在高速旋转下,由于巨大的离心力作用,使悬浮的微小颗粒(如细胞器、生物大分子的沉淀等) 以一定的速度沉降,从而与溶液得以分离。而离心管就是离心试验中必备的实验耗材之一。

  离心管的分类:

  1、塑料离心管

  塑料离心管的优点是透明或者是半透明的,它的硬度小,可用穿刺法取出梯度。缺点是易变形,抗有机溶剂腐蚀性差,使用寿命短。塑料离心管都有管盖,它的作用是防止样品外泄,尤其是用于有放射性或强腐蚀性的样品时防止样品外泄是很重要的一点;管盖还有一个作用是防止样品挥发以及支持离心管,防止离心管变形。在挑选这一点的时候还要注意检查管盖是否严密,在试验时能否盖严,以到达倒置不漏液;我们都知道在塑料离心管中,常用材料有聚乙烯PE),聚碳酸酯(PC),聚丙烯(PP)等,其中聚丙烯PP管性能会相对较好,所以,我们在挑选塑料离心管时尽可能的考虑聚丙烯的塑料离心管。

  2、玻璃离心管

  使用玻璃管时离心力不宜过大,需要垫橡胶垫,防止管子破碎,高速离心机一般不选用玻璃管。离心管盖子封闭性不够好,液体就不能加满(针对告诉离心机且使用角转子)以防外溢,失去平衡。外溢后果是污染转子和离心腔,影响感应器正常工作。超速离心时,液体一定要加满离心管,因为超离需要抽高真空,只有加满才能避免离心管变形。

  3、钢制离心管

  而钢制离心管强度大,不变形,能抗热,抗冻,抗化学腐蚀,它的应用也是相当广泛但使用时同样也应避免接触强腐蚀性的化学药品,如强酸、强碱等。尽量避免这些化学物质的腐蚀。

  超滤离心管使用方法和注意事项

  1、选择合适的超滤离心管,主要考虑MWCO和浓缩体积,通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤离心管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤离心管。

  2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤离心管需要插在冰上预冷。

  3、质量和ZX二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。不同离心机的转速rpm换算成g之后,有所不同。离心机的加速度调至低档,减小对膜的压力。注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开离心机,否则离心机出问题时,无法时间处理,后果不可预测!

  总结:离心管的选择及注意事项,本生生物小编就分享到这了,看完本文您就应该有了基本的认识和了解相信大家都明白了吧!总的来说,希望对大家有所帮助。


2021-03-09 13:18:12 1028 0
本生阐述:elisa操作步骤说明及注意事项

  本生阐述:elisa操作步骤说明及注意事项


  酶联免疫吸附测定enzyme linked immunosorbent assay(简写ELISA),指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。要知道elisa操作步骤首先我们先了解一下elisa的原理是什么。

  elisa的原理:

  ①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。

  ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性, 又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体 上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物, 产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据焰色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,故可极大地放大反应效果,从而使测定方法达到 很高的敏感度。

  elisa操作步骤:

  方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法:

  1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。

  2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。

  3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。

  4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。

  5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

  6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越 强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则 410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

  方法二 用于检测未知抗体的间接法:

  用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日 洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔 中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体

  以上是elisa操作步骤,那么在elisa操作步骤的操作步骤中需要注意什么呢?下面是elisa实验的注意事项:

  1.正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。

  2.在elisa操作步骤中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:固相载体的选择、包被抗体(或抗原)的选择、酶标记抗体工作浓度的选择、酶的底物及供氢体的选择

  elisa试剂盒 本生(天津)健康科技有限公司是一家从事健康科技技术开发销售的公司,本生生物公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准。本生(天津)健康科技有限公司由具有行业背景和丰富市场经验的业人士组成,于为生命科学研究域提供产品,为广大科研工作者提供服务。 既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求,也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。


2023-06-05 11:14:21 130 0
离心管的使用方法及注意事项、如何选择适合的离心管

 离心管操作使用方法:

  1. 因刻度离心管是量入式量器,使用前必须清洗干净并作干燥处理。

  2. 读数时,一定要正确观察弯液面,否则将引进一定的误差。

  3. 使用时,离心管的数量要根据离心机的型号决定,如用双只套管的离心机做单只试验,必须在另一只离心管中装入同体积的液体,以保持平衡。

  4. 离心管需与离心机适配。要根据离心机的配置,采用合适的长短和粗细的离心管。

  5. 离心管套入离心机的套管中进行分层分离后,停止旋转时要让其自然停止,决不能用外力强制停止。

  离心管需要注意事项:

