【激光显微切割小课堂】激光显微切割实现高质量的RNA提取
徕卡显微系统(上海)贸易有限公司-
比较未经处理的天然小鼠脑组织以及经固定并染色的组织在使用紫外激光切片后的RNA质量
本文介绍了样品制备过程和紫外激光显微切片（UV LMD）对小鼠脑组织冷冻切片RNA质量的影响。为在提取RNA时获取良好的结果，从高品质组织开始并在处理前后检查RNA质量至关重要。RNA完整性指数（RIN）以1到10的等级标准来显示样品质量。简言之，RIN数值越高，RNA质量越高。这项研究结果表明，可以利用紫外激光显微切片技术，可以从单个组织细胞中获取品质稳定的RNA。
评估不同制备方法
对于小脑组织切片RNA质量的影响
由于自身的不稳定性，RNA通常比DNA更难处理。RNA并不具备DNA稳定的双螺旋结构。为了在处理RNA时保证优良品质，必须从优质材料开始，并在处理前后进行特别仔细的质量控制。所谓的RNA完整性指数（RIN）是RNA质量的指标[1]。根据1到10的评价标准，RIN值为1表示RNA已完全分解，RIN值为10则表示RNA完好无损。简言之，RIN数值越高，RNA质量越高。只要可能，应始终选用具有高RIN值的材料。
固定并染色样品制备方法的影响以及后续紫外激光显微切片对于小鼠脑组织切片（事后检查）的影响描述如下。将冷冻保存且未经处理的脑组织切片的RIN值与采用标准方案处理并分离的切片进行比较。图1显示了从冷冻切片到RIN分析的样品制备工作流程。
图1：小鼠脑组织从冷冻切片到激光显微切片再到RIN分析的样品处理流程。
冷冻切片，然后进行染色并固定
为了比较未经处理的组织样本与固定和染色的组织样本，使用3组已知RIN完整指数（RIN）的冷冻保存小鼠脑组织。在-80°C冷冻保存后，将它们转移到冷冻切片刀处，并在-35°C下孵育45分钟，然后将组织在-18°C下平衡30分钟，接着在-18°C下通过冷冻切片将其切成12µm的切片。小鼠脑组织切片分为两组，并按以下方式处理。一个是对照组，直接冷冻在-80°C，另一组则进行无RNase的紫外线处理PEN载玻片。这需要通过在室温下短暂解冻切片并在冷却至-20°C的75%乙醇溶液中固定2分钟来，然后，立即用几滴无菌过滤的甲酚紫(CV)染料溶液(含5%甲酚紫的纯乙醇溶液)并轻轻来回移动孵育45秒。
在染色过程中，染料溶液会短暂排除，载玻片浸入一系列浓度递增（75%、95%和100%）的乙醇溶液中，每次4秒钟，zuihou固定在100%的乙醇溶液中（试验组）。完成固定和染色程序之后，将载玻片在装有硅凝胶的干燥室中放置45分钟，然后保存在-80°C的干燥箱中，等待进行激光显微切片。
紫外激光显微切片
固定和染色之后，相关组织采用温和且无污染的紫外激光显微切片（UV LMD）进行分离[2]。这需要使用显微镜的10倍物镜对组织进行标记并分割成多个矩形，然后使用足够能量的激光束通过“Draw + Cut”（绘图切割）模式进行完全消融。切割物收集在0.5ml的无RNase盖帽中，以便对RNA内容进行提纯。这些会保存在–80°C的环境下，等待进行RNA分离。
RNA平行分离
两组样品，即保存在在 –80°C下未经处理的样品，以及经固定、染色和激光显微切片处理的样品，接受平行解冻并同时用相同的试剂处理。按照制造商的说明使用Qiagen的RNase Mini Kit®进行提纯。提纯的RNA使用30µl的无RNase水洗脱到新的无RNase试管中。
比较关系到RNA质量的RIN值
为了比较天然冷冻组织切片与经过CV染色、乙醇固定、激光显微切割的组织切片的RNA质量，将来自每个不同处理样品的RNA放入同一RNA纳米芯片（安捷伦生物分析仪）。RNA纳米芯片通过毛细管凝胶电泳分离RNA样品，并根据样品在芯片上的移动方式对样品质量进行分级。如前所述，RNA质量表示为RIN值，其中10表示完全完整的RNA，1表示完全分解的RNA。
此处进行的RIN分析（图2中的样品测量）表明，来自直接冷冻的天然组织的RNA样品的RIN值与根据UV-LMD标准方案处理的RNA样品的RIN值没有太大差异。RNA沉淀
