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  蕾丝Kong专属 2017-05-12 00:00:00

  、名称解释 1、前体 指某些化合物加入发酵培养基能直接彼微物物合程合产物物其自身结构并没变化产物产量却加入前体较提高 2、发酵 广义讲凡微物缺少微量机物质氨基酸、嘌呤、嘧啶、维素等均称 3、菌浓度测定 衡量产菌整培养程菌体量变化般前期菌浓增快期菌浓基本恒定补料引起菌浓波衡量补料量适合与否参数 4、搅拌热 ：机械搅拌通气发酵罐由于机械搅拌带发酵液作机械运造液体间液体与搅拌器等设备间摩擦产观热量搅拌热与搅拌轴功率关 5、批培养 ：简单程培养基接入菌种没物料加入取除空气通入排气整程菌浓度、营养浓度产物浓度等参数都随间变化 6、接种量 ： 移入种体积 接种量＝ ————————— 接种培养液体积 7、比耗氧速度或呼吸强度 单位间内单位体积重量细胞所消耗氧气mmol O2?g菌-1?h-1 8、级代谢产物 指微物定期初级代谢产物前体物质合些微物命明确功能物质程程产物即级代谢产物 9、实罐灭菌 实罐灭菌（即批灭菌）配制培养基放入发酵罐或其装置通入蒸汽培养基所用设备加热至灭菌温度维持定间冷却接种温度工艺程称实罐灭菌叫间歇灭菌 10、种扩培养 ：指保存砂土管、冷冻干燥管处休眠状态产菌种接入试管斜面化再经扁瓶或摇瓶及种罐逐级扩培养，终获定数量质量纯种程些纯种培养物称种 11、初级代谢产物 指微物外界吸收各种营养物质通解代谢合代谢维持命所需要物质能量程程产物即初级代谢产物 12、倒种 ：部种源于种罐部源于发酵罐 P 147 13、维持消耗（m） 指维持细胞低性所需消耗能量般讲单位重量细胞单位间内用于维持消耗所需基质量数 14、产物促进剂 指些非细胞所必须营养物非前体加入却能提高产量添加剂 15、补料批培养 ：批培养程补入新鲜料液克服营养足导致发酵早结束缺点 程料液加入没料液取所发酵结束发酵液体积比发酵始所增加工厂实际产采用种 16、发酵热 ：所谓发酵热发酵程释放净热量叫净热量呢发酵程产菌解基质产热量机械搅拌产热量罐壁散热、水蒸发、空气排气带走热量各种产热量各种散失热量代数叫做净热量发酵热引起发酵液温度升发酵热温度升快发酵热温度升慢 17、染菌率 总染菌率指发酵染菌批（）数与总投料批（）数比百率染菌批数应包括染菌培养基经重新灭菌再染菌批数内 18、连续培养 ： 发酵程边补入新鲜料液边放等量发酵液使发酵罐内体积维持恒定 达稳态整程菌浓度产物浓度限制性基质浓度都恒定 19、临界溶氧浓度 指影响呼吸所允许低溶氧浓度 20、复突变 由突变型野型基突变 21、种 见种扩培养 22、培养基 广义讲培养基指切供微物细胞 繁殖所需组营养物质原料同培养基微物培养提供除营养外其所必须条件 23、发酵工程：利用微物特定性状功能通现代化工程技术产用物质或直接应用于工业化产技术体系传统发酵于现代DNA重组、细胞融合、修饰改造等新技术集合并发展起发酵技术 二、填空题 1、 微物发酵培养（程）主要 批 培养、补料批 培养、连续 培养、半连续 培养四种 2、 微物般：调整期、数期、稳定期衰亡期 3、 发酵程工艺控制要化参数 溶解氧、PH、核酸量等. 4、 发酵程控制目比产率率 5、 菌种离般程 采、富集、离、目菌筛选 6、 富集培养目让 目菌 种群占优势使筛选变能 7、 根据工业微物氧气需求同培养 氧培养 厌氧培养 两种 8、 微物培养基根据产用途要 孢 培养基、种 培养基发酵培养基 9、 用灭菌：化灭菌、射线灭菌、干热灭菌、湿热灭菌 10、 用工业微物： 细菌、 酵母菌、 霉菌、 放线菌四类 11、 