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- 天空上的云sky 2016-07-18 00:00:00
- 一般细胞不要使用,因为该溶液中含有钙离子,会促进细胞聚团,还有乙酰水杨酸。 单独的HEPES可以,但是也没有必要,比PBS贵。 如果是鞘液,去离子水就可以了。细胞混悬液,一般无特殊要求,就用PBS
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生物缓冲剂是一种化学物质,可以稳定所需要范围的PH值,它的种类很多,PH值范围也各不一样,所以广泛运用各大实验当中,添加缓冲剂之后可以改变实验中的酸碱性,这对实验能否成功起着至关重要的作用。其实生物缓冲剂在1996年之前,还没有被广泛使用,传统的缓冲液PH值不能有效缓冲高于PH7.5 因此设限于很多应用之中。
1996年Norman Good 博士研究出了两性离子缓冲剂,这些缓冲液可以有效地解决传统缓冲液中遇到的一些问题,因为此次研发的一些列生物缓冲液都比较接近我们的生理PH值,并且对细胞无毒、不会通过细胞膜吸收。其中HEPES和PBS是比较常用的两种缓冲剂。
HEPES缓冲剂与PBS缓冲剂的对比:
有效PH值范围
HEPES:6.8-8.2 PBS:5.8-8.0
对细胞的作用
HEPES:对细胞无毒性,在使用HEPES缓冲系统时,可以看到很大的细胞密度和活力。
PBS:对细胞无毒性, PBS 中稀释的细胞培养样品可能会无意中降低细胞活力。
与金属离子的关系
HEPES:不与金属离子产生络合物或沉淀物。
PBS:会与某些金属离子产生络合物或沉淀物。
冷冻条件下的变化
HEPES:溶液冷冻条件下不会对PH值产生变化。
PBS:溶液冷冻条件下会导致 pH 值发生明显变化。
基于上述几点不难看出,HEPES缓冲液对比PBS缓冲液,具有一定的优势,HEPES也是细胞培养缓冲剂中的不二之选,德晟生化是专业生产HEPES的厂家,2005年成立以来,一直致力于生物缓冲剂的研究,只为制造出高品质的产品,如有需要,欢迎随时前往我们的官网进行咨询!期待您的来信。
- HEPES缓冲液(7365-45-9)的这些特征
HEPES是两性离子有机化学缓冲剂,属于二十个 Good 的缓冲区之一,它不与金属离子结合,极易溶于水。经常被添加到细胞培养基中使用。虽然它对细胞没有营养,但是在细胞培养需要在 CO2 培养箱外进行长时间操作时,添加 10–25 mm HEPES 可提供额外的缓冲能力孵化器为细胞提供一个良好的PH环境。
HEPES 缓冲区具有以下特征:
HEPES 的 pKa 取决于温度:例如①在 25ºC:pKa= 7.48 ②在 37ºC:pKa= 7.31
在水溶液中有良好的溶解性,水溶液无色透明;
化学性质稳定,对生物没有毒性且对生物膜无明显的渗透作用:
对紫外波无特征吸收,在波长小于230-240nm时才有微弱的吸收,因而不干扰通常的光度法测量。
不易受温度、离子组成、浓度等因素影响解离度
HEPES除了在细胞培养基中的使用之外在其他生物研究中,也占有非常重要的地位,因为它不与金属离子结合,所以在很多金属离子研究中都可以使用它,它是三羟甲基氨基甲烷与磷酸盐的良好替代品。HEPES 也是电子显微镜中蛋白质沉积技术的常用缓冲液,因为它不会影响金属基材。经过评估并证明HEPES适合与两性化合物一起使用,为等电聚焦应用产生小于 1 个 pH 单位宽的 pH 梯度。在谷氨酸结合试验的推荐缓冲液中,HEPES也是作为shou选缓冲液,因为它可以防止与非受体材料结合。
德晟为专业生产生物缓冲剂的厂家,成立已有十多年,拥有十分丰富的研发生产经验与产品知识,可为客户提供大量技术支持与售后保障。秉着以德为本,以诚为先的经营理念。目前德晟生产的生物缓冲剂类产品有HEPES、MOPS、TRIS、TAPS 、 CAPS、 BICINE、 EPPS、 PEP等一系列生物缓冲液,如有需要欢迎随时联系我们!
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