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　　国外常见的细胞培养耗材您知道多少?

　　细胞培养耗材有好多牌子，好的是Corning Costar、Nunc和BD Falcon三个牌子;稍差些的有德国的Greiner和瑞士的TPP,这两个牌子比较前面的三个主要劣势是在产品种类单一和知名度不够，另外质量方面也可能有一些差距;再下面就是Orange等一些杂牌子了，无论质量还是知名度都差距较大。

　　因为国内目前主要还是Corning Costar，Nunc和Falcon三家的天下，下面就分别讲讲他们各自情况：

　　一 Corning Costar

　　这本来是两家公司,Corning大家可能都知道，美国的一个巨牛级公司，世界500强，下面有一堆业务，什么光纤、玻璃、陶瓷啦，Corning都做。它的Life Science部门则作的是细胞培养耗材、移夜器、过滤等一系列的实验室产品;Costar本来也是做细胞培养耗材的，后来这块业务给Corning收了，就叫做Corning Costar，不过以后会变成只叫Corning，Costar就消失了。大家在跑客户时，如果看到的耗材是橘红色盖子(培养瓶、离心管等)就是Corning的;看到的培养瓶子是黑色的，那就是Costar。另外Corning的货号都是6位的，Costar的都是4位的。

　　我个人认为Corning(Costar)的质量是同类产品中好的，几乎没听说过投诉它质量的;它的产品线也全，其它牌子有的几乎它都有(除了BD的IVF和BioCoat，以及Nunc的多层培养瓶个别几个产品)，它自己也有一些有特色的东西，比如Costar的Transwell，Corning的塑料试剂瓶和过滤器。此外，Corning在国内做的时间也长，知名度高，客户基础好，毕竟好东西大家都认。

　　二 Nunc

　　再说说Nunc，一个丹麦的牌子，质量好，没话讲。95年的时候和Nalgene合并，Nalgene大家肯定都听说过，几乎每个新建实验室都会买Nalgene，大家卖Epp的离心机时是肯定经常会碰到老师要求配大离心管的，哪些都是Nalgene的。另外插一句，Nalgene Nunc的大老板就是Apogent，这个公司在做Bio-tool方面可是全世界范围内的公司，纽约上市交易的，收了一大堆牌子，比如说，Matrix排枪(间距可调的哪种)，Abgene、Robbins啦，几乎无孔不入，另外Apogent还有一个分支是做临床的。

　　回过头来说Nunc，国内前两年做得不错，不过现在好像不怎么样了，估计主要还是价格下不来，另外还有个分销商的问题，它现在的代理商是Invitrogen(就是卖Gibco的哪家，最近收了MP，好象他的老板也是Apogent)，下面好像就乱放分销商了，这些分销商良莠不齐，卖得掉的乱报高价，卖不掉的就乱降价，竟然有个分销商说10块钱一块板，让我帮他卖掉点，我倒!

　　不过话说回来，Nunc还是个很好的牌子，产品很全，另外它的酶标板很有优势，Falcon和Corning都没得比，估计也只有Greiner和它有一拼。现在没做好的原因主要还是代理商。

　　三 BD Falcon

　　Falcon应该叫做Discovery Labware(供应商的官方说法)。这个Labware的供应商那就是美国的BD公司了。BD公司比前两家的Corning和Apogent也丝毫不差，一家百年老店(听说原公司所在地已经给当地政府列为文物保护了)，进过500强。BD Bioscience(BD 的生命科学部分)好几个产品：Pharmingen、Clontech和Discovery Labware。Discovery Labware本来只有Falcon，后来加了Biocoat，前段时间BD收购了Genetest(药物发现方面的，据说在美国很火)，也算在了Labware的下面，但其中主要的就是Falcon。据BD说，Faclon是这个领域里早的牌子，国外占有率最高，一年能卖上亿美金，Corning什么的都是后来者，没得比。另外BD在培养器皿的处理方面很有一套，据她的技术人员说，这些培养器皿都是在密闭环境下处理，表面处理更均一;其它牌子都是在一个开放的环境下进行的处理，相对来说就差一些;另外Falcon的包装不错，是双层的，有一些中间商就会为了这点要选Falcon，因为这样的包装适合长途运输

　　国外常见的细胞培养耗材您知道多少?我司由具有行业背景和丰富市场经验的业人士组成，于为生命科学研究域提供产品，为广大科研工作者提供服务。 既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

　　本生带您了解如何选购合适的细胞培养耗材?

　　细胞培养广泛应用于医学的各个领域，要适应细胞的生长环境、保证实验的顺利进行，选择合适的细胞培养耗材是关键。那么，我们应该如何选购合适的细胞耗材呢?