发酵程工艺控制代谢参数物理参数 温度、压力、搅拌转速、功率输入、流加数率质量 等 12、 环境菌检测：显微镜检查、肉汤培养、平板培养、发酵程异观察等 13、 染菌原： 发酵工艺流程各环节漏洞发酵程管理善两面 14、 实验室进行发酵菌液体发酵式主要四种：试管液体培养、浅层液体培养、摇瓶培养、台式发酵罐 15、 发酵高产菌种选育包括 （自选育）、（杂交育种）、（诱变育种）、（基工程育种）、（原质体融合） 16、 发酵产物整离提取路线：预处理、固液离、初步纯化、精细纯化品加工加工等五主要程 17、 发酵程主要析项目 ：pH、排气氧、排气CO2呼吸熵、糖含量、氨基氮氨氮、磷含量、菌浓度菌形态 18、 微物调节其代谢采用 酶性、酶合量、细胞膜透性 19、 工业微物菌种自 自离自微物 菌种保藏机构 单位获取 20、 发酵工业用糖类主要 葡萄糖、糖蜜 21、 工业发酵式根据所用菌种单或种 单纯种 发酵 混合 发酵 22、 种及发酵液进行菌状况控制用 显微镜检测、酚红肉汤培养基、平板画线培养、发酵程异观察 23、 菌种离筛选般 采、富集、离、目菌筛选步骤 24、 菌种离筛选般＿＿＿＿＿＿＿＿ 25、 用灭菌：化灭菌、射线灭菌、干热灭菌、湿热灭菌 三、问答题 1、发酵工程概念发酵工程基本两部包括哪些内容? 答：发酵工程利用微物特定性状功能通现代化工程技术产用物质或其直接应用于工业化产技术体系传统发酵与现代DNA重组、细胞融合、修饰改造等新技术结合并发展起发酵技术说渗透工程微物发酵技术工程化发展由于主要利用微物发酵程产产品称微物工程 ? .发酵部: 1.菌种特征选育 ? 2.培养基特性选择及其灭菌理论 ? 3．发酵液特性 ? 4.发酵机理 ? 5.发酵程力 ? 6.空气悬浮细菌微粒滤机理 ? 7.氧传递溶解吸收理论 ? 8.连续培养连续发酵控制 ? 二.提纯部 ? 1.细胞破碎离 ? 2.液输送滤. 除杂 ? 3.离交换渗析逆渗透超滤 ? 4.凝胶滤沉淀离 ? 5溶媒萃取蒸发蒸馏结晶干燥包装等程单元操作 2、现代发酵工程所用发酵罐应具备些特征 答：（1）、发酵罐应适宜径高比罐身较氧利用率较高； （2）、发酵罐应能承受定压力发酵罐灭菌工作要承受定压力（气压液压）温度； （3）、发酵罐搅拌通风装置能使气液充混合实现传质传热作用保证微物发酵程所需溶解氧； （4）、发酵罐内应尽量减少死角避免藏污纳垢保证灭菌彻底防止染菌； （5）、发酵罐应具足够冷却面积； （6）、搅拌器轴封要严密减少泄露 3、微物发酵种应具备几面条件 答:（1）、菌种细胞力强移种至发酵罐能迅速迟缓期短 （2）、理性状稳定 （3）、菌体总量及浓度能满足量发酵罐要 （4）、杂菌污染 （5）、保持稳定产能力 4、发酵工业用氮源些起何作用 答：氮源主要用于构菌体细胞物质（氨基酸蛋白质、核酸等）含氮代谢物用氮源两类：机氮源机氮源 1、机氮源 种类：氨盐、硝酸盐氨水 特点：微物吸收快所称谓迅速利用氮源机氮源迅速利用引起pH变化： (NH4)2SO4 → 2NH3 + 2H2SO4 NaNO3 + 4H2 → NH3 + 2H2O + NaOH 机氮源菌体作氮源利用培养液留酸性或碱性物质种经微物理作用（代谢）能形酸性物质机氮源叫理酸性物质硫酸胺若菌体代谢能产碱性物质则种机氮源称理碱性物质硝酸钠确使用理酸碱性物质稳定调节发酵程pH积极作用 所选择合适机氮源两层意义： 满足菌体 稳定调节发酵程pH 2、机氮源 源：工业用机氮源都些廉价原料花饼粉、黄豆饼粉、棉饼粉、玉米浆、玉米蛋、蛋白胨、酵母粉、鱼粉、蚕蛹粉、尿素、废菌丝体酒糟 复杂：除提供氮源外些机氮源提供量机盐及 机氮源复杂面发酵程进行影响另面机氮源源具稳定性所机氮源选取使用程必须考虑原料波发酵影响 5、发酵产品产特点种扩培养其任务 答： （2）、种扩培养指保存砂土管、冷冻干燥管处休眠状态产菌种接入试管斜面化再经扁瓶或摇瓶及种罐逐级扩培养，终获定数量质量纯种程些纯种培养物称种 （3）、种扩培养任务： 现代发酵工业产规模越越每发酵罐容积几十立米甚至几百立米?