紧接着将分离的RNA样品分成两组，每组中有一半的样品进行沉淀。在RNA沉淀后，根据参考文件3中提供的说明，来自天然冷冻组织的已沉淀样品的RNA的RIN值略低于来自经过CV染色、EtOH固定、UV-LMD处理的样品的RNA的RIN值[3]。这种差异可能来自沉淀混合物的poly-I，因为其中一些短链RNA分子在芯片中进行RIN测量时会被提纯并与其他RNA一起检测，并计入分解部分。在qPCR 反应中，poly-I没有产生负面影响。因此，经过固定、染色以及紫外激光显微切片的脑组织切片有没有进行RNA沉淀，都不会影响其质量。图2显示了未经处理的天然小鼠脑组织切片和经过固定并染色的小鼠脑组织切片在RNA质量方面的比较结果
图2：比较未经处理的天然小鼠脑组织切片和经固定并染色的小鼠脑组织切片的RNA质量：本例显示了从天然冷冻组织（天然）和经CV染色、EtOH固定和UV-LMD切片处理的相同小鼠脑组织中分离出的RNA样品，在RNA沉淀前后的虚拟RNA凝胶图（左）和安捷伦RNA芯片的相关电泳图（右）。电泳图来自荧光单位 (FU) 随着时间的推移（以秒[s]为单位）的结果[4，5]。
结 论
总而言之，实验表明使用所述方法进行紫外激光显微切割[2]，不会显著影响冷冻保存的脑组织的RNA质量。这种技术提供了一种合理的样品制备方法，并实现了单个细胞的非破坏性分离，从而获得质量一致的RNA。
相关产品
Leica LMD6 & LMD7激光显微切割
References：
1.A. Schroeder, O. Mueller, S. Stocker, R. Salowsky, M. Michael, M. Gassmann, S. Lightfoot, W. Menzel, M. Granzow, T. Ragg, The RIN: an RNA integrity number for assigning integrity values to RNA measurements, BMC Molecular Biology (2006) vol. 7, iss. 1, art. 3, DOI: 10.1186/1471-2199-7-3.
2.J. Gründemann, F. Schlaudraff, B. Liss, UV-Laser Microdissection and mRNA Expression Analysis of Individual Neurons from Postmortem Parkinson’s Disease Brains. In: Murray, G. (eds) Laser Capture Microdissection. Methods in Molecular Biology, vol. 755 (Humana Press, 2011), pp. 363-374, DOI: 10.1007/978-1-61779-163-5_30.
3.B. Liss, Improved quantitative real‐time RT–PCR for expression profiling of individual cells, Nucleic Acids Research (2002) vol. 30, iss. 17, e89, DOI: 10.1093/nar/gnf088.
4.Schlaudraff F, Gründemann J, Fauler M, Dragecivic E, Hardy J, and Liss B, Orchestrated increase of dopamine and PARK mRNAs but not miR-133b in dopamine neurons in Parkinson’s disease, Neurobiology of Aging (2014) vol. 35, iss. 10, pp. 2302-2315, DOI: 10.1016/j.neurobiolaging.2014.03.016.
5.Duda J, Fauler M, Gründemann J, Liss B, Cell-Specific RNA Quantification in Human SN DA Neurons from Heterogeneous Post-mortem Midbrain Samples by UV-Laser Microdissection and RT-qPCR, Methods Mol. Biol. (2018) vol. 1723, pp. 335-360, DOI: 10.1007/978-1-4939-7558-7_19.