  我们在使用离心管时,不要一根管多次使用,要注意样品挥发及一些有放射性或腐蚀性强的样品外泄;在存放过程中,更是要密封好;要防止离心管在使用过程中有变形的情况发生。

  1. 离心盖上不要放置任何物质,每次使用完毕,务必清理内腔和转头。

  2. 高速微量离心机如较长时间未使用,在使用前应将离心机盖开启一段时间,干燥内腔。

  离心管是实验室里面常见的一种实验耗材,它是一种管状试样容器,可带密封盖或压盖。离心管主要是配合离心机使用的,它利用离心技术,将物体高速旋转时产生强大的离心力,使置于旋转体中的悬浮颗粒发生沉降或漂浮,从而使某些颗粒达到浓缩或与其他颗粒分离的目的。

  目前市场上按材料可将离心管分为塑料离心管,玻璃离心管以及钢制离心管。不同类型的离心管分别适合不同的应用场景。

  塑料离心管

  塑料离心管的优点是透明或者是半透明的,硬度小,可用穿刺法取出梯度。缺点是易变形,抗有机溶剂腐蚀性差,使用寿命短。塑料离心管可以配有管盖,它的作用是防止样品外泄,尤其是用于有放射性或强腐蚀性的样品时防止样品外泄是很重要的一点;管盖还有一个作用是防止样品挥发以及支持离心管,防止离心管变形。在挑选这一点的时候还要注意检查管盖是否严密,在试验时能否盖严,以达到倒置不漏液。

  玻璃离心管

  使用玻璃管时离心力不宜过大,需要垫橡胶垫,防止管子破碎,高速离心机一般不选用玻璃管。离心管盖子封闭性不够好,液体就不能加满(针对高速离心机且使用角转头)以防外溢,失去平衡。外溢后果是污染转头和离心腔,影响感应器正常工作。超速离心时,液体一定要加满离心管,因为超离需要抽高真空,只有加满才能避免离心管变形。

  钢制离心管

  钢制离心管强度大,不变形,能抗热,抗冻,抗化学腐蚀,它的应用也是相当广泛,但使用时同样也应避免接触强腐蚀性的化学药品,如强酸、强碱等。尽量避免这些化学物质的腐蚀。

  实验室常用的离心管有塑料的和玻璃的,一般塑料的用的较多, 因为玻璃的离心管不能用在高速或者超速离心机上。塑料的离心管又有PP(聚丙烯)、PC(聚碳酸酯),PE(聚乙x)等材质。PP的材质为半透明,化学及温度稳定性较好,也是实验室选用较多的一种材质。

2023-09-25 09:50:06 280 0
本生阐述:384孔板在测量上的注意事项?

  本生阐述:384孔板在测量上的注意事项?

  384孔板是一种用于我们实验室中使用广泛的装置,这种装置具有很多的保存检测性能,今天我们就来为你详细介绍下384孔板在进行测量上的注意事项具体都有哪些?下面就让天津本生小编为你详细介绍下。

  1、使用液体分配器添加液体时,液体添加头不能混合。

  2、清洁电路板并清洁。如果条件允许,使用洗衣机清洁板,以避免交叉污染。

  3、根据试剂盒的说明,反应时间应准确。

  4、测量期间请勿触摸微孔板。在运输过程中注意防止微孔板挤压手。

  5、不要将样品或试剂洒在仪器表面或内部。操作完成后,请务必洗手。

  6、如果使用的样品或试剂对污染,毒性和生物特性有害,必须严格按照试剂盒的使用说明进行操作,以免对操作人员造成伤害。在接触受污染或传染性物质后,必须对仪器进行清洁和消毒。

  7、测量期间请勿关闭电源。

  8、对于试剂盒引起的测量结果的偏差,应根据实际情况修改参数,以达到较好的效果。

  384孔板在测量上的注意事项?!本生(天津)健康科技有限公司由具有行业背景和丰富市场经验的业人士组成,于为生命科学研究域提供产品,为广大科研工作者提供服务。 既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求,也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。

2021-09-08 11:32:28 342 0
本生阐述:96孔酶标板的类型与操作使用注意事项!

  本生阐述:96孔酶标板的类型与操作使用注意事项!

  新型微量滴定板是我们生物实验中非常重要的工具,包括板保持器和板条,并且板条包括板孔和与板孔匹配的活塞。96孔板厂家告诉你,通常使用96孔微孔板。尽管不同制造商生产的微孔板相似,但在某些小细节(例如某些结构)上会有所不同,这主要是由于不同的酶标仪的合作。下面由天津本生小编阐述下:

  96孔酶标板的类型:

  它分为可分离和不可分离。对于不可拆卸,即将整个板上的板条连接在一起,则可拆卸的是将板上的板条分开,并且分开的板条有12个孔和8个孔。常用的是可拆卸的微孔板。如果您以前购买过这些板,则可以购买一些微板。尽管不同制造商生产的微孔板总体上看起来相似,但某些小细节也会有所不同,例如结构。这主要是由于使用了不同的酶标仪。因此,在选择购买微孔板时,还应考虑微孔板阅读器的外观。但是,它们通常是经过修改的,只有个别的会有所不同。因为酶板的材料通常是聚苯乙烯(PS),并且聚苯乙烯的化学稳定性很差,所以它可以被多种有机溶剂(例如芳烃,卤代烃等)溶解,并且会被腐蚀通过强酸和强碱。它不耐油脂,并且在紫外线照射后很容易变色,因此在使用过程中必须注意这些。

  96孔酶标板的操作使用注意事项!

