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   前言

食品国家安全标准GB5009.28—2016《食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定》于2017年6月23正式实施，在此，依照国家标准使用DAD（二极管阵列检测器）对常见的3种食品防腐剂进行了分析。本文介绍了采用天美赛里安液相色谱仪LC6000分析食品中常见的山梨酸、苯甲酸、糖精钠三种防腐剂，该方法结果稳定可靠，符合GB5009.28—2016的标准要求。   

使用配备了天美赛里安6210自动进样器、6310柱温箱、6430DAD二极管阵列检测器的LC6000液相相色谱仪进行实验。见图1 LC6000

试剂样品

使用上述的仪器条件，进样量10uL，分析苯甲酸、山梨酸、糖精钠。所得到的谱图如图2所示，同时结合表3，可以看出峰型良好，完全满足相关国家标准要求。

▼ 表3. 3种待测防腐剂相关参数

线性测试

使用外标法进行校准定量，依次从低浓度到高浓度进行测定，以峰面积做外标工作曲线。结果如图3、4和5所示，可以看出响应值和浓度呈良好的线性关系且重复性良好，所得到的相关系数均在0.999以上。

脂肪酸

脂肪作为人体的三大供能营养素之一，对人体有许多重要的生理作用。油脂中 90% 以上是脂肪酸，而脂肪酸又分为饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸。多不饱和脂肪酸中含有的 n-6 和 n-3 脂肪酸属必需脂肪酸，是人体无法合成而必须从食物中获取的。脂肪酸成分是食品质量的重要指标，因为它提供了有关含脂肪食品营养价值的关键信息。食品中脂肪酸成分的测定通常使用有机溶剂从食物基质中萃取脂肪含量，然后对甘油三酯进行酸性水解或碱性水解，从而产生游离脂肪酸。通过与甲醇的酯化作用将这些游离酸转化为甲基酯类 (FAMEs)，以增加其挥发性，从而使其适合 GC 分析。根据食品中脂肪酸含量的不同，样品的衍生化过程不同，但都存在操作步骤多，耗时且成本高昂，容易出现错误和交叉污染的问题。

赛默飞zuixin的Trace 1600系列气相色谱仪可为用户提供全自动样品制备平台，同时采用超高效的FAME色谱柱和H2做载气可实现10分钟内高效分离37种脂肪酸。赛默飞智能即时连接分流/不分流进样口的Thermo Scientific™ HeSaver-H2Safer™ 可限制载气的总流速，从而消除使用氢气作为载气有关的任何安全风险。另外还可以在柱温箱中安装氢气传感器，进一步提高使用氢气的安全性。

赛默飞全新Trace1600系列气相色谱仪

一

自动样品处理平台

自动化样品制备可加快样品制备速度，提高通量，同时避免人为操作导致的误差和交叉污染。TriPlus RSH SMART 自动进样器提供先进的内置机器人，具有优秀的精度和重现性。可实现日常样品处理操作的完全自动化或自定义更复杂的样品制备工作流程。对于分析效率有更高要求的用户，一套TriPlus RSH SMART制备平台可以为两套GC使用，将衍生化的样品注入到两套GC，从而提供一倍工作效率。按照 ISO 12966-2“快速”法（单一酯基转移步骤），通过设置好的制备循环，制备平台可在 8 个工时内可制备多达 48 个样品。当需要根据 AOAC 996.01 方法进行酸催化甲基化时，可在大约 4.30 个工时内制备24 个样品。

二

TRACE 1610 GC 参数

进样口：温度230度，分流比300:1，隔垫吹扫5mL/min

载气：氢气，0.2mL/min

程序升温：40度(保持1min)，80 ºC/min至150度，11 ºC/min至240度(保持1min)

色谱柱：TRACE TR-FAME (10m, 0.10mm, 0.20μm)

FID：温度280度；空气350mL/min；氢气35mL/min；尾吹气40mL/min

01

标样色谱分离效果

37种脂肪酸甲酯标准色谱图见图1。采用的 TRACE TR-FAME 毛细管柱长度仅为 10 m，可在10分钟内实现目标化合物的高效分离。其中关键物质对（C21:0、C20:2 和 C20:3、C22:1）的分离度 (Rs) 计算值 ≥ 1.0（应用 USP 公式）。此外，目标分析物达到高斯峰形，平均计算不对称因子 (As) 为 1.0。