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- 【激光显微切割小课堂】激光显微切割实现高质量的RNA提取
比较未经处理的天然小鼠脑组织以及经固定并染色的组织在使用紫外激光切片后的RNA质量
本文介绍了样品制备过程和紫外激光显微切片（UV LMD）对小鼠脑组织冷冻切片RNA质量的影响。为在提取RNA时获取良好的结果，从高品质组织开始并在处理前后检查RNA质量至关重要。RNA完整性指数（RIN）以1到10的等级标准来显示样品质量。简言之，RIN数值越高，RNA质量越高。这项研究结果表明，可以利用紫外激光显微切片技术，可以从单个组织细胞中获取品质稳定的RNA。
评估不同制备方法
对于小脑组织切片RNA质量的影响
由于自身的不稳定性，RNA通常比DNA更难处理。RNA并不具备DNA稳定的双螺旋结构。为了在处理RNA时保证优良品质，必须从优质材料开始，并在处理前后进行特别仔细的质量控制。所谓的RNA完整性指数（RIN）是RNA质量的指标[1]。根据1到10的评价标准，RIN值为1表示RNA已完全分解，RIN值为10则表示RNA完好无损。简言之，RIN数值越高，RNA质量越高。只要可能，应始终选用具有高RIN值的材料。
固定并染色样品制备方法的影响以及后续紫外激光显微切片对于小鼠脑组织切片（事后检查）的影响描述如下。将冷冻保存且未经处理的脑组织切片的RIN值与采用标准方案处理并分离的切片进行比较。图1显示了从冷冻切片到RIN分析的样品制备工作流程。
图1：小鼠脑组织从冷冻切片到激光显微切片再到RIN分析的样品处理流程。
冷冻切片，然后进行染色并固定
为了比较未经处理的组织样本与固定和染色的组织样本，使用3组已知RIN完整指数（RIN）的冷冻保存小鼠脑组织。在-80°C冷冻保存后，将它们转移到冷冻切片刀处，并在-35°C下孵育45分钟，然后将组织在-18°C下平衡30分钟，接着在-18°C下通过冷冻切片将其切成12µm的切片。小鼠脑组织切片分为两组，并按以下方式处理。一个是对照组，直接冷冻在-80°C，另一组则进行无RNase的紫外线处理PEN载玻片。这需要通过在室温下短暂解冻切片并在冷却至-20°C的75%乙醇溶液中固定2分钟来，然后，立即用几滴无菌过滤的甲酚紫(CV)染料溶液(含5%甲酚紫的纯乙醇溶液)并轻轻来回移动孵育45秒。
在染色过程中，染料溶液会短暂排除，载玻片浸入一系列浓度递增（75%、95%和100%）的乙醇溶液中，每次4秒钟，zuihou固定在100%的乙醇溶液中（试验组）。完成固定和染色程序之后，将载玻片在装有硅凝胶的干燥室中放置45分钟，然后保存在-80°C的干燥箱中，等待进行激光显微切片。
紫外激光显微切片
固定和染色之后，相关组织采用温和且无污染的紫外激光显微切片（UV LMD）进行分离[2]。这需要使用显微镜的10倍物镜对组织进行标记并分割成多个矩形，然后使用足够能量的激光束通过“Draw + Cut”（绘图切割）模式进行完全消融。切割物收集在0.5ml的无RNase盖帽中，以便对RNA内容进行提纯。这些会保存在–80°C的环境下，等待进行RNA分离。
RNA平行分离
两组样品，即保存在在 –80°C下未经处理的样品，以及经固定、染色和激光显微切片处理的样品，接受平行解冻并同时用相同的试剂处理。按照制造商的说明使用Qiagen的RNase Mini Kit®进行提纯。提纯的RNA使用30µl的无RNase水洗脱到新的无RNase试管中。
比较关系到RNA质量的RIN值
为了比较天然冷冻组织切片与经过CV染色、乙醇固定、激光显微切割的组织切片的RNA质量，将来自每个不同处理样品的RNA放入同一RNA纳米芯片（安捷伦生物分析仪）。RNA纳米芯片通过毛细管凝胶电泳分离RNA样品，并根据样品在芯片上的移动方式对样品质量进行分级。如前所述，RNA质量表示为RIN值，其中10表示完全完整的RNA，1表示完全分解的RNA。
此处进行的RIN分析（图2中的样品测量）表明，来自直接冷冻的天然组织的RNA样品的RIN值与根据UV-LMD标准方案处理的RNA样品的RIN值没有太大差异。RNA沉淀
紧接着将分离的RNA样品分成两组，每组中有一半的样品进行沉淀。在RNA沉淀后，根据参考文件3中提供的说明，来自天然冷冻组织的已沉淀样品的RNA的RIN值略低于来自经过CV染色、EtOH固定、UV-LMD处理的样品的RNA的RIN值[3]。这种差异可能来自沉淀混合物的poly-I，因为其中一些短链RNA分子在芯片中进行RIN测量时会被提纯并与其他RNA一起检测，并计入分解部分。在qPCR 反应中，poly-I没有产生负面影响。因此，经过固定、染色以及紫外激光显微切片的脑组织切片有没有进行RNA沉淀，都不会影响其质量。图2显示了未经处理的天然小鼠脑组织切片和经过固定并染色的小鼠脑组织切片在RNA质量方面的比较结果
图2：比较未经处理的天然小鼠脑组织切片和经固定并染色的小鼠脑组织切片的RNA质量：本例显示了从天然冷冻组织（天然）和经CV染色、EtOH固定和UV-LMD切片处理的相同小鼠脑组织中分离出的RNA样品，在RNA沉淀前后的虚拟RNA凝胶图（左）和安捷伦RNA芯片的相关电泳图（右）。电泳图来自荧光单位 (FU) 随着时间的推移（以秒[s]为单位）的结果[4，5]。
结 论
总而言之，实验表明使用所述方法进行紫外激光显微切割[2]，不会显著影响冷冻保存的脑组织的RNA质量。这种技术提供了一种合理的样品制备方法，并实现了单个细胞的非破坏性分离，从而获得质量一致的RNA。
相关产品
Leica LMD6 & LMD7激光显微切割
References：
1.A. Schroeder, O. Mueller, S. Stocker, R. Salowsky, M. Michael, M. Gassmann, S. Lightfoot, W. Menzel, M. Granzow, T. Ragg, The RIN: an RNA integrity number for assigning integrity values to RNA measurements, BMC Molecular Biology (2006) vol. 7, iss. 1, art. 3, DOI: 10.1186/1471-2199-7-3.