  1.添加样品:将样品稀释液添加到涂层板上,用PBS或生理盐水按1:20的比例稀释待测血清,然后向微孔板的反应孔中添加10ul。

  2.添加对照:添加3孔阴性对照,1孔阳性对照和100ul对照血清。

  3.孵育:摇动反应板以使样品充分混合,然后将其置于37°C的培养箱或水浴中20分钟。

  4.洗涤板:用蒸馏水将15ml洗涤溶液稀释至300ml。用手洗涤时,应倒出反应板孔中的内容物,并用洗涤液充满孔中的位置,然后静置30秒以使其剧烈摇动。重复此操作5次,然后拍干。机洗需要执行5次。可以将200ul洗涤溶液注入每个孔中或将其充满,然后放置30秒钟并吸干。

  5.添加酶标记的工作溶液:向每个孔中添加100ul酶标记的工作溶液,放置在37°C的培养箱中,反应20分钟后洗板5次。洗涤板的操作与上述步骤4相同。

  6.这是反应的后一步,是显色和反应终止:将50ul底物添加到反应孔中,并在37°C的黑暗中显色10分钟。停止每个孔的溶液并混合以终止反应。

  本生阐述:96孔酶标板的类型与操作使用注意事项! 微孔板的使用应在无菌条件下进行。在使用微孔板之前和之后,请仔细对其进行消毒和清洁,但是应注意,某些微孔板在灭菌之前需要仔细阅读说明,以查看它们是否可以在高温下进行灭菌。本生(天津)健康科技有限公司由具有行业背景和丰富市场经验的业人士组成,于为生命科学研究域提供产品,为广大科研工作者提供服务。 既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求,也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。

2021-09-08 11:25:57 1167 0
本生简述:比色皿的分类及注意事项

  本生简述:比色皿的分类及注意事项

  紫外比色皿、红外比色皿、石英比色皿、玻璃比色皿使用注意事项

  比色皿一般为长方体,其底及两侧为磨毛玻璃,另两面为光学玻璃制成的透光面粘结而成。所以使用时应注意以下几点:

  1 拿取比色皿时,只能用手指接触两侧的毛玻璃,避免接触光学面。

  2 不得将光学面与硬物或脏物接触。盛装溶液时,高度为比色皿的2/3处即可,光学面如有残液可先用滤纸轻轻吸附,然后再用镜头纸或丝绸擦拭。

  3 凡含有腐蚀玻璃的物质的溶液,不得长期盛放在比色皿中。

  4 比色皿在使用后,应立即用水冲洗干净。必要时可用1:1的盐酸浸泡,然后用水冲洗干净。

  5 不能将比色皿放在火焰或电炉上进行加热或干燥箱内烘烤;

  6 在测量时如对比色皿有怀疑,可自行检测。用户可将波长选择置实际使用的波长上,将一套比色皿都注入蒸馏水,将其中一只的透射比调至95%(数显仪器调置100%)处,测量其他各只的透射比,凡透射比之差不大于0.5%即可配套使用。

  本生简述:比色皿的分类及注意事项?我司由具有行业背景和丰富市场经验的业人士组成,于为生命科学研究域提供产品,为广大科研工作者提供服务。 既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求,也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。

2021-09-24 10:47:05 538 0
本生快讯:Thermo移液器的使用方法及注意事项

  本生快讯:Thermo移液器的使用方法及注意事项


  Thermo移液器是一种量出式仪器,只用来测量它所放出溶液的体积。是一种量出式仪器,只用来测量它所放出溶液的体积。是一种量出式仪器,只用来测量它所放出溶液的体积。它是一个细长的玻璃管,中间有很大一部分。本实用新型下端口形锋利,上颈部刻有标线,是本实用新型准确容积的标志。常用的吸液管有5、10、25、50ml,通常还有称为吸液管的刻度直管。常用的Thermo移液器有1、2、5和10ml,Thermo移液器和Thermo移液器的体积通常精确到0.01ml。

  1、使用前:使用Thermo移液器时,应先看移液管的刻度、准确度、刻度位置等,使用前应先用铬酸洗液湿润,以除去Thermo移液器内壁的油污。然后用自来水清洗残留的乳液,再用蒸馏水清洗。清洗后的吸管内壁应无水滴。移液前,用滤纸将移液管端部内外的水吹干,再用移液管冲洗Thermo移液器壁2~3次,以保证移液液浓度恒定。