图1 37种脂肪酸甲酯色谱图（标准品用正己烷稀释，稀释比1:10）（点击查看大图）

02

日内和日间萃取重复性

使用自动制备平台，在测试期间，日内和日间的整体绝对峰面积 RSD < 9%，相对峰面积 RSD < 3.3%。此外，TRACE TR-FAME 色谱柱的专业优化设计确保了稳定的色谱性能，整个测试期间的平均 RT偏差和 As 分别为 0.005 分钟和 1.0，结果见图2。

图2 六个工作日内日内和日间萃取重复性的重叠色谱图（点击查看大图）

03

花生油样品分析

植物油样品分析：使用该平台分析了花生油样品，色谱图见图3。

图3 花生油脂肪酸成分的色谱图。浅lanse色谱图采用AOAC 996.01衍生化法，huangse色谱图采用ISO 12966-2“快速法”。（点击查看大图）

总 结

赛默飞Trace 1600系列气相色谱仪以其出色的灵活性和稳定性，可以在一台GC上同时搭载多个应用方法，并可以随时更换不同类型进样口、检测器，满足实验室多任务分析需求，为用户提高效率、节约成本，提供切实可行的方案。赛默飞智能即时连接分流/不分流进样口的Thermo Scientific™ HeSaver-H2Safer™ 可限制载气的总流速，从而消除使用氢气作为载气有关的任何安全风险。另外还可以在柱温箱中安装氢气传感器，进一步提高使用氢气的安全性。快速高效的气相分离方法结合全自动样品制备平台可为用户提供了高通量，高效率的解决方案。

近日，由河北省药品医疗器械检验研究院组织的“河北省气相、气质及ICP-MS检验检测技术培训班”在石家庄市顺利举办。河北市药品检验所（中心）、省药品审评中心、药品生产企业共计21家单位、49位相关工作人员参加培训。天美公司作为本次培训班的独 家赞助商，全程参加了本次培训会。

会议期间，天美公司色谱市场经理丁辰春为大家介绍了《天美赛里安GC-MS在药品中的应用及案例》，展示赛里安气质联用产品的技术特点，例如：轴向离子源、独特的无透镜设计、大容量分子涡轮泵等技术在制药领域的应用优势。

此外，天美还向大家介绍了《赛里安GC网络版软件与审计追踪的应用》并演示了赛里安Compass CDS气相色谱工作站，它完全符合GMP/GLP和美国FDA 21CFR part 11法规要求。Compass功能强大，包括权限管理、审计追踪、电子签名、数据完整性等，为广大制药 用户解决后顾之忧。

在培训会议间隙，各位老师及培训工作人员莅临天美公司展台，详细了解了天美旗下赛里安气相与气质联用产品在药物检测领域的应用与优势，赛里安气质联用仪精巧的设计、强大的技术性能、稳定的分析表现赢得了在场老师的肯定。

天美色谱介绍

天美色谱拥有SCION（赛里安）和Techcomp（天美）两大 品牌，2014年天美与布鲁克达成协议收购原瓦里安的气相色谱与气质联用产品线，经过数年的匠心培育，如今天美色谱产品线拥有完善的产品体系，形成了基于色谱的全套解决方案，包括气相色谱、气质联用、液相色谱、样品前处理及进样装置、色谱柱及消耗品和色谱数据系统等六大业务模块，为色谱用户的不同应用需求提供一站式解决方案。

山梨酸盐、苯甲酸盐等常用食品中作防腐剂、抗氧化剂、稳定剂，《GB 2760-2011食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》标示了以山梨酸钾、苯甲酸钠、糖精钠计的最 大使用量。

安谱实验重磅推出 CNWBOND 山梨酸苯甲酸检测专用小柱，应用于山梨酸钾、苯甲酸钠、糖精钠三种有机酸同时分析，一次实验可收集三种目标物。

CNWBOND 山梨酸苯甲酸检测专用小柱应用

可适用于果汁、饼干、果馅、鱼肉、巧克力、鱼罐头、面包、火锅底料等多种食品基质。

实验方法

前处理方法：称量1g 基质于50mL 离心管，加入9mL 去离子水（pH=6~8），漩涡提取，10000 rpm离心5min，取出上清液（必要时可用滤纸过滤），加10mL水重复提取一次，离心，合并上清液，定容至20mL，取2mL 上样液待上样。

