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数字PCR技术让DNA定量更JZ

艾普拜生物科技(苏州)有限公司 2020-09-07 15:34:23 509  浏览
  • 数字PCR  

    先进的数字PCR技术实现了样品中的单分子核酸扩增,从而使的DNA定量的jingzhun度提高到了全新水平。Philip与Stilla Technologies的执行官兼联合创始人Rémi Dangla进行了交流,讨论了数字PCR技术领域的进展和挑战。  Stilla Technologies公司总部位于法国巴黎,成立于2013年,生产和销售高jingzhun度的DNA定量和检测的数字PCR系统。  

    “当我创立公司时,从未做过PCR,”Dangla说。 “但我了解了数字PCR技术之后,马上就被这个设计巧妙的技术所吸引。”  与之前的PCR技术相比,数字PCR是可以显著提高DNA定量的jingzhun度的一种新技术。  

    “数字PCR技术为PCR技术在检测稀有突变或低浓度靶标基因方面的应用,赋予了无与伦比的数据可靠性”Dangla说。  数字PCR反应,不是传统式的混好PCR mix后直接扩增,而是将样品被分散到数万个微小的液滴后,进行PCR反应。科学家们设计特异性的探针,只识别与序列相对应的靶标基因,产生荧光信号,数字PCR系统自动数出含有阳性信号的微滴。  

    “这样的技术可以从100,000个野生型DNA分子中检测出一个突变分子,甚至是突变体只发生单碱基改变,也能被检测到。在使用之前的PCR技术进行这种实验分析时,得到的结果是错误的。”Dangla说。  实际上很早就有人提出了数字PCR的想法,“文献可追溯到90年代初”Dangla说。  当时的困难在于如何实现同时分析这么小的体积、且数量这么多的微滴。Dangla找到了解决这个困难的方法,将微流控技术和芯片技术结合,一定程度的简化了微滴的生成和分析。  Dangla认为数字PCR技术具有潜力的应用之一是只需少量血液样品即可进行癌症诊断,也就是液体活检技术。  “在尝试使用血液样本,进行血液样本中的ctDNA检测时,就类似大海捞针,”他解释道。 “数字PCR技术是可以检测血液中的ctDNA分子并获得可靠结果的解决方案。”  例如,数字PCR特别有助于检测癌细胞对ZL中产生耐药性的突变,从而指导医生用药,更换治LX果更好的其他药物。 

     数字PCR技术的潜在应用方向吸引了许多参与者进入日益增长的数字PCR市场,从2011年到现在增长数百万欧元。Fluidigm公司,它于2006年发布了一款产品,Bio-Rad现在以更低的价格占有ZD市场份额。 Stilla Technologies公司的目标是实现市场上简单,快速的数字PCR技术,目前在这一领域已占有重要位置。  但仍然需要克服一些挑战,其中之一就是定价。 

    Dangla说数字PCR不可能完全取代前几代PCR技术。到目前为止,数字PCR价格偏贵,仅被用于更具意义的应用中。  随着技术的发展,成本问题即可解决,Dangla认为在DNA定量方便有个重要的但是被忽视了就是样品制备。本质上讲,就是数字分析前的DNA提取步骤。  “我们现在知道有关患者的所有信息都存在于含有一些稀有的生物标记物的10mL血液中。 现在的困难不是在分析系统中找到这些生物标记物;  DNA分子在芯片中,那就会被找到,会被检测到”Dangla说。  “困难在于如何在10mL中提取到DNA分子,并确保在20μL体系中能够检测和分析到。 这是一个取样问题。“  随着上个月的首次融资活动结束,Stilla正在考虑扩大其数字PCR系统的销售,并将开展Naica数字PCR系统在临床的应用,首先将从实现癌症患者液体活检样本的分析开始。  除肿瘤领域的应用外,数字PCR还应用在很多其它领域中,如转基因检测,制药公司的质量控制、伴随诊断等。随着数字PCR技术变得越来越jingque,和成本的降低,这项DNA定量的新生技术将会越来越广泛。

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数字PCR技术让DNA定量更JZ

数字PCR  

先进的数字PCR技术实现了样品中的单分子核酸扩增,从而使的DNA定量的jingzhun度提高到了全新水平。Philip与Stilla Technologies的执行官兼联合创始人Rémi Dangla进行了交流,讨论了数字PCR技术领域的进展和挑战。  Stilla Technologies公司总部位于法国巴黎,成立于2013年,生产和销售高jingzhun度的DNA定量和检测的数字PCR系统。  