2.J. Gründemann, F. Schlaudraff, B. Liss, UV-Laser Microdissection and mRNA Expression Analysis of Individual Neurons from Postmortem Parkinson’s Disease Brains. In: Murray, G. (eds) Laser Capture Microdissection. Methods in Molecular Biology, vol. 755 (Humana Press, 2011), pp. 363-374, DOI: 10.1007/978-1-61779-163-5_30.
3.B. Liss, Improved quantitative real‐time RT–PCR for expression profiling of individual cells, Nucleic Acids Research (2002) vol. 30, iss. 17, e89, DOI: 10.1093/nar/gnf088.
4.Schlaudraff F, Gründemann J, Fauler M, Dragecivic E, Hardy J, and Liss B, Orchestrated increase of dopamine and PARK mRNAs but not miR-133b in dopamine neurons in Parkinson’s disease, Neurobiology of Aging (2014) vol. 35, iss. 10, pp. 2302-2315, DOI: 10.1016/j.neurobiolaging.2014.03.016.
5.Duda J, Fauler M, Gründemann J, Liss B, Cell-Specific RNA Quantification in Human SN DA Neurons from Heterogeneous Post-mortem Midbrain Samples by UV-Laser Microdissection and RT-qPCR, Methods Mol. Biol. (2018) vol. 1723, pp. 335-360, DOI: 10.1007/978-1-4939-7558-7_19.
- 什么是激光显微切割技术？
- 【激光显微切割小课堂】组织中的精密空间蛋白质组学信息
利用深层视觉蛋白质组学，结合激光显微切割、人工智能（AI）和质谱分析进行单细胞鉴别和细胞异质性研究。
尽管可使用基于成像和质谱的方法进行空间蛋白质组学研究，但是图像与单细胞分辨率蛋白丰度测量值的关联仍然是个巨大的挑战。最近引入的一种方法，深层视觉蛋白质组学（DVP），将细胞表型的人工智能图像分析与自动化的单细胞或单核激光显微切割及超高灵敏度的质谱分析结合在了一起。DVP在保留空间背景的同时，将蛋白丰度与复杂的细胞或亚细胞表型关联在一起。
阅读完整文章：
A. Mund, F. Coscia, A. Kriston, R. Hollandi, F. Kovács, A.-D. Brunner, E. Migh, L. Schweizer, A. Santos, M. Bzorek, S. Naimy, L.M.Rahbek-Gjerdrum, B. Dyring-Andersen, J. Bulkescher, C. Lukas, M.A. Eckert, E. Lengyel, C. Gnann, E. Lundberg, P. Horvath, M. Mann:深层视觉蛋白质组学定义单细胞的同一性和异质性《Nature Biotechnology》（2022年）第40卷，1231–1240页DOI：10.1038/s41587-022-01302-5
关于本文章
单独切除细胞培养物中的细胞核，使用已知且未表征蛋白定义的蛋白质组学谱对不同的细胞状态进行分类。在存档的原发性黑色素瘤组织中，DVP [1] 将空间分辨的蛋白质组变化鉴别为正常的黑色素细胞转化为完全侵袭性黑色素瘤，这揭示了随着肿瘤进展而以空间方式变化的路径，如转移性垂直生长中的mRNA剪接调节异常与干扰素信号和抗原呈递降低同时进行。DVP在组织背景中保留精密空间蛋白质组学信息的能力对临床样本分子表达谱具有一定的意义。
在本研究中，细胞或细胞核使用LMD7激光显微切割显微镜进行切割，该显微镜经过调整，适用于自动化的单细胞自动切割[1]。
图1：A) 输卵管上皮细胞激光显微切割前在LMD7软件中的轮廓对齐B) 激光显微切割后的截图。C) 单个输卵管上皮细胞激光显微切割后的384孔检查。
视频1：自动化LDM单细胞分离
References：
1.Automated Laser Microdissection for Proteome Analysis (Deep Visual Proteomics), Flyer, Leica Microsystems, 2022.