活化平衡：5mL 甲醇，5mL 水

上样：2mL 加标待上样液

淋洗：3mL 水

洗脱：5mL 0.2M NaCl溶液

浓缩：混合过滤后，取部分进样，HPLC/UV检测。

HPLC/UV检测条件（仅供参考）

仪器：Thermo Fisher Ultimate3000

色谱柱：Athena BST-C18（II） 液相色谱柱（4.6mm*150mm，5um）

流动相：甲醇：0.02M乙酸铵=5:95

硫酸盐：1.0mL/min

检测波长：230nm

进样量：10uL

柱温：35℃

实验数据

实验谱图

1.出峰顺序依次为苯甲酸钠、山梨酸钾

图1 标准品中苯甲酸钠、山梨酸钾峰

图2 鱼肉基质中加标苯甲酸钠、山梨酸钾峰       图3 果汁基质中加标苯甲酸钠、山梨酸钾峰

图4 果馅基质中加标苯甲酸钠、山梨酸钾峰         图5 饼干基质中加标苯甲酸钠、山梨酸钾峰

2.从上到下依次为：SPE专用柱方法加标样品谱图、SPE方法空白基质样品谱图、国标方法GB 5009.28-2016空白基质样品谱图

图6 巧克力、鱼罐头、面包、火锅底料的基质谱图

3. 实验照片

GB 5009.28-2016方法净化和山梨酸苯甲酸检测专用小柱净化效果对比

实验结论

采用所开发的SBEQ-CA5876小柱适用于各种基质中的山梨酸钾、苯甲酸钠、糖精钠检测，回收率在73.04%~102.17%之间，且RSD值小于10%，能够检出阳性样品，产品性能优异，基质适用性良好，能够满足检测的需要。同时对于某些复杂基质，除杂效果好于国标方法，有助于仪器和色谱柱的维护。

CNWBOND 山梨酸苯甲酸检测专用小柱的优势

01

性能优异：产品回收率和稳定性优异，能够满足检测的需要，一次实验即可得到三种目标物；

02

方法统一：可应用于各种类型食品基质中山梨酸钾、苯甲酸钠、糖精钠的同时检测，不同基质方法统一，无需区分基质类型，满足不同检测的需求，操作简单，节约实验时间和人力成本。

相关产品配置方案

2023年5月19日，由北京理化分析测试技术学会水质检测专业委员会主办的《生活饮用水标准检验方法》(GB/T 5750-2023)宣贯会石家庄站成功召开。

水质安全问题和国民生活息息相关，《生活饮用水卫生标准》（GB 5749-2022）是我国开展饮用水水质监督管理的重要依据。天美公司旗下色谱品牌赛里安携带生活饮用水新标准解决方案和多款仪器与参会观众见面，包括赛里安456i气相色谱、赛里安436i-esq单四极杆气质联用仪。

赛里安456i气相色谱仪

赛里安436i-esq单四极杆气质联用仪

通过本次环境水质领域的创新标准检测宣贯会，天美与客户进行深入的交流，加深了彼此的了解，受到广大用户的关注。天美赛里安致力于为各行业提供全套色谱、质谱解决方案，为广大用户提供更加优质的服务，让科研和检测工作绽放魅力。

天美色谱介绍

天美色谱产品线拥有SCION（赛里安）和Techcomp（天美）两大 品牌， 赛里安是2014年天美从布鲁克收购原瓦里安的气相色谱与气质联用产品线，经过数年的匠心培育，天美色谱产品线拥有完善的产品体系，形成了基于色谱的全套解决方案，包括气相色谱、气质联用、液相色谱、样品前处理及进样装置、色谱柱及消耗品、色谱数据系统等六大业务模块，为色谱用户的不同应用需求提供一站式解决方案。

相对量子产率

量子产率是一个基本的光物理参数，它描述了一个样品的荧光效率，被定义为发射的光子数量与样品吸收的光子数量的比率。准确和可靠的量子产率测量对包括显示材料、太阳能电池、生物成像和药物开发等应用非常重要。

有两种测量量子产率的方法：绝 对法和相对法。在绝 对法中，量子产率是用积分球直接测量的，而在相对法中，未知样品的荧光强度与标准样品的荧光强度相比较，以计算出未知样品的量子产率。爱丁堡FS5荧光光谱仪（图1）通过相对法测量2-氨基吡啶（2AMP）的量子产率。2AMP在硫酸（H2SO4）中的量子产率以前曾被用作紫外-可见光范围内的参考标准。2AMP的量子产率在1968年测量为60%1，在1983年测量为66%2。这些文献中的量子产率参考值现在已经有几十年的历史了，这里我们用1M H2SO4中的硫酸奎宁（QBS）作为参考标准，用爱丁堡FS5荧光光谱仪对2AMP在1M H2SO4中的量子产率进行了重新测量和评估。