“当我创立公司时,从未做过PCR,”Dangla说。 “但我了解了数字PCR技术之后,马上就被这个设计巧妙的技术所吸引。”  与之前的PCR技术相比,数字PCR是可以显著提高DNA定量的jingzhun度的一种新技术。  

“数字PCR技术为PCR技术在检测稀有突变或低浓度靶标基因方面的应用,赋予了无与伦比的数据可靠性”Dangla说。  数字PCR反应,不是传统式的混好PCR mix后直接扩增,而是将样品被分散到数万个微小的液滴后,进行PCR反应。科学家们设计特异性的探针,只识别与序列相对应的靶标基因,产生荧光信号,数字PCR系统自动数出含有阳性信号的微滴。  

“这样的技术可以从100,000个野生型DNA分子中检测出一个突变分子,甚至是突变体只发生单碱基改变,也能被检测到。在使用之前的PCR技术进行这种实验分析时,得到的结果是错误的。”Dangla说。  实际上很早就有人提出了数字PCR的想法,“文献可追溯到90年代初”Dangla说。  当时的困难在于如何实现同时分析这么小的体积、且数量这么多的微滴。Dangla找到了解决这个困难的方法,将微流控技术和芯片技术结合,一定程度的简化了微滴的生成和分析。  Dangla认为数字PCR技术具有潜力的应用之一是只需少量血液样品即可进行癌症诊断,也就是液体活检技术。  “在尝试使用血液样本,进行血液样本中的ctDNA检测时,就类似大海捞针,”他解释道。 “数字PCR技术是可以检测血液中的ctDNA分子并获得可靠结果的解决方案。”  例如,数字PCR特别有助于检测癌细胞对ZL中产生耐药性的突变,从而指导医生用药,更换治LX果更好的其他药物。 

 数字PCR技术的潜在应用方向吸引了许多参与者进入日益增长的数字PCR市场,从2011年到现在增长数百万欧元。Fluidigm公司,它于2006年发布了一款产品,Bio-Rad现在以更低的价格占有ZD市场份额。 Stilla Technologies公司的目标是实现市场上简单,快速的数字PCR技术,目前在这一领域已占有重要位置。  但仍然需要克服一些挑战,其中之一就是定价。 

Dangla说数字PCR不可能完全取代前几代PCR技术。到目前为止,数字PCR价格偏贵,仅被用于更具意义的应用中。  随着技术的发展,成本问题即可解决,Dangla认为在DNA定量方便有个重要的但是被忽视了就是样品制备。本质上讲,就是数字分析前的DNA提取步骤。  “我们现在知道有关患者的所有信息都存在于含有一些稀有的生物标记物的10mL血液中。 现在的困难不是在分析系统中找到这些生物标记物;  DNA分子在芯片中,那就会被找到,会被检测到”Dangla说。  “困难在于如何在10mL中提取到DNA分子,并确保在20μL体系中能够检测和分析到。 这是一个取样问题。“  随着上个月的首次融资活动结束,Stilla正在考虑扩大其数字PCR系统的销售,并将开展Naica数字PCR系统在临床的应用,首先将从实现癌症患者液体活检样本的分析开始。  除肿瘤领域的应用外,数字PCR还应用在很多其它领域中,如转基因检测,制药公司的质量控制、伴随诊断等。随着数字PCR技术变得越来越jingque,和成本的降低,这项DNA定量的新生技术将会越来越广泛。

2020-09-07 15:34:23 509 0
新品首发 | 让手动切片更精准,让自动进样更高效

纯手动石蜡切片机采用机械式进样,长此以往会造成切片机内部硬件的摩擦损耗,在切片厚度上可带来肉眼可辨的差异,从而影响切片质量,导致阅片诊断不准确。但在日常切片工作中,因手动切片的高效率,让手动操作的习惯在技术老师们心中根深蒂固,因此一台既能保证精准进样、又能不改变技术老师们操作习惯的石蜡切片机,在业界呼声越来越高。


瑞沃德,以匠心智造国产切片机。肩负着重新定义国产高品质切片机的光荣使命,新款S710石蜡切片机应运而生


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S710石蜡切片机,是瑞沃德继S700系列石蜡切片机后的第三个型号。其最大的升级及优势就是采用电机进样保证进样的精准度,保留小手轮进样操作满足技术老师们的手动切片操作习惯,支持外扩独立控制盒(即将上市),满足多种操作进样需求。让手动切片更精准,让自动进样更高效。



当然,这款切片机依然兼具精准、安全、高效等优势。


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  • 0.5μm的最小切片精度,电机进样,保证进样精度。

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2、精密刀架

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  • 刀架底座有刻度,便于刀架定位。


  二、安全:   