要使微物几十较短间内完巨发酵转化任务必须具备数量巨微物细胞才行 （1）发酵其化工业区别于物体所进行化反应其主要特点： 1发酵程般说都温压进行物化反应反应安全要求条件比较简单 2发酵所用原料通淀粉、糖蜜或其农副产品主要加入少量机机氮源进行反应微物同类别选择利用所需要营养基于—特性利用废水废物等作发酵原料进行物资源改造更新 3发酵程通物体自调节式完反应专性强较单—代谢产物 4由于物体本身所具反应机制能够专性高度选择性某些较复杂化合物进行特定部位氧化、原等化转化反应产比较复杂高化合物 5发酵程杂菌污染FZ至关重要除必须设备进行严格消毒处理空气滤外反应必须菌条件进行污染杂菌产要遭巨经济损失要染噬菌体发酵造更危害维持菌条件发酵败关键 6微物菌种进行发酵根本素通变异菌种筛选获高产优良菌株并使产设备充利用获按规难产产品 7工业发酵与其工业相比投资少见效快取显著经济效益 基于特点工业发酵益引起重视传统发酵工艺相比现代发酵工程除述发酵特征外更其优越性除使用微物外用植物细胞酶用工构建工程菌’进行反应；反应设备规发酵罐各种各物反应器代自化连续化程度高使发酵水平原基础所提高创新 发酵产品产特点： ①般操作条件比较温； ②淀粉、糖蜜等主辅少量机、机氮源原料； ③程反应命体自调节式进行； ④能合复杂化合物酶、光性体等； ⑤能进行些特殊反应官能团导入； ⑥产产品物体本身产物含种物质； ⑦产程需要防止杂菌污染； ⑧菌种性能改变获新反应性能或提高产率 6、培养用量确定规律 答： （1）、参照微物细胞内元素比例确定培养基配比虽千差万别都用培养某种微物同类型微物细胞比例其实定规律些规律程度知道培养基基本配比选择 同种类微物内某种含量其实比较稳定培养基终微物吸收利用其比例参考该种微物比例至少作重要依据另外尽管同种类微物比例定差异定共性所培养基集营养管由具体物质提供其用量基本符合种关系 （2）参照碳氮比确定培养基碳源利产物合同碳源少或氮源少发酵影响利同种微物碳氮比差异既同种微物其同理期碳氮比要求同所适碳氮比要通试验确定般100：（1—20）间 （3）、其素培养基些用量极少物质般要严格控制能量例维素、微量元素、某些、前体等具体用量要通试验确定培养基些比例影响培养基某些理化性质要引起重视 7、叙述防止发酵菌种退化具体条件措施些 答：（1）控制传代数：尽量避免必要移种传代并必要传代降低低限度减少细胞裂程所产自发突变几率 （2）创造良培养条件：赤霉素产菌G.fujikuroi培养基加入糖蜜、冬酰胺、谷氨酰胺、5‘-核苷酸或甘露醇等丰富营养物防止衰退效 （3）利用易衰退细胞传代：于放线菌霉菌菌丝细胞含几细胞核用菌丝接种易现衰退孢般单核用于接种避免种现象 （4）采用效菌种保藏 （5）合理育种：选育菌种所处理细胞应使用单核避免使用核细胞;合理选择诱变剂种类或增加突变位点减少离复突变；诱变处理及离提纯化保证保藏菌种纯度 （6）、选用合适培养基 培养基添加某种化物质防止菌种退化或者选取营养相贫乏培养基菌种保藏培养基限制菌株代谢减少变异反发防止菌种退化 8、何选择适发酵温度 答：1、根据菌种及阶段选择 微物种类同所具酶系及其性质同所要求温度范围同发酵前期由于菌量少发酵目要尽快达量菌体取稍高温度促使菌呼吸与代谢使菌迅速；期菌量已达合产物适量发酵需要延期提高产量期温度要稍低些推迟衰发酵期产物合能力降低延发酵周期没必要提高温度刺激产物合放罐 