　　选购合适的细胞培养耗材，可从以下几方面入手：

　　细胞培养瓶

　　1、培养方式：细胞培养技术分为贴壁培养与悬浮培养两种，一些细胞耗材仅适用于贴壁细胞或悬浮细胞培养中的一种，也有两种方式都适合的细胞耗材，在选购细胞耗材时首先要确定细胞培养方式，选择适合该方式的细胞耗材。

　　2、培养面积：大型的细胞实验需要较大培养面积的细胞耗材做支撑，小型的实验可以选择小面积的耗材，可根据实验大小，通过细胞密度来确定细胞耗材的培养面积。

　　3、耗材种类：常见的细胞耗材种类包括培养皿、培养板、培养瓶等，这几种耗材各有特点、形状各异，具体可根据实验需求和个人喜好而定。

　　96孔细胞培养板

　　4、材质选择：细胞耗材的材质分为玻璃和塑料两种，玻璃材质可反复使用，塑料材质多为一次性耗材，不同的细胞对胰酶的敏感度不一样，在选择时要根据细胞类型而定。

　　以上是关于细胞耗材选购的几点建议，细胞对于环境的要求较高，做好细胞耗材的选购工作需要在日常的工作中多学习、积累相关知识。

　　细胞培养耗材 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

　　冻存盒的相关特点您知道多少?

　　冻存盒可放入40只冻存管(4行10排)与冻存管底部呈互锁连接，使您可以很轻松的实现单手操作。字母与数字组合颜色编号体系，使您可以轻松而又简单的辨认出所存放的冻存管。BUNSEN本生冻存管 冻存盒配有缓冲橡胶防滑撑脚。可适用于外旋1.2ml冻存管、外旋2.0ml冻存管、外旋5.0ml冻存管、配有硅胶O形圈的内旋2.0ml冻存管。

　　1、高质量经久耐用的聚碳酸脂冻存盒，适用于低至-196摄氏度的超低温下使用。

　　2、冻存盒上每个格均有数字编号，使您可以简单而快速的辨认出每支冻存管。

　　3、配有透明冷冻盒盖，和能够快速流出的大孔径彩色冻存管架。

　　4、我们可提供品规齐全的冻存盒供您选择，这些冻存盒都是为标准1.2ml、2.0ml、3.5ml和5.0ml冻存管量身定制的配套冻存盒。

　　5、我们可提供多种格数不同的冻存盒(5*5,9*9,10*10)，大大增加了您的选择弹性

　　6、经121摄氏度20分钟湿热灭菌。

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　　PCR 八连管的知识点您知道多少?

　　材质：医疗级聚丙烯

　　产品特点：

　　● 医疗级聚丙烯材质制成

　　● 超薄管壁，极快温度传导;管体透明，便于样本观察

　　● 凸盖设计，贴合紧密，有效避免样品挥发流失;平盖设计，适用于实时定量PCR实验;

　　独特的管盖加长内封和盖体密封设计，有效避免爆盖问题

　　● 无RNase、无DNase、无内毒素

　　● 自封袋+独立内盒+纸箱严密包装方式，确保产品运输安全

　　参数

　　● 工作温度：-20℃~100℃

　　● 可配套常规品牌PCR仪，可承受全支撑转子离心力：6,000G

　　1、医疗级聚丙烯材质制成;

　　2、超薄管壁，极快温度传导;管体透明，便于样本观察3、凸盖设计，贴合紧密，有效避免样品挥发流失;平盖设计，适用于实时定量PCR实验;独特的管盖加长内封和盖体密封设计，有效避免爆盖问题;

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　牛血清知识的普及，您知道多少!

　　牛血清是一种浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。内含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或生长活性起到生理平衡作用。

　　牛血清根据对不同年龄的牛采血得到的血清也不相同，大体分为4类：

　　1、胎牛血清(Foetal Bovine Serum，简称FBS)：采自5-8个月胎龄牛胚胎中的胎血;

　　2、新生牛血清(Newborn Calf Serum，简称NBCS)：采自出生一天~一周内的新生牛;

　　3、小牛血清(Calf Serum)：采自出生10-30天的小牛;

　　4、成年牛血清(Adult Bovine Serum，简称ABS)：采自成年牛收全血后分离得到血清。

　　我国本土国产血清也因地域环境原因不能规模量产和技术差异等问题，目前在细胞培养领域胎牛血清我国以进口血清为主。

　　因携带疯牛病病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛细小病毒、狂犬病毒等传染性风险，在北美血清禁运后，目前国内市场上进口的血清主要来自于南美和澳洲。

　　特别是澳洲，因从来没有发生过疯牛病和口蹄疫，在畜牧业被认为是纯净的大陆，成为了优质牛血清的血源。　　

　　牛血清知识的普及，您知道多少！先和大家介绍到这，如果想要了解更多血清的信息，可以关注天津本生生物，业给生物医药客户提供生物实验室检测耗材及试剂，欢迎广大客户来询。

　　赛默飞移液器您知道多少!