1、手轮双锁定系统

同时配备手轮锁和任意位置锁,双锁定系统且自带提示音,在样品块更换操作中显著降低手部受伤风险让您安心更换样本。

2、手轮任意位置平衡

手轮可在任意位置停住,使用更安心。

3、护刀和退刀装置

护刀器覆盖刀锋全长,避免操作过程中潜在的受伤风险。更换刀片时,退刀器轻松推出刀片,安全取出刀片。


  三、高效:   

1、快速定位

               

  • 专利可视化指针标识,角度调整数据直观可视。调节不同倾斜面组织角度时,精准控制样本头方向,避免组织样本浪费。

  • 快速将多台设备调整为相同角度,使同一样本在不同设备切片时保持同一角度,减少因粗修导致的样本浪费。


2、操作便捷

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  • 任意位置扭矩低于2.5 kgf·cm,运转轻松,整天使用不费力。


3、清理便捷

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  • 抗静电废屑盘,不沾蜡,易清洁,清洁时间大大缩短。


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(该图片仅为展示功能特别设置)

5英寸触摸屏,具备历史记录系统,便于信息回溯追踪,快速解决问题。



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2022-06-29 09:03:35 169 0
科技让生活更美好

新郑市科技局为了贯彻执行党和国家有关科技发展的方针政策和法规, 组织制定全市科技发展和科技促进经济,社会发展的政策措施,编制全市科技发展中长期规划和年度计划,并组织实施。为了更好的推进科技改变生活,我公司与新郑科技局共同打造科技展览ZX。新郑科技局邀请我公司在科技展览ZX免费展览公司的设备,面向市领导及社会各界人士参观指导。

我公司于2018年5月19号在新郑市创新创业园区将我公司代表性设备展出,供社会各界人士莅临指导,整个展览ZX位于新郑龙湖高新园区内。

我公司以科技创新为主,服务社会为宗旨,积极研究开发新产品,奉献于教育和科学,经过长期的研发和不断地技术积累,拥有热工,制造,控制相关技术ZL30余项,为化学,物理,材料,电子,高分子工程,新材料制备和研发领域的科学研究提供了精良设备。公司通过和美国诺巴迪强强联合,形成了有效的信息,技术交流平台,为诺巴迪国际化发展提供了强有力的支持!

    目前我公司已研发生产产品16个系列138款产品,产品囊括管式炉、真空炉、升降炉、快速退火炉(RTP)、箱式炉、浇筑炉、旋转炉等,主要适用于科研院校及工矿企业在新材料、新能源等领域物理特性及化学特性的研究,远销与欧美及东亚地区,多款设备取得了欧盟CE认证。

   公司与国内高校,科研院所有多层次的合作关系,建有开放实验室,相关领域的教授、高级工程师、博士参与公司产品的研究和开发。我们秉承公司的发展理念,依靠严谨的技术研发能力,科学合理的生产工艺,精益求精的制造要求,全心全意做好产品质量和服务工作,我们诺巴迪人时刻怀着一颗真诚的心期待与您的合作。


2020-01-19 13:36:16 185 0
关于乙肝病毒DNA定量检测
患者信息:男29岁四川成都病情描述(发病时间、主要症状等):结果为:4.92E3(IU/ML),参考值/区间:小于1.0E3,检验方法:荧光探针法.请问这样是否代表病毒正在高复制过程中?是否需要吃药治... 患者信息:男 29岁 四川 成都 病情描述(发病时间、主要症状等): 结果为:4.92 E3(IU/ML),参考值/区间:小于1.0E3,检验方法:荧光探针法.请问这样是否代表病毒正在高复制过程中?是否需要吃药ZL呢?另外总蛋白(TP):89(G/L),球蛋白:40.9(G/L),是否代表肝功能不正常?谢谢解答!是否需要吃药ZL呢?另外总蛋白(TP):89(G/L),球蛋白:40.9(G/L),是否代表肝功能不正常?谢谢解答! 展开
2012-02-23 13:55:26 537 3
进行pcr技术扩增dna,一般进行多少个循环
 
2015-11-02 08:55:56 1297 1
化学发光与elisa哪个定量更准确
 
2017-04-18 16:00:38 704 3
比较pcr技术和dna分子杂交技术的异同
 
2018-12-13 12:02:53 548 0
HPV(DNA扩增定量0.56什么意思?
HPV(DNA扩增定量0.56什么意思?
2016-06-17 05:08:43 353 1
Gene-π数字PCR技术训练营2020开年diyi站—上海张江