图1：FS5荧光光谱仪

方 法

2AMP的相对量子产率可以通过以下公式计算

公式1

其中下标S和R分别表示待测样品（2AMP）和参比样品（QBS）。Φ是量子产率，I是综合荧光强度，A是激发波长下的吸光度。n是平均发射波长下用于待测样品和参比样品的溶剂的折射率。本文中，2AMP和QBS都使用了相同的溶剂（1M H2SO4），所以这项值为1。

为了提高计算出的量子产率值的准确性和精确性，最 好的方法是准备和测量几个不同浓度的待测样品和参比样品。通过绘制2AMP和QBS的I与1-10-A的关系，可以用斜率（GradS和GradR）来计算量子产率（公式2）。这种方法可以防止潜在误差，如染料聚集，在较高的浓度导致的非线性。

公式2

准备五种不同浓度的2AMP 1M H2SO4的溶液和五种QBS在1M H2SO4中的溶液。使用FS5荧光光谱仪测量吸收和荧光光谱，该荧光光谱仪配备有150W氙灯、PMT-980检测器和SC-05比色皿支架。

2AMP和QBS的吸收和发射光谱首先，通过使用FS5的内置透射检测器测量吸收光谱来确定五个浓度2AMP和QBS溶液的吸光度值。在激发波长（310 nm）下，溶液的吸光度值被保持在0.1以下，以尽量减少内滤效应的影响，吸光度值范围在0.008和0.098之间。2AMP和QBS的归一化吸收光谱显示在图2a中。

图2：（a）2AMP（绿色）和QBS（紫色）的归一化吸光光谱。(b) 2AMP（绿色）和QBS（紫色）的归一化荧光光谱。(c) 不同浓度的2AMP的荧光光谱。C1溶液是浓度最 低的（在310nm处的吸光度=0.01），C5是浓度 最 高的（在310nm处的吸光度=0.098）。所有光谱都是在爱丁堡FS5荧光光谱仪获得。

接下来，采集了5个2AMP和QBS溶液的荧光光谱。荧光光谱仪检测的荧光强度取决于激发波长、激发和发射带宽以及积分时间。通过保持这些参数相同，2AMP和QBS的综合荧光强度、IS和IR可以比较。实验参数是λex=310 nm，激发和发射带宽分别设置为3 nm和0.5 nm，步长为1 nm，积分时间为0.5 s。图2b显示了2AMP和QBS的归一化荧光光谱。

使用荧光线性分析来确定量子产率

每个浓度的2AMP的荧光光谱被合并到Fluoracle中一张图（图2c）。公式2中的斜率GradS可以使用Fluoracle的线性分析功能从图2c中的2AMP光谱中计算出来，如图3所示。

为了计算GradS校准参数被设置为面积（橙色框），变量名称被设置为1-10-A（绿色框）。按 "应用 "计算面积（综合荧光强度）。然后输入从吸收光谱中得到的每种浓度的2AMP的吸光度项（1-10-A）值（浅蓝色框）。

图3：Fluoracle中图2c的线性分析

校准类型为线性，并勾选了通过零点的曲线（深蓝色框）。荧光强度与吸光度的积分项与线性拟合一起绘制在屏幕的右下方。曲线的斜率（GradS）为K1（红色框）。然后对五个QBS光谱重复同样的过程来计算斜率GradR。两条曲线及其计算的斜率都显示在图4中。

图4：综合荧光强度与2AMP和QBS的吸光度的关系

QBS在H2SO4中的量子产率的文献值为ΦR=56.1%4。然后用公式2计算出2AMP在H2SO4中的量子产率为64.3%，这个值与以前报道的60%和66%的值一致。

结 论

爱丁堡FS5荧光光谱仪用相对法测定2AMP在1M H2SO4中的量子产率。通过FS5 Fluoracle软件的线性分析功能，数据分析变得简单。使用QBS作为参考标准，计算出2AMP的量子产率为64.3%。这个数值与以前的文献报告相一致，表明FS5可以进行准确和可靠的相对量子产率测量。

参考文件

1. R. Rusakowicz, A. C. Testa, 2-Aminopyridine as a standard for low-wavelength spectrofluorimetry. J. Phys. Chem. 72, 2680–2681 (1968).

2. S. R. Meech, D. Phillips, Photophysics of some common fluorescence standards. J. Photochem. 23, 193–217 (1983).

3. K. L. Wong, J. C. Bünzli, P. A. Tanner, Quantum yield and brightness. J. Lumin. 224, 117256 (2020).

4. B. Gelernt, A. Findeisen, A. Stein, J. A. Poole, Absolute measurement of the quantum yield of quinine bisulphate. J. Chem. Soc. Faraday Trans. 2 Mol. Chem. Phys. 70, 939–940 (1974).