  2、吸液:用右手拇指和中指握住吸液管上端,将吸液管下口插入待吸收的溶液中,不要太浅或太深,一般为10-20毫米。如果太浅,就会产生空气吸收。如果太深,它会把太多的溶液粘在吸管外面。用左手拿起洗耳球,先将球的中空气压吹气,然后将球的尖嘴与吸管的上口连接,慢慢松开压扁的洗耳球,使溶液吸入管内,先吸放约1/3容量的管,用右手食指按压管口,取出,水平托住,转动管子使溶液接触刻度以上的部分,以代替内壁的水,然后从管口下排出并丢弃。反复洗涤三次后,溶液可吸收至上述刻度,立即用右手食指按压管口。

  3、调整液位:将吸管向上提离液位。吸管的末端仍然靠在装有溶液的容器内壁上。保持吸管直立。稍微松开食指(有时稍微转动吸管),使吸管中的溶液从下口缓慢流出,直到溶液弯月面底部与标记线相切。立即用食指按压吸管口。除去顶端靠壁的液滴,将其从移液管中取出,并将其插入容器中以接收溶液。

  4、放液:如果接收溶液的容器是锥形瓶,则将锥形瓶倾斜30度,吸液管竖直,吸液管下端靠近锥形瓶内壁,轻轻松开食指,让溶液沿瓶壁缓慢流下。待溶液全部流出后,等待15s后取出吸管,使附在管壁上的部分溶液流出。如果移液管上没有标记“吹气”一词,则Thermo移液器的残留溶液不能吹气,因为这部分残留溶液不包括在Thermo移液器校准的测量体积中。

  Thermo移液器 本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。


2023-08-11 10:57:20 139 0
本生阐述:牛血清白蛋白的应用

  本生阐述:牛血清白蛋白的应用

  牛血清白蛋白(BSA)在生化实验中有广泛的应用, 例如在WB实验中加入BSA, 通过提高溶液中蛋白质的浓度,对酶起保护作用。防止酶的分解和非特异性吸附,能减轻有些酶的变性,减轻不利环境因素如加热,表面张力及化学因素引起的变性的。具体的WB实验操作和BSA在实验中的应用分享如下

  方法/步骤

  测定蛋白浓度

  按50:1配置BCA工作液。10ulC液(蛋白标准)+90ulPBS液稀释成0.5mg/ml的蛋白标准液。再分别以0、1、2、4、8、12、16、20ul将蛋白标准液加入96孔板的第1~8标准孔中,在其他样品孔中加入10ul待测样品。分别加PBS定容至20ul。各孔中加入200ulBCA工作液,室温放置2小时。用酶标仪测定蛋白浓度:测定A562,依标准曲线算出蛋白浓度。

  SDS-PAGE电泳

  1 制 胶: 按比例配制分离胶,缓缓地摇动溶液,使激活剂混合均匀,将凝胶溶液平缓地注入两层玻璃极中,再在液面上小心注入一层水,以阻止氧气进入凝胶溶液中,静置40min。同前按比例配制浓缩胶,但混匀溶液时不要过于剧烈以免引入过多地氧气。吸去不连续系统中下层分离胶上的水分,连续平稳的注入凝胶溶液,然后小心插入梳子并注意不得在齿尖留有气泡,静制60min以上以保证完全聚合。

  2 预电泳: 将聚合好的凝胶安置于电泳槽中,小心拔去梳子,加入电泳缓冲液后低电压10-20V的预电泳20-30min。(目的是清除凝胶内的杂质, 疏通凝胶孔径以保证电泳过程中电泳的畅通)。

  3 样品准备:首先计算上样体积,然后按样品:上样buffer=4:1的比例加入上样bufer混匀,沸水煮10分钟,冰上5分钟。

  4 加 样: 预电泳后依次加入标准品(Marker)和待分析样品。(加样时间要尽量短,以免样品扩散,可在未加样的孔中加入等量的样品缓冲液避免边缘效应。每个泳道加5ul 。

  5 电 泳: 加样完毕,选择80V恒压进行电泳,电泳直至溴酚蓝染料前沿到达两胶交界处(一般约20分钟),更换至100V恒压电泳,电泳直至溴酚蓝染料前沿下至凝胶末端处,即停止电泳(一般约为1小时20分钟)。

  膜的封闭

  用TBST液洗涤印迹膜10分钟x2次。放入5%BSA(abs49001012)封闭液内,摇床震动,70转/分钟,室温封闭1小时30分钟。

  蛋白质的样品制备

  取心肌组织50mg,待组织块自行溶解,用滤纸吸去其表面水分,将组织块放入玻璃匀浆器球状部位,用组织剪尽量将其剪碎,将剪碎的心肌组织放入玻璃匀浆器的杆状部,按1mlRIPA+10ulPMSF/100mg心肌组织的比例加入RIPA和PMSF(先加RIPA再加PMSF),将玻璃匀浆器插入冰中,匀浆约30分钟。

