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单向免疫扩散试验有哪些影响因素

彩色羽翼wtz 2016-11-30 22:28:50 409  浏览
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  • 妮倪2 2016-12-01 20:40:35
    一、实验材料 2%离子琼脂或生理盐水琼脂(内含2%NaN3)。 标准马抗人 IgG 血清(抗体)(北京生物制品研究所生产) 工作标准参考蛋白(北京生物制品研究所生产) pH7.2 PBS 打孔器(孔径3 mm)及打孔模板 微量加样器 湿盒(容器内加湿纱布或泡沫塑料) 已制备好的含有 1%马抗人IgG 抗体的琼脂板 1/50 稀释的单人份待检血清标本 二、实验方法 1、标准曲线的制备 (1)按照玻片的大小,准备制做琼脂板所需要的1%离子琼脂。首先分装其1/2 量的2%盐水琼脂,例如,用普通载玻片制做时需1%离子琼脂4ml,在分装2%盐水琼脂时即为2 ml。溶化后置56°C~60°C 水浴中平衡温度备用。 (2)稀释抗体,用pH7.2 的PBS 稀释标准抗人IgG 抗体,终浓度为抗体效价的一倍。例如,血清效价为1/140,原浓血清即应按1/70 稀释。并分装试管,其分装量应与2%盐水琼脂量相等。 (3)制备琼脂板:将已稀释的抗人IgG 抗体于56°C 水浴中预热约半分钟,再倾注于已溶化并维持56°C~60°C 的2%盐水琼脂管中,用拇指将管口堵紧。翻转试管1-2 次,将抗体与琼脂混合均匀(注意:抗体与琼脂混合时切勿产生气泡),即刻倾注于玻片上,待凝固后即可。 (4)打孔:将琼脂板置于模板上,在同一直线上用打孔器打孔5 个,孔距10 mm。 (5)稀释不同浓度的标准参考蛋白(工作标准):应根据制品说明进行稀释,例如:工作标准中免疫球蛋白含量,IgG 为100 单位/ml,80.4 微克/单位,其稀释范围为1/10、1/20、1/40、1/80 及1/160。 (6)加样:将已稀释的不同浓度的工作标准蛋白依次用微量加样器每孔加入10 ul。(注意:每一稀释度均应更换塑料吸头)。 (7)将加样的琼脂板放湿盒中,置37°C 温箱,24 小时后观察结果。 (8)用量角规测量并记录沉淀环直径,然后以沉淀环直径为纵座标,以标准参考蛋白量(单位/ml)为横座标,绘制成标准曲线。 2. 人血清中 IgG 正常值的测定 (1)将已制备好的抗体琼脂板置打孔模板上,每一琼脂板可打孔4 个(孔径3 mm,孔距10 mm)。 (2)将单位正常人血清用pH7.2 PBS 分别作1/50 稀释。 (3)用微量加样器分别取1/50 稀释的单人份血清标本10 μl 加入孔中,每份标本应各加两孔。 (4)作好标记放湿盒中,置37°C 温箱,24 小时后观察结果。 三、实验结果 测量各份标本的沉淀环直径并记录结果,然后用标准曲线测出每份标本所含IgG 的量(U/ml,),并换算为mg/ml。 单向免疫扩散示意图 收起 注意事项 1. 在制做标准曲线时,为尽量减少误差,至少应做两份以上标准板。 2. 加样时,吸取每份标本均应更换塑料吸头。

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单向免疫扩散试验有哪些影响因素
 
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影响气相色谱仪试验因素——合理地清洗

气相色谱仪GC-9803

  气相色谱仪是实验室里常见的设备,严谨稳定的试验数据是仪器使用的基本要求,在此,广州标际跟大家讲讲气相色谱仪试验影响因素之一的清洗方面,我们知道就算再好的仪器也是需要正确合理的清洗方法的,下面就让我们一起来了解一下吧。

  1、仪器内部的吹扫、清洁气相色谱仪停机后,打开仪器的侧面和后面面板,用仪表空气或氮气对仪器内部灰尘进行吹扫,对积尘较多或不容易吹扫的地方用软毛刷配合处理。

  吹扫完成后,对仪器内部存在有机物污染的地方用水或有机溶剂进行擦洗,对水溶性有机物可以先用水进行擦拭,对不能彻底清洁的地方可以再用有机溶剂进行处理,对非水溶性或可能与水发生化学反应的有机物用不与之发生反应的有机溶剂进行清洁,如甲苯、丙酮、四氯化碳等。

  注意,在擦拭仪器过程中不能对仪器表面或其他部件造成腐蚀或二次污染。

  2、电路板的维护和清洁气相色谱仪准备检修前,切断仪器电源,首先用仪表空气或氮气对电路板和电路板插槽进行吹扫,吹扫时用软毛刷配合对电路板和插槽中灰尘较多的部分进行仔细清理。