数字PCR技术的诞生和发展为核酸jing准定量与基因检测提供了全新的思路,可实现单细胞/单分子层面的定量。目前,该技术已经在肿瘤个体化诊疗、基因编辑、液体活检、病原微生物、标准品定值的检测等前沿生命科学研究、临床医学检验、药物研发等多个领域实现突破性应用和发展。

数字PCR通过泊松分布校正得到目标基因的拷贝数,可以提供比qPCR更jing准的核酸定量,无需标准品,并具有灵敏度好、精确度高、耐受YZ剂能力强等优点。该技术是目前Z适合用于体液样品(如血液、尿液、粪便、痰液、胸腹水、脑脊液等)中痕量核酸标记物检测的方法。

为更好地让广大学者了解数字PCR技术,Gene-π数字PCR技术训练营——核酸定量分析及应用”将于2020年02月29日在上海张江召开。本期训练营由上海市浦东新区生物产业行业协会、转化医学网、艾普拜生物科技(苏州)有限公司、北京深蓝云生物科技有限公司主办。聚焦于数字PCR原理、实验操作、应用进展、结果分析、质量控制、标准品定量等核心内容,训练营将携中外知名学者、ZS技术专家,为广大学员带来从理论到实战、从入门到精通的饕餮盛宴。

主办单位

上海市浦东新区生物产业行业协会

转化医学网

艾普拜生物科技(苏州)有限公司

北京深蓝云生物科技有限公司

培训安排

时间:2020年02月29日

地点:张江·ZG药谷生物医药创新交流ZX

培训日程


报名方式

如果您心动了就赶紧动动手指报名吧!可以通过扫描下方二维码.

我们的初衷是--真诚地把先进的科研技术带给大家!

所以,本次培训活动完全免费!!!不收取任何费用! 

提交报名申请,经主办方审核通过后,收到报名成功确认邮件后,就可以参加我们的培训班啦~

因场地有限,本次开放50个名额。


注:活动Z终解释权归艾普拜生物科技(苏州)有限公司所有


2020-01-17 20:34:16 240 0
选对帮“帮手” 让工作更轻松

    工作中会遇到各种各样的问题,选择优秀的合作伙伴会事半功倍。

北京阿尔泰科技推出的一款工业级测控机箱PXIeC-7309会是您工作中的好帮手:

PXIeC-7309是一款9槽PXI Express机箱,兼容PXI Express和CPCI Express规范,提供1个系统定时插槽,并为需要更高带宽的多种测试和测量应用提供了6个混合外设插槽。混合外设插槽内可以安装CompactPCI、PXI、CompactPCI Express和PXI Express模块,从而提供了更大的灵活性。

PXIeC-7309内置Four-Link的PXI Express背板,系统带宽支持高达8GB/s,hybrid设备槽2/3及system timing槽具有2GB/s的带宽,hybrid设备槽4/6/7/8有带宽500MB/s的带宽。采用了智能系统监控控制器,可以监控全部机箱状态(包括风扇转速、系统电压和内部温度等);配有工业级交流电源,可在55℃以下输出400W的功率,并且通过机箱背部的2个120mm冷却风扇提高冷却能力,后面板上有两个BNC接头,用于10MHz时钟输入/输出。

 


2023-08-21 10:16:13 58 0
如何让多肽芯片制备更高效?

如何让多肽芯片制备更高效?

多肽芯片的制备原理?多肽芯片是将已知的蛋白序列或任意设计的氨基酸序列分解成包含重叠氨基酸的多肽片段,将这些多肽片段按一定次序固定在经特殊处理过的载体基质上,每张芯片包含成千上万甚至更多的肽链。将待测物与芯片反应,经过免疫检测技术发现与待测物有结合反应的位点/域,经过图像数据处理与分析,寻找蛋白质/氨基酸与待测物的结合部位。

 

多肽芯片技术具备高通量,稳定可靠,灵活多样的特点。多肽芯片上承载大量的多肽片段,可快速、有效的找到相应结合位点/域;多肽芯片上固载的多肽片段包含蛋白全序列,相对于原大分子蛋白质而言更稳定,不易分解失活,采集的数据更为准确;多肽片段可不局限于已知的蛋白结构,构成多肽分子的氨基酸可以是进行过化学修饰的非天然氨基酸,在药物研发和筛选方面具有很强的灵活性;

 

Aurora多肽芯片点样仪让多肽芯片制备更高效!