　　赛默飞移液器您知道多少!本生(天津)健康科技有限公司供应：移液器吸嘴，ELISA试剂盒，动物血清，全系荧光定量PCR耗材，产品包括：PCR单管、八联管、96孔板、384孔板。

　　F1移液器擅长：舒适精准，双活塞带量程锁，白色仙韵不凡

　　F2移液器擅长：整只高温高压灭菌，经久耐用，黑色稳定可靠

　　F3移液器擅长：物美价廉，操作灵活多样，灰色高冷大气

　　F1-ClipTip移液器-移液新贵 擅长：多通道液面平齐，ClipTip密封摒弃摩擦力，省时省力，具有高超的精准度

　　E1-ClipTip移液器-飙车必备擅长：

　　电动移液，稳定高效，尤其擅长间距变化，转板操作，批量样品转移;正向移液，反正移液，连续分液、梯度稀释。一应俱全;多道移液液面平齐，ClipTip密封摒弃摩擦力，省时省力 。

　　可配移液器：大龙、芬兰百得、普兰德、爱频道夫等移液器

　　Finnpipette Novus 1-10 µl Micro中文版本单道电动移液器

　　Finnpipette Novus 1-10 µl中文版本单道电动移液器

　　Finnpipette Novus 5-50 µl Micro中文版本单道电动移液器

　　Finnpipette F3 1-10 μl Micro单道可变量程移液器

　　Finnpipette F3 20-200 μl 单道可变量程移液器

　　Finnpipette F3 5-50 μl micro单道可变量程移液器

　　Finnpipette F3 0.2-2 μl Micro单道可变量程移液器

　　特点：

　　超微设计的吸头孔

　　无色透明透明树脂材质

　　带刻度标记

　　通用

　　小型微米级滤芯

　　坚固时尚的吸头架设计

　　洁净声明：

　　QSP移液吸头不含：

　　非无菌包装产品：

　　RNA酶/DNA酶

　　DNA

　　致热原

　　电子束照射无菌：

　　RNA酶/DNA酶

　　DNA

　　致热原/内毒素

　　生物负载

　　PCR抑制剂

　　内毒素 ATP

　　赛默飞移液器您知道多少!我司由具有行业背景和丰富市场经验的业人士组成，于为生命科学研究域提供产品，为广大科研工作者提供服务。 既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

　　什么是细菌培养皿?您知道多少？

　　下面来看看天津本生对细菌培养皿的详解：90*15塑料培养皿 重达14.8+g，内测凸起透气点设计，可顶住皿盖，实现培养皿内外气体交换。

　　【细菌培养皿包装方式】

　　辐照灭菌-20套/袋，500套/箱

　　表面光滑平整，晶莹剔透，厚度均匀，皿底平整光洁、无畸变，使定量分析更准备。

　　堆叠设计使叠放和存储更容易

　　耐磨耐腐蚀

　　【细菌培养皿产品特点】

　　由聚苯乙烯(PS)制成，适合实验室接种、划线、分离细菌的操作。

　　产品晶莹剔透、厚度均匀，皿底平整光洁、无畸变，使定量分析更准确。经真空等离子表面处理(TC 处理)，细胞贴壁性优良。

　　专门设计的培养皿盖有利于气体交换。

　　叠放环使叠放和处理更加容易。

　　【使用注意事项】

　　本产品为一次性使用，已灭菌，不可高温高压再次灭菌

　　拿放时需小心谨慎，轻放轻拿

　　平板培养时需倒置，防止冷凝水的污染

　　本生(天津)健康科技有限公司由具有行业背景和丰富市场经验的专业人士组成，于为生命科学研究领域提供产品，为广大科研工作者提供服务。 既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。

　　产品涵盖有荧光定量PCR耗材(八联管,单管,96孔板,384孔板,封板膜,辅助器等)，ELISA试剂盒，移液器吸嘴，离心管，冻存管，培养皿，培养板，培养瓶，吸头，仪器及手套，培养基，抗体，血清，色谱耗材，针头过滤器及实验室常用耗材。 品种类超过万种，广泛应用于科研院校、ZX实验室、分子生物学等科研领域。

　　来看看下，什么是细菌培养皿?本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

　　低吸附微型离心管的优点您知道多少?

　　低吸附微型离心管是低吸附耗材中比较受欢迎的一款，适用于很多应用场合。BUNSEN本生今天和大家简单分享一下它的优点。

　　1、样品损失降到较少

　　由于受到样品体积越来越小的限制，降减分析中使用离心管可能带来的负影响越来越重要。

　　为了能够继续后续的分析，样品损耗较小化对目前存在的低浓度蛋白质/DNA情况非常必要。

　　2、密封性

　　带锁扣安全盖给用户的日常操作提供了很大的安全，尤其是在加热应用中。为了满足医学和分子生物学研究的要求，我们还为所有的微型试管都提供两项额外的洁净度的选择。

　　(1)带锁扣安全盖用于加热的应用

　　(2)较高可承受的离心力30000*g(2.0ml可达25000*g)

　　(3)盖子的宽大铰连使得合盖操作简单

　　(4)盖子上有大面积标记区

　　(5)有3种洁净度选择，适用较高要求

　　备注：加入额定体积的无盐水，放置在固定角的转子离心机中，然后在20摄氏度下离心90分钟。

　　3、多用途

　　(1)较高可承受离心力20000*g

　　(2)盖子的宽大绞链使得合盖操作简单

　　(3)盖子上大面积标记区

　　(4)有6种颜色可选

　　低吸附微型离心管的优点您知道多少? 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

　　对于移液器滤芯吸头的知识您知道多少?

