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  红尘孤患 2007-01-11 00:00:00

  不知道什么意思

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  Vie嗯呐 2016-07-18 21:44:21

  维生素C测定就是对维生素C的测定。在测定维生素C的国标方法中，荧光法为测定食物中维生素C含量的diyi标准方法，2、4－二硝基苯肼法作为第二法。 1 适用范围 本标准适用于果品、蔬菜及其加工制品中还原型抗坏血酸的测定(不含二价铁、二价 锡、一价铜、二氧化硫、亚硫酸盐或硫代硫酸盐)，不适用于深色样品。 2 测定原理 染料2，6－二氯靛酚的颜色反应表现两种特性，一是取决于其氧化还原状态，氧化态 为深蓝色，还原态变为无色;二是受其介质的酸度影响，在碱性溶液中呈深蓝色，在酸性介 质中呈浅红色。 用蓝色的碱性染料标准溶液，对含维生素 C的酸性浸出液进行氧化还原滴定，染料被 还原为无色，当到达滴定终点时，多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色，由染料用量 计算样品中还原型抗坏血酸的含量。 3 仪器设备 a. 高速组织捣碎机:8000～12000r/min。 b. 分析天平。 c. 滴定管:25ml、10ml。 d. 容量瓶:100ml。 e. 锥形瓶:100ml、50ml。 f. 吸管:10ml、5ml、2ml、1ml。 g. 烧杯:250ml、50ml。 h. 漏斗。 4 试剂(凡未加说明者均为分析纯) 4.1 浸提剂 4.1.1 偏磷酸:2%溶液(W/V)* ， 4.1.2 草酸:2%溶液(W/V)。 4.2 抗坏血酸标准溶液(1mg/ml):称取 100mg(准确至 0.1mg)抗坏血酸**，溶于浸提剂 中并稀至100ml。现配现用。 —————————— * 偏磷酸不稳定，切勿加热。 ** 一般抗坏血酸纯度为99.5%以上，可不标定。如试剂发黄，则弃去不用。若要检查其 纯度，可按附录B方法标定。 4.3 2，6－二氯靛酚(2，6－二氯靛酚吲哚酚钠盐)溶液:称取碳酸氢钠 52mg溶解在200ml 热蒸馏水中，然后称取 2，6－二氯靛酚 50mg溶解在上述碳酸氢钠溶液中。冷却定容至 250ml，过滤至棕色瓶内，保存在冰箱中。每次使用前，用标准抗坏血酸标定其滴定度。即 吸取1ml抗坏血酸标准溶液于50ml锥形瓶中，加入10ml浸提剂，摇匀，用2 ，6－二氯靛酚溶 液滴定至溶液呈粉红色15s不褪色为止。同时，另取 10ml浸提剂做空白试验。 滴定度按式(1)计算: C·V 滴定度 T(mg/ml)＝—————………………………… (1) V1－V2 式中: T——每毫升2，6－二氯靛酚溶液相当于抗坏血酸的毫克数; C——抗坏血酸的浓度，mg/ml; V——吸取抗坏血酸的体积， ml; V1——滴定抗坏血酸溶液所用 2，6－二氯靛酚溶液的体积，ml; V2——滴定空白所用2，6－二氯靛酚溶液的体积，ml。 4.4 白陶土(或称高岭土)，对维生素C无吸附性。 5 测定步骤 5.1 样液制备:称取具有代表性样品的可食部分100g，放入组织捣碎机中，加 100ml浸 提剂，迅速捣成匀浆。称 10～40g浆状样品，用浸提剂将样品移入 100ml容量瓶，并稀释 至刻度，摇匀过滤。若滤液有色，可按每克样品加 0.4g白陶土脱色后再过滤。 5.2 滴定:吸取10ml滤液放入50ml锥形瓶中，用已标定过的 2，6－二氯靛酚溶液滴定， 直至溶液呈粉红色 15s不褪色为止。同时做空白试验。 