2.Rosenberger FA, Thielert M, Strauss MT, Ammar C, Mädler SC, Schweizer L, Metousis A, Skowronek P, Wahle M, Gote-Schniering J, Semenova A, Schiller HB, Rodriguez E, Nordmann TM, Mund A, Mann M: Spatial single-cell mass spectrometry defines zonation of the hepatocyte proteome, bioRxiv, 3. Dec 2022, doi: https://doi.org/10.1101/2022.12.03.518957
- 双光子显微切割系统带你领略硬组织切割的GX新玩法
- 硬组织的病理观测对于研究骨骼、牙齿等器官疾病的发展具有很重要的意义。但是硬组织由于其本身硬度大难以被传统的薄片切割机直接切割，因此在切割之前往往需要脱钙处理，使其软化以达到刀片所能够承受的硬度范围内进行切割。但是钙质作为骨骼和牙齿的组成部分，进行脱钙将不可避免的丢失所研究器官中的信息，尤其是在含钙量高的牙釉质等部位中。同时，钙在早期硬组织愈合如牙质修复、骨创伤愈合等过程中也起着重要作用。另外脱钙还不可避免的改变了硬组织的形貌，诸如厚度变化、褶皱、软硬组织分离等问题。因此寻找无需脱钙的切割方法对于研究硬组织研究是十分必要的。随着激光技术的发展，这一难题有望得到解决。对于刀片切割来说，受到刀片材料本身的限制，无法切割比刀片更硬的物体，但是这个困难在激光切割中并不存在 。然而激光切割也有其缺点：首先作为一种高能光束，其本身蕴含的能量较高容易灼伤物体表面，从而影响切割效果；另外受到激光在穿透物体时将不可避免的被所穿透物体中的组分散射，从而限制了激光切割的深度。近几年发展较为迅速的双光子聚焦技术给激光3D切割带来了新的可能。双光子切割具有如下优势：首先双光子能够穿透一定深度的样品，因此能够直接在物体内部进行切割，进而实现对组织深层区域的切割；其次双光子的聚焦点能够精 准控制，可实现以往切割设备不能实现的3D切割；另外双光子一般采用近红外激光作为激发光源，这类激光往往拥有Z 佳穿深并且对于蛋白的吸收较低，基本不会灼伤样品。Z 后双光子切割相比于传统打磨方法来说更为精 准，样品的损失更少。在制样上来说，双光子切割也十分的简单。根据目前文献上主要采用的方法可以总结为：首先使用甲醛固定，然后使用PMMA包埋，接下来使用双光子激光切割设备切割，经过简单打磨后，就可以染色压片了。这比起传统的硬组织切割步骤更为简单，制备时间更短。并且制备效果比传统方法更优。
双光子切割实际效果图精选
观察骨组织的修复过程
激光切割人体第四腰椎垂直切片前部。C. SEM; D. PLM; E. SEM + PLM。从图中可以清晰看到骨组织表面修复。观察基因缺陷对骨组织的影响
小鼠胫骨的SEM图像。A.Phospho1敲除（KO）的胫骨近端显示非矿化基质类骨；B. 胫骨骨干。白色箭头显示骨 髓内表面的骨样斑块。黑色箭头显示位于皮质血管的骨样区（向下至20-50 lm区域）的大小变化；C. 膝盖。致密纤维结缔组织骨膜位于白色箭头处；D.WT的对照关节。观察手术后的骨组织再生
节段性缺损愈合的组织形态学评价。a-d。Safranin Orange/von Kossa染色观测修复手术愈合效果的胫骨代表性图片，LA，外侧；ME，内侧；PR，近端；DI，远端，对侧钢板。e.手术后第 一周内采集的对照样本作标本图片。自体松质骨移植（ABG）对蜂巢的增强作用黑色（蓝色星）和支架ZX孔内明显的截骨术血肿（白色星）仍然可见。牙齿病理观测
大鼠牙本质切片观测 人牙齿切片观测
参考文献[1] Will, Fabian, and Heiko Richter. "Laser‐based Preparation of Biological Tissue: Femtosecond lasers speed up histological procedures in Medtech." Laser Technik Journal 12.5 (2015): 44-47[2] Kunert-Keil, Christiane, et al. "Histological comparison between laser microtome sections and ground specimens of implant-containing tissues." Annals of Anatomy-Anatomischer Anzeiger 222 (2019): 153-157.[3] Joner, Michael, et al. "Very late scaffold thrombosis: insights from optical coherence tomography and histopathology." EuroIntervention 13 (2018): e2169-e2173.