  将心肌组织匀浆转移到离心管中,4℃12000g离心5分钟,收集上清(如有粘稠物进一步用超声处理),样品分装冻存于-20℃备用。

  本生阐述:牛血清白蛋白的应用,先和大家介绍到这,如果想要了解更多血清白蛋白的信息,可以关注天津本生生物,专业给生物医药客户提供生物实验室检测试剂及耗材,欢迎广大客户来询。

2021-04-27 15:24:13 427 0
本生阐述:96孔板在实验中的作用及铺板技巧

  本生阐述:96孔板在实验中的作用及铺板技巧

  96孔板是一种用于测量流量的差压产生装置。可与各种差压表或差压变送器配套使用,测量管道中各种流体的流量。设备采用特殊工艺制作,使细胞达到适宜吸附状态,所有产品均经过伽马射线灭菌。那么96孔板通常可以发挥出什么样的作用呢?接下来就由96孔板的供应商天津本生小编来讲解一下吧,希望能够对大家有所帮助。

  1、储存样品:

  96孔板可替代常规的1.5毫升离心管样品储存,储存方便,可承受-80 °c冰箱。因此它也被称为存储块。

  2、加工样品:

  96孔板可与放电枪、高通量自动控制液体操作仪及软件可以结合,实现对生物处理样品的高通量操作,如蛋白质沉淀、液液提取等,并大大提高了样品处理效率。 PP材质可承受121℃高温高压以及灭菌技术处理。

  3、采样操作:

  常用于各类自动取样器,可直接放置在自动取样器的样品室进行进样。与传统的进样瓶相比,它不仅可以使进样室中的样品数量增加一倍,而且可以实现进样室进样。在96孔板上处理后,样品直接进样,省去了来回吸样、放置样品、加盖、插入插件、洗瓶等繁琐工作。

  96孔板铺板的技巧:

  方法1:种植板后,用手拿起96孔板,左右摇动几次,然后来回摇动几次,但是这种方法总是使细胞在2中分布不均5口多口井中的-3口。 ,再一次看到一个姐姐将种植好的木板放在摇床上,摇了几分钟,结果更糟,所有的细胞都跑到了中间。

  通常我将100微升的细胞悬液添加到96孔板的每个孔中。 我将其从左侧添加到井的底部。加入一半的平板后,我混合未添加的细胞悬浮液,并继续添加剩余的一半平板。涂完石膏后,左手轻轻支撑板子的左侧,右手轻拍板子的右边缘。注意力量(我通常轻拍三下)。顺时针旋转培养板(逆时针方向不好),将剩下的三面一一拍打,让其静置约5分钟,然后将其放入培养箱中。

  方法2:该方法简直很棒,种植非常均匀。首先使用移液器吸取均匀吸取的细胞,然后将移液器吸头靠近孔的开口(请注意,移液器吸头的不接触孔的底部),然后缓慢敲低细胞在移液器。种植后,请勿摇动木板,只需将其放在显微镜下即可。

  本生阐述:96孔板在实验中的作用及铺板技巧,本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。


2021-09-02 10:33:03 1212 0
本生阐述:茜素红S染色液配制方法及染色原理

  茜素红S染色液配制方法及染色原理

  茜素红S是橙黄色的针状体。溶于水,微溶于醇,不溶于氯仿和苯。1%水溶液pH2.15。由茜素经发烟硫酸磺化,然后转变为钠盐制得。属一种蒽醌(Anthraquinone)类的衍生物,是茜素磺酸钠盐,它能与钙盐以鳌和方式形成复合物,用以识别组织细胞的钙盐成分。钙盐变化是骨细胞增殖分化和骨组织成骨潜能的标志之一。通过茜红素染色,产生橘红色沉积。

  原理:茜素红S(Alizarin Red S)钙染色法是一种旨在通过鳌和技术,使钙离子和茜素红S产生复合物,来分析固定处理的细胞样本中橘红色钙沉积现象的权威而经典的技术方法。主要适用于动物原生代或培养细胞的钙沉积和钙化结节检测。广泛用于骨细胞或组织病理生理的研究。

  用途:络合滴定指示剂和酸碱指示剂。茜素红能和许多金属离子生成稳定的红色络色物,在分析中常用作金属指示剂;光度法测定金属离子的显色剂;在分析中常用作金属指示剂;光度法测定金属离子的显色剂;酸碱指示剂,一变色范围PH值3.7(黄)~5.2(紫),第二变色范围PH值10.1(紫)~12.0(浅黄);用于极谱法测定金属离子。

  配制方法:将托盘天平上称取0.1g茜素磺酸钠定溶于100ml蒸馏水中转移入滴瓶中,贴标签备用。 或用茜素红粉加PBS溶解后,要注意调节PH值到7.2过滤就可以了。0.1%的茜素红Tris-HCL(PH8.3), Tris的浓度做分子生物学一样的,用0.Imol/L的HCI或0 1%的NaOH调节。

  保存:常温保存,有效期6个月。

  注意事项:

  1.试剂溶液在样品表面时,避免有气泡存在,同时确保铺满样品表面。

  2.茜素红S染色时间根据钙盐的含量来确定。可在显微镜下面观察,见钙盐成较深的橘红色即取出洗涤,如染色液时间过长,可能出现弥散现象。

  3.为了您的健康和安全,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

  茜素红S染色液 本生生物公司供应:ELISA试剂盒,动物血清,荧光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量离心管,进口冻存管,细胞培养皿,培养板,培养瓶,进口吸头,仪器及手套,色谱耗材,针头过滤器等。


2023-05-06 10:53:49 431 0
本生快讯——DAB染色液的使用方法及注意事项

     本生快讯——DAB染色液的使用方法及注意事项

 

  DAB染色液用于免疫组化染色,应用在Dako 自动染色系统上。

  DAB染色液的使用方法

  1.DAB显色液配制

  10mM Tris-HCl (pH7.6) 9mL +DAB (diaminobezidin 3,3-二氨基联苯胺) +0.3%(W/V) NiCl2 或CoCl2 1mL ,显色时加入5-10mL 30%H2O2 混匀后立即使用

  2. 显色

  准备好含有待测蛋白的固相膜:包括电泳、转印、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤。

  3.加入适量的DAB显色液,铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。

  4. 置于平式摇荡仪上,在室温下孵育2至5分 钟,避免光照(暗室操作),直至棕褐色沉淀出现。

  5.用镊子夹起固相膜,放进无离子水里清洗。

  6.空气中晾干。

  7. 拍照记录 。

  DAB染色液的注意事项

  1. DAB溶液应低温密封保存。如有结晶析出,应确保结晶溶解再行使用;

  2. 显色工作液应现用现配,新鲜配制的工作液应为无色或浅棕色,如颜色过深,请勿使用;

  3. DAB在常温下不稳定,每次取用后均应及时加盖密封放回冰箱,以免因DAB分解影响实验,或因渗漏造成实验环境污染;

  4. DAB有潜在致突变作用,操作时应注意穿戴好防护用具。

  DAB染色液本生公司产品种类已超过万种,正广泛应用于科研院校、中心实验室、分子生物学等科研域。公司丰富的产品既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求,也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。




2023-03-29 10:06:23 200 0
BUNSEN本生Elisa试剂盒实验的技巧及注意事项

  BUNSEN本生Elisa试剂盒实验的技巧及注意事项

  在操作elisa试剂盒实验前,不少老师会找寻很多的相关实验资料,网上的资料一大堆,然而真正所能够需要用到的技巧和注意也就那几条,熟练的了解并掌握之后再应用到实验中就会简单的多。

  一、加样的经验总结

  加样或加试剂时,请注意在吸取标本/标准品,酶结合物或底物时,个孔与一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的 “预孵育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间控制 在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。

  二、孵育的三条必知

  1.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标 板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;

  2.洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;

  3.同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。

  三、ELISA洗涤小技巧

  洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直 接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响*后的酶标仪读数。

  四、反应时间的控制

  加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔 10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。

  五、操作说明

  1.封板膜只做一次性使用。

  2.标本中待测物质含量过高时先将样本稀释一定倍数后再测定,计算时请乘以稀释倍数。

  3.各步加样均使用加样器,并经常校对其正确性,一次加样时间控制在5分钟内(标本数目多的时候,上海研域推荐使用排枪加样)。

  4.液体标本置4℃保存应小于1周,-20℃或-80℃均应密封保存,-20℃不应超过1个月,-80℃不应超过2个月;标本溶血会影响检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。

  BUNSEN本生Elisa试剂盒本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。


2023-03-10 10:16:43 135 0
分别阐述布氏漏斗与抽虑瓶的使用方法及注意事项?
 
2018-12-08 00:02:51 413 0
本生阐述:小鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒

  本生阐述:小鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒

  一、实验原理:

  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠γ干扰素(IFN-γ)水平。用纯化的小鼠γ 干扰素(IFN-γ)捕获抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被的微孔中依次加入小鼠γ干 扰素(IFN-γ),再与 HRP 标记的检测抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠γ干扰素(IFN-γ)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中小鼠γ干扰素(IFN-γ)含量。

  二、注意事项:

  1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

  2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

  3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

  4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值大于标准品孔孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请乘以总稀释倍数(×n×5)。

  5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

  6. 底物请避光保存。

  7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

  8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

  9. 本试剂不同批号组分不得混用。

  三、操作程序

  


  四、小鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒产品说明

  规格:96T、48T

  小鼠γ干扰素试剂盒性能:

  1.样品线性回归与预期浓度相关系数 R 值为 0.95 以上。 2.批内变异系数与批间变异系数应分别小于 10%和 10% 。

  检测范围: 25 pg/mL - 800 pg/mL

  灵敏度:小低检测浓度小于 1.0 pg/mL

  保存条件及有效期: 1.试剂盒保存: 2-8℃。 2.有效期: 6 个月

  小鼠γ干扰素试剂盒本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。

2023-06-05 11:15:19 100 0
天津本生-离心管相关知识点!