　　移液吸头采用医用级聚丙烯材料，在洁净环境下制造，采用精密的模具，采用专业生产工艺，确保我们的吸头拥有光滑的内表面和相同的尺寸，这无论对单道移液器和多道移液器的精确移液都至关重要，生产符合ISO9001:2002质量管理体系，每一批产品都经过检查以确保产品无DNA酶、无RNA酶、无热源。规格有10ul、100ul、200ul、1000ul，普通无滤芯吸头、带滤芯吸头、加长版吸头。

　　特点一、疏水性滤芯避免交叉感染：

　　疏水性滤芯，高精度工艺烧结而成，有效阻隔气溶胶和生物分子，防止移液器被样品溶液污染，同时有效节流液滴和喷溅，纳米孔径，确保枪头气压穿透性。

　　特点二、加长型吸头1ul以下微量吸取

　　加长型吸头保证1ul以下试剂有效吸取，同时长吸头当从深孔板、细胞培养瓶、锥心离心管以及其他较深容器中移液或加液时，可避免触碰这些较深容器的内壁，减少交叉感染;

　　特点三、超低吸附内管壁确保实验结果准确

　　看不见的液体薄膜残留在吸头内壁(试剂挂壁)，随着吸头被丢弃，造成大量珍贵样品的浪费，尤其是对于敏感的PCR和实时定量PCR实验来说，低吸附表面可提高重复性并显著减少昂贵试剂的损耗。SunTrine吸头内表面经涂层处理，疏水性好，移液性能佳，有效防止液体试剂残留吸头内，提高珍贵样本的回收率确保实验数据准确性。

　　适配机型

　　普通移液吸头优化的形状设计具有通用性，适配赛默飞、吉而逊、莱伯特、瑞宁等国内外知名品牌的移液器。

　　产品材质：

　　普通移液吸头采用医用级聚丙烯(PP)材料，高度透明材质，提高吸移控制度，适用于分子生物学和基因学研究的应用，垂直度、低残留。

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　　天津本生-对于细胞培养瓶您知道的有多少!

　　细胞培养瓶采用符合USP-Class VI标准纯聚苯乙烯原料，GMP10万级洁净车间生产;2种盖型，分别为密封盖和透气盖;2种培养表面，分别为TC亲水表面和非TC疏水表面;培养瓶颈侧有磨砂书写区，侧面有容量刻度便于识别等,那么细胞培养瓶有哪些特点，下面不妨来看看天津本生小编的一些详解：

　　培养面积：25cm2、75cm2、175cm2;瓶盖：密封盖、透气盖;

　　产品特点：

　　1：采用符合USP-Class VI标准纯聚苯乙烯原料，GMP10万级洁净车间生产;

　　2：2种盖型，分别为密封盖和透气盖;

　　3：2种培养表面，分别为TC亲水表面和非TC疏水表面;

　　4：培养瓶颈侧有磨砂书写区，侧面有容量刻度便于识别;

　　5：堆叠设计，易于堆放，不易滑落;

　　6：无热原，无内毒素，无细胞毒性;

　　7：辐照灭菌，SAL 10-6

　　天津本生-对于细胞培养瓶您知道的有多少!我司由具有行业背景和丰富市场经验的业人士组成，于为生命科学研究域提供产品，为广大科研工作者提供服务。 既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

　　96孔板铺板的小技巧您知道多少?

　　有关96孔板的相关资料详解，下面让本生生物小编给大家简单作一介绍吧：

　　当细胞可以开始在96孔板中生长时，细胞总是分布不均。第二天，将发现存在一些其他地方堆积生长，而在我国许多不同地方，细胞具有非常稀疏。密集区域归因于单元学生之间的间隙。接触YZ作用影响研究细胞的生长，因此我们很难通过评估干预因子对细胞的影响。因此，均匀的96孔板也是企业后续实验的先决条件。现在将我以前没有使用的旧方法与选择使用的新方法不断进行管理比较，以便每个人都能看到ZG自己的长处和短处。

　　老方法：植板后，用手拿起96孔板，左右摇动，然后来回摇动几次，但这种方法通常在2-3个细胞的5口井中分布不均匀。 在大多数情况下，中间的孔会出现成堆的分布，我感到一阵麻烦。 我又一次看到一个姐姐把木板放在摇床上摇了几分钟。 结果更糟。 细胞都在中间。

　　通常，我会在96孔板的每个孔上，加入100微升的细胞悬浮液。把它从左边加到洞底。加入一半板材后，与未加入的细胞悬浮液混合，然后继续加入剩余的一半板材。盖上盖子后，用左手轻轻握住木板的左边，然后用右手轻拍木板的右边缘。注意力集中在力量上(我通常敲击它三次)。太多或太多次会导致细胞堆积。顺时针转动盘子(逆时针方向不好) ，将剩下的三面逐一拍打，静置5分钟左右，然后放入37度的培养箱中。

　　2新方法：这种方法是非常好，非常均匀播种。使用等速吸引吸取细胞，然后吸移嘴对孔(注意尖不接触孔枪头底部)的侧壁上，然后再慢慢敲除细胞吸管端定植后，不要摇晃板，它只是可以直接在显微镜下被放置，这个方法可以被说成是100%有效的。 希望每个人都可以提供帮助。