[4] Will, Fabian G., et al. "Laser microtome: all optical preparation of thin tissue samples." Commercial and Biomedical Applications of Ultrafast Lasers VII. Vol. 6460. International Society for Optics and Photonics, 2007.[5] Ngezahayo, A., et al. "Intracellular manipulation of single cells using ultrashort laser pulses: mitochondria and cytoskeleton." EUROPEAN JOURNAL OF CELL BIOLOGY. Vol. 88.[6] Schwerk, Birthe, et al. "Comparison of two prototypes of a magnetically adjustable glaucoma implant in rabbits." PloS one 14.4 (2019): e0215316.
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LLS ROWIAK – Image Guided Laser Based Tissue and Material Processing
[报告简介]
近年来，再生医学领域飞速发展，分析组织结构或植入物--界面相互作用比以往任何时候更重要。在临床前研究设计中，虽然组织学分析非常必要，但是费时费力。尤其是硬组织样品或含有植入物的样品的制备非常具有挑战性。传统的磨片技术受厚度的限制，对样品损耗大。且在切片过程中，硬组织必须脱钙，也导致了生物信息的丢失。
可视化激光无损组织切片技术为再生医学中完整定量的进行组织学分析开辟了新的可能性。这项技术无须脱钙硬组织、非接触式激光切割，辅助OCT成像，真正实现了“可视化切割”。
利用可视化激光无损组织切片技术，可以胜任连续切片的未脱钙硬组织或移植组织样本。切后样本可以广泛的应用于免疫组化染色，TRAP染色，骨von Kossa染色。
除此之外，Tissue Surgeon集成的OCT成像技术，可以进行三维特定组织切片的进一步生化分析。例如，从原生组织中沿植入物界面切出的3D细胞簇进行的RNA分析显示，激光切割不会破坏组织的生化信息。基于Tissue Surgeon轻柔而快速的样本制备方法，科学家已经成功的证明了在骨--种植界面的TNF-α表达。
本次webinar将对Z新的技术——可视化激光无损组织切片技术研究进展做介绍，另外，对于该技术的样本制备和实验上机检测也将有详细讲解。欢迎参加。
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[主讲人 & 报告时间]
主讲人：Birgitta Stolze, PhD 报告时间：2020.06.05 14:00-15:00 生物学博士，曾于明斯特大学和汉诺威大学学习生物学。博士毕业后在汉诺威医学院血液学和肿瘤学专业从事科研工作，专攻骨 髓和白血病细胞与基质相互作用。1999年，开始了自己的商业生涯，从事健康和生命科学行业的变革管理咨询和过程分析的工作，并在生命科学初创公司的风险投资中担任项目经理。2008～2014年，任ROWIAK GmbH公司联席经理。2013年底，创立了LLS ROWIAK LaserLabSolutions GmbH，并担任CEO。 主讲人：Heiko Richter, PhD 报告时间：2020.06.05 14:00-15:00 激光显微切割和硬组织学专家，毕业于德国明斯特大学。博士期间，致力于以鹿牙齿硬组织作为生物标志物的组织学相关研究。博士毕业后，加入LLS ROWIAK LaserLabSolutions GmbH公司，担任应用科学家，在硬组织切割领域有着丰富的经验。
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路由器或切割锯通常会留下模糊或乳白色的边缘颜色，需要二次加工来实现火焰抛光。但是，激光束切割的亚
克力截面光滑且具有抛光效果，无需后续加工。
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割技巧，可以提高使用切割机切割厚亚克力的技巧。
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沪公网安备 31011502008050号
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