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如何用triton-X100 裂解细胞

dcfgferete 2017-01-17 18:59:33 387  浏览
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全部评论(1条)

  • aifangaini87 2017-01-18 00:00:00
    用TritonX100溶解膜蛋白之后怎样再除去Triton是比较困难的低CMC值的去垢剂透析效果很差,因为去垢剂胶团缓慢透过或者干脆就不能透过透析膜。由于一些原因,超滤方法可能效率也不高。除了通透性的问题,在超滤膜的附近蛋白浓度变得很高,这容易导致大范围聚集。在柱上进行缓冲液更换通常较缓和并且GX。可以通过脱盐柱,离子交换柱或者疏水柱完成膜蛋白中TritonX100的去除

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细胞裂解缓冲液的主要成分——TRIS-HCL、EDTA

裂解是指细胞分裂或破裂的一种状态,裂解缓冲液是一种有助于打开细胞的溶液,它可以在一些实验分析需要提取细胞内容物时进行使用,例如科学家在从细胞中提取DNA或蛋白质进行分析时就必须使用裂解缓冲液来辅助完成。细胞裂解缓冲液种类有很多,其中较常见的一种是TRIS—HCL缓冲液。

TRIS—HCL可以保持细胞裂解缓冲液的PH值zui佳状态,所以常用它作为裂解缓冲液的主要成分。裂解缓冲液有助于打开细胞,可以对细胞内的物质进行筛选,例如盐、清洁剂、螯合剂和抑zhi剂,以及一些碱性化学品。它不仅可以区分筛选甚至还可以去除这些物质。

裂解液除了生物缓冲剂之外,还包括一种螯合剂和抑zhi剂,例如乙二胺四乙酸(EDTA),因为这种化学物质与带有两个正电荷的金属离子(例如镁和钙)结合,可以使它们不能用于其他反应。许多 DNA 酶(咀嚼 DNA 的蛋白质)和蛋白酶(将其他蛋白质切碎的蛋白质)需要镁离子才能发挥作用,因此通过剥夺这些关键成分,EDTA 有助于降低蛋白酶或 DNA 酶的活性水平。

德晟为专业生产生物缓冲剂和EDTA的厂家,现在生产的生物缓冲剂类产品有TRIS、TRIS-HCL、 HEPES、 TAPS 、MOPS、 CAPS、 BICINE、 EPPS、 PEP等一系列生物缓冲液,目前成立已有十多年,拥有十分丰富的研发生产经验与产品知识,可为客户提供大量技术支持与售后保障。如有需要欢迎随时联系我们!


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