2、根据培养条件选择 温度选择要根据培养条件综合考虑灵选择 通气条件差适降低温度使菌呼吸速率降低些溶氧浓度髙些 培养基稀薄温度该低些温度高营养利用快使菌早自溶 3、根据菌情况 菌快维持较高温度间要短些；菌慢维持较高温度间些培养条件适宜营养丰富通气能满足前期温度髙些利于菌总说温度选择根据菌种阶段及培养条件综合考虑要通反复实践定适温度 9、同间染菌发酵影响染菌何控制 答：（1）种培养期染菌：由于接种量较产菌始占优势且培养液几乎没抗素（产物）或少抗素（产物）防御杂菌能力低容易污染杂菌阶段染菌应培养液全部废弃 （2）发酵前期染菌：发酵前期易染菌且危害 原 发酵前期菌量与杂菌没竞争优势；且未合产物（抗素）或产少抵御杂菌能力弱 期要特别警惕制止染菌发 染菌措施 用降低培养温度调整补料量用酸碱调pH值缩短培养周期等措施予补救前期染菌且培养基养料消耗重新灭菌补加些营养重新接种再用 （3）发酵期染菌 ：发酵期染菌严重干扰产菌代谢杂菌量产酸培养液pH降；糖、氮消耗快发酵液发粘菌丝自溶产物泌减少或停止甚至使已产产物解使发酵液发臭产量泡沫 措施 降温培养减少补料密切注意代谢变化情况发酵单位达定水平提前放罐或者抗素产高单位发酵液输送部染菌罐YZ杂菌 （4） 发酵期染菌：发酵期发酵液内已积累量产物特别抗素杂菌定YZ或杀灭能力染菌产影响染菌严重破坏性较提前放罐 发酵染菌措施： 染菌培养基必须灭菌才放水道灭菌：通蒸汽灭菌加入氧乙酸等化灭菌剂搅拌半才放水道否则由于各罐管道相通造其罐染菌且直接放水道造空气污染导致其罐批染菌 ? 凡染菌罐要找染菌原症药该罐要彻底清洗进行空罐消毒才进罐 ? 染菌厉害车间环境要用石灰消毒空气用甲醛熏蒸特别若染噬菌体空气必须用甲醛蒸汽消毒 10、发酵级数确定依据 答： 般由菌丝体培养始计算发酵级数工厂第级种罐始计算发酵级数 谷氨酸：三级发酵 级种（摇瓶）→二级种 （罐）→发酵 青霉素：三级发酵 级种 （罐）→二级种（罐）→发酵 1、发酵级数确定依据：级数受发酵规模、菌体特性、接种量影响 2、级数难控制、易染菌、易变异管理困难 般2-4级 3、 发酵产品放反应级数确定非重要 面 11、发挥菌种产潜力主要考虑几点 12、半连续培养说明其优缺点 答：补料批培养基础间歇放掉部发酵液（带放）称半连续培养某些品种采取种式四环素发酵 优点 放掉部发酵液再补入部料液使代谢害物稀释利于产物合提高总产量 缺点 代谢产前体物稀释提取总体积增 13、发酵工程主题微物特点 答：发酵工程所利用微物主要细菌、放线菌酵母菌霉菌 特点：(1)周围环境温度、压强、渗透压、酸碱度等条件极适应能力 (2)极强消化能力 (3)极强繁殖能力 14、叫染菌发酵影响提炼危害 答：染菌：发酵程除产菌外其菌繁殖 染菌影响：发酵程污染杂菌严重影响产发酵工业致命伤 ? 造量原材料浪费经济造巨损失 ? 扰乱产秩序破坏产计划 ? 遇连续染菌特别找染菌原往往影响情绪产积极性 ? 影响产品外观及内质量 发酵染菌提炼影响：染菌发酵液含比发酵液更水溶性蛋白其杂质 采用机溶剂萃取提炼工艺则极易发乳化难使水相溶剂相离影响进步提纯 采用直接用离交换树脂提取工艺链霉素、庆霉素染菌量杂菌黏附离交换树脂表面或离交换树脂吸附降低离交换树脂交换容量且杂菌难用水冲洗干净洗脱与产物起进入洗脱液影响进步提纯 15、结合所《微物发酵工程》课程论述某工业发酵产品产工艺流程（画图说明）越详细越 答：①培养基制备 ②、菌空气制备 ③、菌种与种扩培养 ④、发酵培养 ⑤、通化工程技术离、提取、精制 欢迎追问

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