  操作过程中尽量戴手套操作,防止静电或手上的汗渍等对电路板上的部分元件造成影响。

  吹扫工作完成后,应仔细观察电路板的使用情况,看印刷电路板或电子元件是否有明显被腐蚀现象。对电路板上沾染有机物的电子元件和印刷电路用脱脂棉蘸取酒精小心擦拭,电路板接口和插槽部分也要进行擦拭。

  3、进样口的清洗在检修时,对气相色谱仪进样口的玻璃衬管、分流平板,进样口的分流管线,EPC等部件分别进行清洗是十分必要的。

  玻璃衬管和分流平板的清洗:从仪器中小心取出玻璃衬管,用镊子或其他小工具小心移去衬管内的玻璃毛和其它杂质,移取过程不要划伤衬管表面。

  如果条件允许,可将初步清理过的玻璃衬管在有机溶剂中用超声波进行清洗,烘干后使用。也可以用丙酮、甲苯等有机溶剂直接清洗,清洗完成后经过干燥即可使用。

  4、FID检测器的清洗:FID检测器在使用中稳定性好,对使用要求相对较低,使用普遍,但在长时间使用过程中,容易出现检测器喷嘴和收集极积炭等问题,或有机物在喷嘴或收集极处沉积等情况。

  对FID积炭或有机物沉积等问题,可以先对检测器喷嘴和收集极用丙酮、甲苯、甲醇等有机溶剂进行清洗。当积炭较厚不能清洗干净的时候,可以对检测器积炭较厚的部分用细砂纸小心打磨。

  注意在打磨过程中不要对检测器造成损伤。初步打磨完成后,对污染部分进一步用软布进行擦拭,再用有机溶剂之后进行清洗,一般即可消除。


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日晒色牢度有哪些影响因素

  想必很多人都知道,日晒色牢度也可称之为光照色牢度,它是指纺织品经过染色或印花后,当其在阳光或灯光的作用下,纺织品的颜色受日光作用变色的程度。染料中的化学键发生改变甚至断裂的程度,使得染料中发色基团和助色基团的结构遭到破坏,从而失去颜色;也可能在紫外线的照射下,染料的立体结构发生改变,致使颜色发生变化,表现出来就是色变,针对某一染料的耐日光色变的程度,即是染料的日晒牢度,又称耐日晒牢度。那么,日晒色牢度有哪些影响因素?下面,上海千实就为大家带来相关的介绍说明。


  (1)与染料结构有关。一般来说蒽醌类染料酞菁染料硫化中硫化元硫化蓝及金属络合染料的日晒牢度都比较好.大多数不溶性偶氮染料的日晒牢度也比较高而连苯胺型的偶氮的日晒牢度低,三芳甲烷都不耐晒。


  (2)与纤维种类有关。同一种染料在不同纤维上的日晒牢度也有着很大的差异.如靛蓝在羊毛上能耐晒而在纤维素上的日晒牢度却很低.又如:凡拉明蓝盐B在粘胶上的日晒牢度要比在棉上高的多。


  (3)与染料浓度有关。同一种染料在同一种品种的纤维上日晒牢度随染料浓度的变化而变化,一般浓度低的比浓度高的牢度差,这种情况在偶氮染料上表现尤为明显。


  (4)与外界条件的影响有关。空气含湿量的高低气温的高低对日晒牢度影响也很大.一般在含湿高的情况下日晒牢度较低.如:凡拉明蓝在南方比在北方地区容易泛红褪色。


  (5)与助剂有关。如:现在有很多的助剂可以有效改善日晒牢度。


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影响运动粘度测定的因素主要有哪些

  (1)计量器具的因素: 
  1.1秒表 
  秒表用于测定样品流经粘度计的时间,若秒表不够精密,有可能引起试验误差。因此,对于所用秒表,一定要定期检定。 
  1.2粘度计的系数 
  毛细管粘度计必须定期进行校准,否则将引起较大的误差。 
  (2)试验操作的因素 
  2.1粘度测定过程中试验浴槽的温度准确性 
  测定运动粘度时要严格按规定恒温试验,这是测定样品运动粘度的重要条件之一。在GB/T 10247-2008中规定,恒温浴的控温精度必须达到±0.1ºC,而卓祥HTC高精度浴槽的控温精度则为±0.01ºC。因为样品的粘度随温度升高而减小,随温度下降而升高,测定时必须严格按规定恒温,微小的温度偏差都会使粘度测定结果产生较大的误差。 
  2.2粘度测定过程中样品流经粘度计的时间 
  试样的流动时间必须在规定的范围。GB/T 10247-2008规定,乌氏粘度计的最细内径的流动时间不得小于300S。主要是为了保证样品在粘度计中的流动为层流。
  2.3 粘度测定过程中的其他影响因素 
  测定样品粘度时,乌氏粘度计中的样品不能有气泡。若样品中有气泡会影响装样体积,同时进入毛细管后会形成气塞,使样品的流动阻力增大,测定结果偏高。 
  测试样品中含有杂质、水分及毛细管粘度计未洗净,也会影响试样品在毛细管粘度计中正常流动,使结果偏高。粘度计中洗涤用的溶剂没有干燥,会稀释样品使结果偏低。


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