6 结果计算 6.1 计算公式: 维生素 C按式(2)计算: (V－V0)·T·A 维生素C(mg/100g)＝————————-×100 …………………(2) W 式中: V——滴定样液时消耗染料溶液的体积，ml; V0——滴定空白时消耗染料溶液的体积，ml; T——2，6－二氯靛酚染料滴定度，mg/ml; A——稀释倍数; W——样品重量，g。 6.2 平行测定的结果，用算术平均值表示，取三位有效数字，含量低的保留小数点后两 位数字。 6.3 平行测定结果的相对相差，在维生素C含量大于 20mg/100g时，不得超过 2%，小于 20mg/100g时，不得超过 5%。 附 录 A 二甲苯－二氯靛酚比色法 (补充法) A.1 适用范围 测定深色样品中还原型抗坏血酸。 A.2 测定原理 用定量的 2，6－二氯靛酚染料与试样中的维生素 C进行氧化还原反应，多余的染料 在酸性环境中呈红色，用二甲苯萃取后比色，在一定范围内，吸光度与染料浓度呈线性相 关，收剩余染料浓度用差减法计算维生素 C含量。 A.3 仪器设备 A.3.1 分光光度计或比色计。 A.3.2 具塞试管:50ml。 A.4 试剂(皆为分析纯) A.4.1 偏磷酸:2%溶液(W/V)。 A.4.2 乙酸钠缓冲溶液(pH4.0):500ml50%(W/V)的乙酸钠溶液与 500ml冰乙酸混合。 A.4.3 2，6－二氯靛酚溶液:参照 4.3条。 A.4.4 二甲苯。 A.5 测定步骤 A.5.1 标准曲线的绘制:用6只50ml具塞试管加入5ml2%偏磷酸和5mlpH4.0的乙酸钠缓 冲液，然后依次加入0.0 ，0.1，0.3，0.6，0.9，1.2及 1.5ml 2，6－二氯靛酚溶液，用 力摇动5s，再向各试管中加入10ml二甲苯，再激烈摇动20s，静置分层后与试样管同时比色 (无染料的试液作空白)，以吸光度为纵坐标，2，6－二氯靛酚的毫升数为横坐标绘制标 准曲线。 A.5.2 吸取5ml2%偏磷酸样品浸出液(参照5.1条)于50ml具塞试管中，加5mlpH4.0的 乙酸钠缓冲液和2ml染料溶液，激烈摇动5s，立即加入10ml二甲苯，再激烈摇动20s，待静 置分层后，从二甲苯层中小心吸取一份，放入1cm比色杯中于500nm波长下进行比色。记 录吸光度A，在标准曲线上查出二甲苯层中 2，6－二氯靛酚的毫升数。整个操作应在30 min内完成。 A.6 计算公式 (2－V)·T·A 维生素 C(mg/100g)＝——————×100 W 式中: 2——所用 2，6－二氯靛酚染料的体积，ml ; V——查得 2，6－二氯靛酚溶液的体积，ml; A——稀释倍数; T——染料滴定度，mg/ml; W——样品重量，g。 附 录 B 抗坏血酸纯度检验法 (补充件) B.1 称取100mg(准确至0.1mg)抗坏血酸待测样品，用 2%偏磷酸或 2%草酸溶液溶解稀 释至 100ml。 B.2 吸取抗坏血酸溶液1ml于盛 10ml 2%偏磷酸或2%草酸溶液的锥形瓶中，加入6%碘 化钾溶液 0.5ml和1%淀粉溶液五滴，摇匀。用 1.67×10**－4M碘酸钾标准溶液滴定， 终点为极淡蓝色。 B.3 计算公式 B.3.1 抗坏血酸浓度按式(B1)计算: V1×0.088 抗坏血酸浓度＝—————— ……………………………… (B1) V2 式中: V1——滴定时消耗1.67×10**－4 M碘酸钾标准溶液的体积，ml; V2——所取抗坏血酸溶液的体积，ml; 0.088——1 ml 1.67×10**－4 M碘酸钾溶液相当于抗坏血酸的重量，mg; B.3.2 抗坏血酸纯度(%)按式(B2)计算: C·V 抗坏血酸纯度(%)＝———×100 ……………………………(B2) W 式中: C——所标定抗坏血酸的浓度，mg/ml; V——抗坏血酸溶液总体积，ml; W——抗坏血酸重量，mg。

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