　　补充：从6孔板到96空板，细胞应均匀分布分散。用培养基进行稀释细胞，然后将培养板放置在适当的位置。添加一个细胞时和之后，请勿移动能力培养板;如果通过空气环境中有很多东西，没有要吹的培养基，但是我们不要因为移动学习培养板。加入ZG细胞后，静置20-30分钟，然后可以将其移入培养箱。这样，细胞结构通常具有均匀生长。当然，前提是细胞消化系统良好。

　　总结：96孔板铺板的小技巧您知道多少?本生生物小编就分享到这了，看完本文您就应该有了基本的认识和了解相信大家都明白了吧!总的来说，希望对大家有所帮助。

　　广口试剂瓶相关特点您知道多少?

　　试剂瓶采用优质聚丙烯PP/高密度聚乙烯HDPE原材料，无生物毒性，十万级净化车间生产环境生产，多重质量体系认证，确保无DNase/RNase，无热源、无内毒素，灭菌塑料瓶采用伽马射线灭菌，拆开即用，大大提高用户包装效率。

　　产品特点:

　　品种齐全，8ml、15ml、30ml、60ml、125ml、150ml、250ml、500ml、1000ml，有透明、本白色和棕色，棕色试剂瓶具有优良的遮光功能，可用于储存光敏感物质;

　　采用专业防渗漏瓶口设计，无需内盖或内垫保护，密封性能优异，100%确保不漏液，宽口设计，液体取用方便;

　　选用进口优质原料，理化指标优异，具有很强的抗压性、冲击性与耐酸性能，聚丙烯耐高温121℃，高密度聚乙烯HDPE耐低温-40℃，并满足高温高压灭菌处理要求;

　　引进进口高精度的数字控制生产设备，产品做工精致，手感舒适，瓶身厚薄均匀，光泽度高、无色差、不同批次间均一性高;

　　工艺上采用高端成型技术及表面处理技术，塑料瓶内外表面光滑，试剂不挂壁，大大降低样本损耗;

　　提供专业定制服务，拥有强大的模具制造能力，可为用户提供定制产品;

　　防漏液设计：

　　试剂瓶瓶盖瓶口经防漏液设计，反复开启和拧紧不会影响瓶子的密封性能，瓶盖内的密封环紧贴着瓶颈斜面内边缘形成一个防漏阀以确保盖子密封;

　　耐用，壁厚均一：

　　一次性吹塑成型，无接缝，先进的成型技术确保瓶子具有更均匀的壁厚，高质量的瓶壁，以确保瓶壁能有效的防止破裂或刺穿底部，瓶底平整，有利于在灌装线上平稳运行

　　广口试剂瓶相关特点您知道多少?我司由具有行业背景和丰富市场经验的业人士组成，于为生命科学研究域提供产品，为广大科研工作者提供服务。 既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

　　细胞培养的步骤和注意事项您需知

　　一、 复苏

　　1. 把冻存管从液氮中取出来，立即投入37℃水浴锅中，轻微摇动。液体都融化后(大概1-1.5分钟)，拿出来喷点酒精放到超净工作台里。

　　2. 把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中(用培养基把冻存管洗一遍，把粘在壁上的细胞都洗下来)，1000转离心5分钟。

　　3. 把上清液倒掉，加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动，使培养皿中的细胞均匀分布。

　　4. 标好细胞种类和日期、培养人名字等，放到CO2培养箱中培养，细胞贴壁后换培养基。

　　5. 3天换一次培养基。

　　二、 传代

　　1. 培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。

　　2. 把原有培养基吸掉。

　　3. 加适当的胰蛋白酶(能覆盖细胞就行)，消化1-2分钟。

　　4. 细胞都变圆后加如入等体积的含血清的培养基终止消化。

　　5. 用移液枪吹打细胞，把细胞都悬浮起来。

　　6. 把细胞吸到15ml的离心管中，1000转离心5分钟。

　　7. 倒掉上清液，加1-2ml培养基，把细胞都吹起来。

　　8. 根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中。一般，癌细胞分5个，正常细胞传3个。继续培养。

　　三、 冻存

　　把细胞消化下来并离心(同上)。用配好的冻存液把细胞悬浮起来，分装到灭菌的冻存管中，静止几分钟，写明细胞种类，冻存日期。4℃ 30min，-20℃ 30min，-80℃过夜，然后放到液氮灌中保存。

　　冻存液的配制： 70%的完全培养基+20%FBS+10%DMSO. DMSO要慢慢滴加，边滴边摇。

　　细胞培养的步骤和注意事项 先和大家介绍到这，如果想要了解更多细胞培养的信息，可以关注天津本生生物，专业给生物行业客户提供生物实验室检测耗材，欢迎广大客户来询。

不仅仅要知道怎么做，还必须知道为什么这么做，透过现象看本质，透过原理，来解答SPE小柱操作的常见疑惑，今天小编就透过SPE背后的原理，告诉您SPE为什么有这样哪样的操作要求，一起来围观吧！