Aurora集团30年来致力于制造生物医药领域自动化高通量设备。Aurora多肽芯片点样仪采用化学固相合成法,可按需制备稳定的多肽微阵列芯片,如新冠病毒原始毒株及其突变体奥密克戎S蛋白、N蛋白的微阵列芯片,更多产品详情可进一步了解产品价格或技术参数等信息,请发邮件至market@aurorabiomed.com.cn或直接联系Aurora销售人员。

【内容源自Aurorabiomed公众号《多肽芯片为什么那么火?》,转载请注明


2022-05-11 09:13:15 172 0
怎样让熨斗熨衣服更平
 
2014-04-25 06:33:55 300 1
为什么有了PCR技术还要用大肠杆菌做DNA扩增
 
2018-12-09 18:14:25 196 0
基于Naica数字PCR技术解析Favipiravir药物抗B型流感病毒

病毒性肺炎(viral pneumonia)是由病毒侵犯肺实质细胞而造成的肺部炎症,常由上呼吸道病毒感染向下蔓延引起。随着呼吸道病毒检测技术的进步,病毒性肺炎的发病率和死亡率逐渐得到认识,研究人员发现流感病毒感染占病毒性肺炎患者的大多数。流感病毒是季节性流感和偶发性流感大流行的病原体。世卫组织估计,流行病每年导致约300-500万严重病例,约有29万-65万人死于呼吸道疾病。目前流行的季节性流感病毒包括A型的H1N1和H3N2以及B型。已有报道指出,平均每个季节由B型流感病毒引起的病例占流感相关死亡的29%,而在B型流感高发期,这一比例高达95%。



目前,ZL流感病毒感染的药物主要有两种,分别是M2离子通道阻滞剂(金刚烷胺、金刚乙胺)和神经氨酸酶YZ剂NAIs(奥司他韦、扎那米韦、帕拉米韦和拉尼米韦)。由于广泛耐药的出现和对B型流感病毒缺乏LX,M2离子通道阻滞剂不再推荐使用;因此,NAIs成为抗病毒的药物的主要类别。然而,耐NAIs突变体的出现仍会降低其LX。因此,对耐NAIs突变体的研究变得至关重要。


近日,ZG疾病预防控制ZX病毒病预防控制所国家流感ZX(世界卫生组织流感参比和研究合作ZX)等联合在《Virology》发表了名为Effectiveness of favipiravir (T-705) against wild-type and oseltamivir-resistant influenza B virus in mice的文章。Favipiravir法维吡韦也称为T-705,靶向流感病毒的RNA依赖的RNA聚合酶RdRp,可YZA,B和C型流感病毒,包括耐奥司他韦的菌株。该研究在其基础上检测了T-705对耐奥司他韦B型流感的功效。



在这项研究中,研究人员使用致死小鼠模型评估了T-705对野生型和耐奥司他韦的乙型流感病毒的影响。此外还评估了体内药物ZL后是否发生了诱导对T-705敏感性降低的突变。结果显示T-705以剂量依赖的方式保护小鼠免于致命感染。T-705还能显著降低病毒载量和YZ肺病理学。此外,表型分析显示T-705耐药病毒在T-705处理后没有出现,即T-705可以有效地保护小鼠免受野生型和对奥司他韦具有耐药性的B型流感病毒的致命感染。



文中使用Naica Crystal Digital PCR系统评估了T-705对野生型和耐奥司他韦的小鼠呼吸道病毒载量的影响,具体为测定了小鼠肺部、鼻甲骨、气管(对应下面两幅图的C/E/F)中流感病毒的非结构蛋白1 (NS1)基因拷贝数。



法国Stilla Technologies Naica数字PCR平台是实现DNA/RNA定量的技术工具,自动生成和组装单层平铺的微滴,进行单分子PCR扩增,通过高分辨率的三色荧光通道检测,自动QC质控,识别三色荧光中有效的阴阳性微滴,从而达到目的DNA/RNA的定量检测。同时提供原始数据、单微滴追溯等功能,确保数据真实可靠。

◐ 只需一步加样操作,无需标准品和标准曲线是真正的定量系统。通过对模板的有限稀释,耐受YZ剂能力强,更有利于临床、环境等复杂样本的检测。

◐ 有效微滴:25000~30000/样本,实现低浓度、低丰度的核酸样本进行准确定量。

◐ 封闭式芯片设计,样本间独立,避免了加样交叉污染风险,同时防止扩增后的气溶胶污染,保证结果安全可靠和实验环境安全。


2020-03-19 10:00:13 345 0
请教用流式细胞仪进行DNA精确定量
本人没用过流式细胞仪 想请问下该设备能用于DNA的精确定量么 DNA不是细胞内的 而是已经从组织里提出来的
2011-02-23 18:27:12 385 1
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2015-09-15 21:59:17 536 1
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2015-05-28 22:44:13 272 1
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2017-12-16 08:19:41 461 1
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2018-12-05 13:07:56 404 0

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