  天津本生-离心管相关知识点!

  离心管相关知识点!本生(天津)健康科技有限公司供应:移液器吸嘴,ELISA试剂盒,动物血清,全系荧光定量PCR耗材,产品包括:PCR单管、八联管、96孔板、384孔板。

  离心管

  容量:15ml 50ml

  外形:尖形底,搭扣盖

  离心力:12000xg

  温度范围:-80℃-121℃,可在121℃/15psi灭菌15分钟

  应用范围:主要用于细胞生物学、分子生物学、生物化学、临床及环境研究等领域。

  材质: 15ml和50ml无菌离心管采用符合USP Class-6标准进口高纯度聚丙烯(PP)树脂制成,并采用我们先进的工艺注塑成型,品质高、环保、洁净、书写区域大另外还附带可回收吸塑盒架装,可供不同客户选择。

  特点:

  >单手可操作,易旋管盖,密封性好

  >15/50ml离心管可承受12000xg离心力

  >管体刻度线清晰,带有白色书写区域

  >每个包装都有独立的货号批号标识,便于质量追溯

  >无内毒素、无细胞毒性、无DNA,RNA酶

  离心管相关知识点!先和大家介绍到这,如果想要了解更多离心管的信息,可以关注天津本生生物,业给生物医药客户提供生物实验室检测耗材,试剂,欢迎广大客户来询。


2021-03-09 11:42:29 382 0
天津本生|PCR八联管试剂盒的清洗方法及注意事项

  天津本生|PCR八联管试剂盒的清洗方法及注意事项

  实验方法原理:硅胶膜在高盐条件下结合DNA,可在低盐条件下与DNA分离。用于清洁目的的含DNA溶液中的引物,单核苷酸,酶,矿物油,盐离子等被分离,因为它们与DNA没有相似的性质。

  实验材料:PCR产物,试剂,试剂盒,PCR清洁套件,仪器,消耗品,96孔DNA制备板96孔深孔板96孔V形板

  一、PCR八联管厂家谈试剂盒的组成,储存,稳定性

  1、说明书,消耗品:96孔DNA制备板,96孔1.6ml深孔板,96孔V形板。

  2、缓冲液PCR-A:DNA结合溶液。在室温下以密封状态储存。如果发生沉淀,应将其溶解在65°C的温浴中,并在使用前冷却至室温。

  3、缓冲液W2浓缩液:除去盐溶液。使用前,根据瓶子上的体积加入乙醇,充分混合,并在室温下保存。可以使用100%乙醇或95%无水乙醇。

  4.洗脱液:2.5mM Tris-HCl,pH 8.5,在室温下以密封状态储存。

  二、PCR八联管操作步骤

  用户可以选择负压或离心。

  A.负压法

  1、正确连接负压装置,将96孔DNA制备板放在负压装置上;在PCR,酶消化,酶标记或测序反应溶液中加入3倍缓冲液PCR-A(如果缓冲液PCR-A小于100μl,加入100μl);充分混合并转移至96孔DNA制备板,打开并调节负压至-25-30英寸汞柱,并缓慢吸出板中的溶液。

  2、加入0.3 ml缓冲液W2并吸收溶液。用相同的方法用0.3ml缓冲液W2洗涤两次。

  确认在试剂瓶上的体积的缓冲液W2浓缩物中加入无水乙醇。

  3、维持负压并提取96孔DNA制备板10分钟。

  4、在长纤维组织上将96孔DNA制备板粉碎6次,引流管朝下。

  5、将96孔DNA制备板置于96孔V形板上,加入25-30ul水或洗脱至膜ZX,在室温下静置1分钟。通过以3 000×g离心5分钟洗脱DNA。

  B.离心

  1、在PCR,消化,酶标记或测序反应中加入3倍体积的Buffer PCR-A(如果Buffer   PCR-A小于100μl,加100μl);混合并转移到制备板96孔中的96孔DNA中。将DNA制备板置于96孔1.6ml深孔板中,以1000×g离心1分钟,弃去滤液。

  2、在96孔DNA制备板中,加入0.3ml缓冲液W2,以1000×g离心1分钟,弃去滤液。用0.3ml缓冲液W2以相同方式再次洗涤。确认在试剂瓶上的体积的缓冲液W2浓缩物中加入无水乙醇。

  3、将96孔DNA制备板置于96孔1.6ml深孔板中,并以3 000×g离心10分钟。

  4、将96孔DNA制备板置于干净的96孔V形底板中,加入25-30ul水或洗脱至膜ZX,在室温下静置1分钟。通过以3  000×g离心5分钟洗脱DNA。

  PCR八联管注意事项:

  1、将洗脱液或水加热至65°C有助于提高洗脱效率。

  2、DNA分子是酸性的,建议储存在2.5 mM Tris-HCl,pH 8.5洗脱液中。

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2021-09-02 10:59:10 431 0
本生阐述:Elisa试剂盒的温育如何进行?