01

为什么SPE小柱操作要强调流速？

答：SPE小柱的填料装填压实以后，形成柱床，当溶剂流过小柱，速度过快将导致两个问题，一个问题是对于键合相填料，由于流速快而使得其不能充分浸润舒展，因而导致其保留活性降低；其次过快的流速导致小柱可能形成沟渠，使得填料未被充分浸润，降低了吸附填料与样品的接触面积，影响了目标物质的传质过程，因而导致回收率降低。对于0.5-3.0mL/min的小柱流速通常是不会产生沟渠效应的，另外沟渠的形成与柱床高度有关，对于薄膜型的萃取膜片或者膜盘，由于横截面大，柱床低，在高流速下不会导致严重的沟渠效应，因此适合在高流速的大体积水样的富集，对于离子交换和特异性吸附，填料和分析目标物的相互作用时间比常规小柱长，流速的控制，确保了好的保留效果。

沟渠效应

SPE小柱的填料装实后，当通过小柱的流速较低时，液体是以层流的方式通过填料层，将填料层浸润充分，湿润的液面截层逐级向前推进，见附图；当流速过大的时候，而柱床厚度较高时，可能会在填料内部形成沟渠通道，液流将通过沟渠，快速通过小柱，而使得填料的浸润变得不充分，这样将使得体与填料的接触面积大大降低，严重影响填料对目标物质的保留效果。

图一、SPE形成沟渠和田间灌溉的沟渠

图二、SPE正常层流和沟流通过小柱填料

02

溶剂环境的pH怎么影响化合物在小柱上的保留，为什么我们要关注化合物的pKa值，在C18小柱中需要考虑这些因素吗？

答：首先我们来说一下，Ka指的是酸度系数，又名酸离解常数，可以理解为酸离解H离子的能力，而pKa=-lgKa，对于酸，在环境pH下存在如下平衡：

左边的A-/HA，实际是指溶剂环境下，离子态和分子态的比例，右边反映了左侧两者的转化关系，取决于（pH-pKa)的数值大小。对于离子交换小柱，保持目标物的离子化而非分子态，是一个关键点，这对于离子交换作用机理的交换柱，将直接关系到其实验成败。而对于硅胶键合C18小柱的萃取，由于硅胶（—SiOH）不能完全“封端”，在pH大于4.0的情况下，硅胶都会带上负电荷，因而会使得能电离的化合物与硅胶作用，增强了这种附带的次级作用理（主作用力为非极性相互作用力），而使得此类物质在硅胶-C18上的保留增强，若只考虑C18的非极性作用力，必然会导致回收结果的不尽人意。

03

中性氧化铝，酸性氧化铝、碱性氧化铝，怎么区分？

答：Al2O3 的主要作用力是通过金属铝ZX与化合物的羟基形成氢键来吸附，或者通过离子交换作用。中性氧化铝（Al-N）：pH为6.5，中性氧化铝主要通过铝原子ZX与带有高负电荷的杂原子作用，如：N、O、P、S及富电子的芳香族化合物。

先理解酸化后和碱化后的氧化铝，氧化铝的性能变化：

Al2O3 + 6HCl = 2AlCl3 + 3H2O；

Al2O3 + 2NaOH= 2NaAlO2(偏铝酸钠) + H2O

酸化的氧化铝和碱化的氧化铝，使得氧化铝表面的电荷性发生改变，如酸性氧化铝带正电荷的ZX容易吸附阴离子，并且产生偶极作用，吸附极性化合物；而碱性则吸附极性和含阳离子官能的化合物。

04

为什么在农残检测过程中GCB常见于净化模式，而不用于富集模式？

答：SPE的净化模式常被用来吸附杂质，而富集模式常被用来吸附目标物质，GCB是一种石墨化碳黑，是将炭黑在惰性气氛下加热到2700-3000℃烘焙而成，它由六个碳原子构成平面六角形，并且层叠而成，对于芳香平面分子，很容易嵌入，而具有较强吸附芳香化合物的选择性，对于其他分析物也有较好的吸附性能，填料的吸附与解吸附的性能将直接影响填料的使用范围，对于GCB而言，其吸附性能较强，但是解吸附的可逆性稍差，需要选择合适强度的溶剂来释放被吸附的物质，因而造成了解析溶剂匹配较为困难，由于其对色素等的优秀吸附性能，因而在农残样品处理中，常用来吸附色素等杂质，而不是选择用来保留目标化合物。

05

HLB小柱为什么与传统的硅胶键合C18不一样，厂商建议可以不活化平衡？

答：SPE小柱活化平衡的目的有两个，一是使得键合官能团填料的湿润和舒展，使之保持对目标化合物的ZD吸附活性，另外一个目的就是去除填料本身可能引入的杂质。我们知道硅胶键合C18，是在硅胶微球表面键合疏水性的C18官能团，为了使得其保持对目标物的充分的吸附活性，需要在湿润的环境上样，在填料表层形成的液膜（活化平衡）和上样的溶剂分子有良好的相容性，目标物在膜间进行传质，与键合C18发生疏水作用而保留，C18本身不具备水浸润性，直接上水样，C18蜷缩，而且强的疏水性导致其与溶剂中的目标物质接触传质变得困难，因此活化平衡必不可少，HLB小柱采用聚合物改性材料，增加了亲水基团，使得在上样溶剂时就能很好的和水溶剂互溶，因而填料的官能团能在上样溶剂的环境下就与目标物分子充分接触，而发生传质，使得目标物质被充分保留住。

