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- 215275155 2017-09-24 00:00:00
- 培养基装管装瓶(袋)应立即进行消毒灭菌灭菌彻底容易产杂菌给产造损失 ()母种培养基灭菌 母种培养基灭菌般用手提式高压锅灭菌试管7~10支扎捆再用防潮纸或牛皮纸包住试管棉塞管口朝防止灭菌棉塞潮湿高压灭菌间1.2kg~1.5kg/cm2压力保持15~20钟即使用高压锅灭菌应注意事项: 1.灭菌锅水要放至水线止放水少易引起烧干及烧焦培养基;放水棉塞易潮湿易染杂菌 2.锅内冷空气必须排除干净否则达灭菌温度排除锅内冷空气两种灭菌锅升火始气起经5钟左右排气至排气阀气达直喷再关闭排气阀;另外种排气阀关闭升火待压力升0.5kg/cm2打排气阀使指针降落0再关闭气阀烧至所需压力 3.灭菌间易或短养易破坏培养基颜色发黄菌丝利;短则达灭菌效灭菌结束放气速度能太快宜逐渐进行使指针慢慢降0才揭锅盖否则棉塞容易冲试管 没高压锅条件用土蒸汽锅灭菌要相应延灭菌间100℃温度应保持4~6灭菌彻底采用间歇灭菌每水烧蒸煮1(100℃)连续三 培养基灭菌结束应立即取试管直立放置2~3钟待试管壁水珠培养基内再趁热搁置斜面试管壁量水珠温度适斜放般使斜面试管总二至三放再用纱布覆盖防止冷却程温度急剧变化使管壁形水珠 经灭菌斜面试管必须接种前于每批或每锅取3~4支放28℃~30℃恒温箱培养2~3作空白试验经培养斜面仍光洁透明杂菌或细菌现则表示灭菌彻底作接种用发现杂菌则应找原并批试管重新灭菌使用 (二)原种、栽培种高温灭菌 原种、栽培种所需数量灭菌般采用较灭菌锅采用高压蒸汽锅进行湿热灭菌升温火力应逐渐加防锅内温差变化太引起玻璃瓶炸裂破损压力始升0.5kg/cm2即打排气阀排冷气待冷空气放尽再关排气阀重新升温烧至所需压力 高压灭菌所需要间应根据培养基原料种类熟程度决定短木屑、棉壳、蔗渣种木主料培养基灭菌蒸汽压力要求达1.5kg/cm2保持60钟;稻草培养基粪草培养基同压力保持90钟;麦粒培养基则要保持120钟才能达灭菌效 采用土锅灭菌98℃~100℃温度需连续灭菌6~8;麦粒培养基灭菌间须达12宜停火再焖蒸3~4才能瓶(袋) 采用塑料薄膜袋装菌种培养基灭菌按进行灭菌聚乙烯耐压耐温性能差故能采用压灭菌100℃保持8~12聚丙烯塑料薄膜耐温、耐压性能1.5kg/cm2压力保持2灭菌彻底且破裂灭菌要立即打锅盖待温度降至50℃趁热锅取减少每包粘连起现象 培养基灭菌完毕锅取应放于清洁、凉爽、干燥室内进行冷却待接并棉塞喷5%石炭酸或0.25%新洁尔灭溶液防杂菌染
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