  本生阐述:Elisa试剂盒的温育如何进行?
 

  Elisa试剂盒的操作因固相载体的形成不同而有所差异,良好的仪器和正确的操作是ELISA检测结果准确可靠的必要条件。国内医学检验一般均用板式点。

  Elisa试剂盒的操作步骤:

  方法一:用于检测未知抗原的双抗体夹心法:

  1. 包被:用0.05M  PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。

  2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。

  3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。

  4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。

  5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

  6.   结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:小鼠ELISA试剂盒反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或较浅,依据所呈颜色的深浅,以“+"、“-"号表示。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

  18、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。

  方法二:用于检测未知抗体的间接法:

  用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法"的4、5、6。

  其中还有一个步骤特别需要注意那就是洗涤:

  洗涤在ELISA过程中虽不是一个反应步骤,但却也决定着实验的成败。ELSIA就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。

  ELISA试剂盒本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。


2023-04-19 15:54:47 109 0
天津本生—酶标板的注意事项

  天津本生—酶标板的注意事项

  根据不同的分类标准,酶标板有着不同的分类。

  一、根据孔数,可分为96孔、48孔,其中96孔是现在最常用的,因为酶标板就是配合酶标仪用,现在的酶标仪做出来的最多的是96孔,所以客户在购买时也是要96孔板,厂家也为了适应市场基本上做出来的就是96孔的。

  二、根据其底部的不同,又分为平底的,U型底、V型底。平底的折射率低,适于在酶标仪检测;U型底的酶标板折射率较高,方便加样、吸样、混匀等操作,可以不用放在酶标仪上,直接通过目测观察颜色变化情况,从而判定有无相应的免疫反应。V底的酶标板可以精确的吸取样品。

  三、根据酶标板与蛋白和其它分子结合能力的不同,又分为高结合力,中结合力和氨基化的。

  1) 高结合力

  此种酶标板,表面经处理后,其蛋白结合能力大大增强,可达300~400ng IgG/cm2,主要结合的蛋白分子量>10kD。使用该类酶标板可提高敏感性,并可相对减少包被蛋白的浓度和用量,不足之处为较易产生非特异性反应。抗原或抗体包被后,以非离子去污剂无法有效地封闭未结合蛋白的部位,需使用蛋白作为封闭剂。

  2) 中结合力

  此类酶标板经表面疏水键被动与蛋白结合,适合作为分子量>20kD的大分子蛋白的固相载体,其蛋白结合能力为200~300ng IgG/cm2。由于该类酶标板所具有的仅与大分子结合的特性,适用于作为未纯化抗体或抗原的固相载体,可降低潜在的非特异jiap叉反应。该类板可以惰性蛋白或非离子去污剂作为封闭液。

  3)氨基化

  这种酶标板经表面改性处理后拥有带正电荷的氨基,其疏水键由亲水键取代。该类酶标板适合作为小分子蛋白的固相载体。使用合适的缓冲液和pH值,其表面可通过离子键与带负电荷的小分子结合。由于其表面的亲水特性和可通过其它交联剂共价结合的能力,可用于固定溶于Triton-100、Tween 20等去污剂的蛋白分子。该类板的缺陷为由于降低了疏水性,一部分蛋白分子无法结合;此外,其表面需有效地封闭。由于亲水和共价的表面特性,使用的封闭液必须能够与非反应性氨基基团和所选择的交联剂中任何功能基团发生作用。

  四、另外根据颜色又分为透明、黑色、白色。

  透明的是最常用的,用于最一般的酶联免疫实验。相对于透明的的板子,还有用于发光检测用的不透明的板子,一般有黑色和白色两种。黑色的酶标板自身会有光吸收,所以它的信号相对于白色的板子要低很多,因此一般用于检测较强的光,如荧光检测。而白色的酶标板就用于较弱的光检测,常用于一般的化学发光。另外黑色的酶标板还可以消弱非特异反应带来的问题。有些客户会问,用一般的酶标板可不可以进行发光检测,回答是不可以的,因为一般从化学发光反应中发射出的光是各向同性的,也就是说各个方向上同等发射出来的。如果用透明的板子,光不仅会从垂直方向发散,还从水平方向发散出来。很容易的就会通过各个孔之间的间隙和孔壁。这样的话,光较强时相邻孔之间的影响就会很大,因此不能用透明的酶标板来进行化学发光实验。

  五、现在大家看到的酶标板大多是可以拆卸的,也就是单条可以拆下来,也有固定的板子。单条可拆的的板子其实可以省下许多钱,因为这样的话,当你想用新的酶标板时,可以将酶标板条拆下来,买些酶标板条就可以了,只是要考虑要配相同的型号即可。另外,可拆的酶标板可以用来做体外检测,方便拆卸。

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2021-11-05 10:06:15 301 0

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