06

淋洗步骤通常需要干燥，这个原因是什么？

答：淋洗液通常要干燥，主要作以下考量：

1.通常由于反相萃取在化合物的前处理中使用的比较多，正如反相色谱在色谱中作为常见的分离方法一样，在反相萃取中的淋洗液常为水相或者含水的缓冲溶液，去除水份，可以便于后续干燥浓缩步骤。

2.有的项目，在淋洗步骤完成后，直接用一定体积的洗脱液，比如1ml的甲醇洗脱，此过程将洗脱与定容集为一步处理，前一步的处理必然对洗脱步骤的定量结果产生影响。

3.便是溶剂互溶问题，当淋洗步骤使用的溶剂极性与洗脱溶剂的极性差异较大时，会产生乳化分层，洗脱阻力大，洗脱液被稀释的风险等，导致洗脱效果的差异，以致于实验结果的失败。

07

我们在使用硅胶键合填料类型的色谱柱的时候，出于对色谱学的常识，知道了硅胶键合填料一般厂商建议的pH使用范围为2-8，那么对于使用硅胶键合的填料的固相萃取小柱，是否需要严格遵守这样一条规定？

答：首先，我们需要了解到，厂家建议的pH2-8的耐受范围，是为了保证色谱柱的正常使用寿命，硅胶键合相在超出耐受的pH范围使用，会导致键合相与硅胶基质的断裂，因此会损害色谱柱柱效和保留特性，但是我们知道这个pH耐受值范围外的溶剂对于色谱柱的影响，主要是一个积累性的过程，在溶剂冲刷下，逐渐溶解而导致色谱柱性能改变和不可逆，寿命减短。SPE小柱和色谱柱的一个差异就是，SPE是一次性消耗品，在耐受的溶剂范围外，短暂时间的溶剂冲刷对于小柱的保留特性影响甚微，并不会导致其保留显著差异，因此其使用的pH范围更宽，一般可以在pH值范围1-10使用，而不会导致其结果的差异性。

不仅仅要知道怎么做，还必须知道为什么这么做，透过现象看本质，透过原理，来解答SPE小柱操作的常见疑惑，今天小编就透过SPE背后的原理，告诉您SPE为什么有这样哪样的操作要求，一起来围观吧！

01 为什么SPE小柱操作要强调流速？

答：SPE小柱的填料装填压实以后，形成柱床，当溶剂流过小柱，速度过快将导致两个问题，一个问题是对于键合相填料，由于流速快而使得其不能充分浸润舒展，因而导致其保留活性降低；其次过快的流速导致小柱可能形成沟渠，使得填料未被充分浸润，降低了吸附填料与样品的接触面积，影响了目标物质的传质过程，因而导致回收率降低。对于0.5-3.0mL/min的小柱流速通常是不会产生沟渠效应的，另外沟渠的形成与柱床高度有关，对于薄膜型的萃取膜片或者膜盘，由于横截面大，柱床低，在高流速下不会导致严重的沟渠效应，因此适合在高流速的大体积水样的富集，对于离子交换和特异性吸附，填料和分析目标物的相互作用时间比常规小柱长，流速的控制，确保了好的保留效果。

沟渠效应

SPE小柱的填料装实后，当通过小柱的流速较低时，液体是以层流的方式通过填料层，将填料层浸润充分，湿润的液面截层逐级向前推进，见附图；当流速过大的时候，而柱床厚度较高时，可能会在填料内部形成沟渠通道，液流将通过沟渠，快速通过小柱，而使得填料的浸润变得不充分，这样将使得体与填料的接触面积大大降低，严重影响填料对目标物质的保留效果。

图一、SPE形成沟渠和田间灌溉的沟渠

图二、SPE正常层流和沟流通过小柱填料

02 溶剂环境的pH怎么影响化合物在小柱上的保留，为什么我们要关注化合物的pKa值，在C18小柱中需要考虑这些因素吗？

答：首先我们来说一下，Ka指的是酸度系数，又名酸离解常数，可以理解为酸离解H离子的能力，而pKa=-lgKa，对于酸，在环境pH下存在如下平衡：

左边的A-/HA，实际是指溶剂环境下，离子态和分子态的比例，右边反映了左侧两者的转化关系，取决于（pH-pKa)的数值大小。对于离子交换小柱，保持目标物的离子化而非分子态，是一个关键点，这对于离子交换作用机理的交换柱，将直接关系到其实验成败。而对于硅胶键合C18小柱的萃取，由于硅胶（—SiOH）不能完全“封端”，在pH大于4.0的情况下，硅胶都会带上负电荷，因而会使得能电离的化合物与硅胶作用，增强了这种附带的次级作用理（主作用力为非极性相互作用力），而使得此类物质在硅胶-C18上的保留增强，若只考虑C18的非极性作用力，必然会导致回收结果的不尽人意。

03 中性氧化铝，酸性氧化铝、碱性氧化铝，怎么区分？

答：Al₂O₃ 的主要作用力是通过金属铝ZX与化合物的羟基形成氢键来吸附，或者通过离子交换作用。中性氧化铝（Al-N）：pH为6.5，中性氧化铝主要通过铝原子ZX与带有高负电荷的杂原子作用，如：N、O、P、S及富电子的芳香族化合物。

先理解酸化后和碱化后的氧化铝，氧化铝的性能变化：

Al₂O₃ + 6HCl = 2AlCl₃ + 3H₂O；

Al₂O₃ + 2NaOH= 2NaAlO₂(偏铝酸钠) + H₂O

酸化的氧化铝和碱化的氧化铝，使得氧化铝表面的电荷性发生改变，如酸性氧化铝带正电荷的ZX容易吸附阴离子，并且产生偶极作用，吸附极性化合物；而碱性则吸附极性和含阳离子官能的化合物。

04 为什么在农残检测过程中GCB常见于净化模式，而不用于富集模式？

答：SPE的净化模式常被用来吸附杂质，而富集模式常被用来吸附目标物质，GCB是一种石墨化碳黑，是将炭黑在惰性气氛下加热到2700-3000℃烘焙而成，它由六个碳原子构成平面六角形，并且层叠而成，对于芳香平面分子，很容易嵌入，而具有较强吸附芳香化合物的选择性，对于其他分析物也有较好的吸附性能，填料的吸附与解吸附的性能将直接影响填料的使用范围，对于GCB而言，其吸附性能较强，但是解吸附的可逆性稍差，需要选择合适强度的溶剂来释放被吸附的物质，因而造成了解析溶剂匹配较为困难，由于其对色素等的优秀吸附性能，因而在农残样品处理中，常用来吸附色素等杂质，而不是选择用来保留目标化合物。

05 HLB小柱为什么与传统的硅胶键合C18不一样，厂商建议可以不活化平衡？

答：SPE小柱活化平衡的目的有两个，一是使得键合官能团填料的湿润和舒展，使之保持对目标化合物的ZD吸附活性，另外一个目的就是去除填料本身可能引入的杂质。我们知道硅胶键合C18，是在硅胶微球表面键合疏水性的C18官能团，为了使得其保持对目标物的充分的吸附活性，需要在湿润的环境上样，在填料表层形成的液膜（活化平衡）和上样的溶剂分子有良好的相容性，目标物在膜间进行传质，与键合C18发生疏水作用而保留，C18本身不具备水浸润性，直接上水样，C18蜷缩，而且强的疏水性导致其与溶剂中的目标物质接触传质变得困难，因此活化平衡必不可少，HLB小柱采用聚合物改性材料，增加了亲水基团，使得在上样溶剂时就能很好的和水溶剂互溶，因而填料的官能团能在上样溶剂的环境下就与目标物分子充分接触，而发生传质，使得目标物质被充分保留住。

06 淋洗步骤通常需要干燥，这个原因是什么？

答：淋洗液通常要干燥，主要作以下考量：

1.通常由于反相萃取在化合物的前处理中使用的比较多，正如反相色谱在色谱中作为常见的分离方法一样，在反相萃取中的淋洗液常为水相或者含水的缓冲溶液，去除水份，可以便于后续干燥浓缩步骤。

2.有的项目，在淋洗步骤完成后，直接用一定体积的洗脱液，比如1ml的甲醇洗脱，此过程将洗脱与定容集为一步处理，前一步的处理必然对洗脱步骤的定量结果产生影响。

3.便是溶剂互溶问题，当淋洗步骤使用的溶剂极性与洗脱溶剂的极性差异较大时，会产生乳化分层，洗脱阻力大，洗脱液被稀释的风险等，导致洗脱效果的差异，以致于实验结果的失败。

07 我们在使用硅胶键合填料类型的色谱柱的时候，出于对色谱学的常识，知道了硅胶键合填料一般厂商建议的pH使用范围为2-8，那么对于使用硅胶键合的填料的固相萃取小柱，是否需要严格遵守这样一条规定？

答：首先，我们需要了解到，厂家建议的pH2-8的耐受范围，是为了保证色谱柱的正常使用寿命，硅胶键合相在超出耐受的pH范围使用，会导致键合相与硅胶基质的断裂，因此会损害色谱柱柱效和保留特性，但是我们知道这个pH耐受值范围外的溶剂对于色谱柱的影响，主要是一个积累性的过程，在溶剂冲刷下，逐渐溶解而导致色谱柱性能改变和不可逆，寿命减短。SPE小柱和色谱柱的一个差异就是，SPE是一次性消耗品，在耐受的溶剂范围外，短暂时间的溶剂冲刷对于小柱的保留特性影响甚微，并不会导致其保留显著差异，因此其使用的pH范围更宽，一般可以在pH值范围1-10使用，而不会导致其结果的差异性。