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    随着实验室自动化的发展，很多实验中简单重复的批量操作逐渐被自动化设备所替代，例如酶标洗板机就是其中的一项，代替了之前繁复的人工拍打，其操作简便、可靠性强、洗涤干净，大大减轻了实验工作者的工作量，广泛应用于医院、血站、卫生防疫站、试剂厂、研究室的酶标板清洗工作。在新型冠状病毒（COVID-19）的检测中，酶标洗板机用于批量样本的酶联免疫吸附试验（ELISA）清洗，一方面确保实验的重复性，另一方面提高检测效率，对于辅助核酸检测，提高诊断和检测准确性具有重要意义。

    酶标洗板机是用来清洗酶标板的一种自动化设备，通过程序化的注入和吸液，实现酶联免疫检测中结合相与游离相的分离，并清洗掉酶标板检测后的一些残留物质，从而降低后续检测过程中残留物存在而导致的误差。

    在ELISA实验中，包被、封闭和孵育抗体后的清洗过程中都需要使用到洗板机。经过充分洗涤，洗去未结合的抗体，只保留特异性结合的抗体，这样，才能获得理想的背景信号，消除结果的差异性。为了达到充分洗涤的目的，实验人员都会重视洗涤液的选择、洗涤液的用量和洗涤次数等参数，需要注意的是洗板机的管道容易因剩余洗液结晶（残留盐渍）造成阻塞， 清洗过程无法按照计划的用量和次数顺利进行，影响清洗效果。

ELISA实验步骤

    洗板机操作简单，方便好用，为了保持正常的工作状态，延长洗板机使用寿命，降低故障率，保证检测结果的准确性，日常的清洗维护显得尤为重要。

    大家都知道，通常情况下，洗板机管道的日常维护使用反渗透（RO）纯水进行清洗就可以满足要求。但实验用洗涤剂的配制需要用到符合GB/T 6682-2008的二级纯水，因为水中颗粒物，离子和有机物杂质对实验结果会有影响。

GB/T 6682-2008 分析实验室用水规格

    如果实验室用洗板机，又不需要超纯水时，比较理想的配置是使用一套EDI的纯水设备，因为为冲洗管道和准备洗涤剂而配一套RO设备和一套EDI设备显然有些不经济，而且EDI设备的纯水水质完全可以满足冲洗要求，适用性更广，为实验室将来纯水应用的扩展保留空间，带来更多灵活性。

    EDI纯水设备，是在RO纯化技术基础上，添加创新性技术－连续电流去离子的EDI 模块。带有EDI模块的纯水仪，对自来水中杂质的去除更彻底，产水水质可靠，而且不受进水水质的影响，水质更加稳定。洗板机清洗使用水质稳定的EDI纯水，更能保证ELISA检测结果的准确性和重复性。

EDI技术优势: 

1. 产水稳定，质量可靠 ；

2. 可持续再生，无需化学品处理， 绿色环保 ； 

3. 无需更换树脂，降低劳动量； 

4.自动化程度高，超低电能消耗 

5. 运行及维修成本低 

6. 杂质去除效率高，尤其是低价离子和小分子量的带电有机物

    乐枫生物是国内较早生产EDI实验室纯水设备的供应商。目前新一代无线.自由概念的台式实验室纯水仪——Genie E，配备IonPure的EDI模块，能去除水中超过99%的大分子杂质和95%以上的离子，纯水水质符合GB/6682二级纯水要求。

    端午节将至，新冠疫情却依旧在蔓延，在此借浓浓的粽意向医护工作者表达深深的敬意，你们辛苦啦！希望疫情可以早日结束，希望奋斗在一线的工作者在进行病毒检测实验中能够“用水无忧”！ 

关于乐枫生物

    乐枫生物(Rephile Bioscience，Ltd.) 是一家专业从事高端水纯化和实验室分离纯化产品研发、设计和制造的企业，为高科技生物技术和生命科学领域的用户服务。乐枫公司着眼于发展，在ZG、美国、法国、印度、南非等近20个国家建立了销售机构，同时也为国际大型公司提供OEM和ODM，产品销往包括欧美的近100个国家。成立十余年，乐枫持续投入研发，创立出了自己的产品品牌RephiLe（瑞枫），推出了多个新概念产品- 无线连接的Genie系列纯水系统和智能型大流量纯水工作站Super-Genie等。目前乐枫纯化柱填料配方齐全，也提供多款密理博纯水系统的兼容耗材。

关键词：纯水，超纯水，实验室，Genie纯水机，洗板机，ELISA，乐枫

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    新冠病毒的研究会用到实验室Z常见的仪器——二氧化碳培养箱，通过模拟类似细胞/组织在生物体内的生长环境，来对细胞/组织进行体外培养，广泛应用于医学、免疫学、遗传学、微生物、农业科学、药物学的研究和生产。

    根据工作原理二氧化碳培养箱可分为水套式和气套式两种。水套式二氧化碳培养箱需要加水，通过水的热量传递保持温度的恒定和维持足够的湿度水平。一般培养箱会在加热的控制面板上安装一个蓄水池，需要定期加入超纯水，维持箱内的湿度，避免培养液蒸发。

培养箱为什么需要加超纯水呢？

1、降低水中离子的影响

    在细胞培养中，一些重金属离子的含量要求控制在细胞所需的生理范围内，如：铜离子浓度过低，会影响相关酶的活性及相应的生理代谢途径，进而影响细胞的正常生长；铜离子浓度过高时，促进自由基形成，同时能氧化蛋白、脂类和 DNA，造成细胞膜电位的下降进而引起细胞的死亡；钙、镁等金属离子会降低胰酶活力，达不到消化的效果。

    通常，电阻率仪能检测到的18.2 MΩ·cm的超纯水中离子杂质的总含量小于1ppb（250C），已有效去除了水中的金属离子。

    牛血清和培养基中的离子浓度已满足细胞生长的需要，在细胞培养试剂的配制和细胞培养箱用水，为避免干扰，应该选用超纯水，尤其是在配置消化液时需要使用低钙镁型的超纯水。使用超纯水，不仅可有效防止矿物质储积在水箱内产生腐蚀作用，也会降低水中的金属元素对细胞生长的影响。

2、避免微生物的引入

    细胞培养箱污染是导致细胞培养失败的一个主要因素，会殃及整个实验室的细胞培养实验。二氧化碳培养箱中的主要污染源：细菌、真菌(霉菌和酵母菌)、病毒、支原体、非同种细胞等。另外，内毒素污染也会给细胞培养实验带来诸多难以预料的不良后果，如，改变细胞形态，影响细胞附着力，活化细胞产生细胞因子等，极大程度影响后续实验进程和结果的准确性。

    通常细胞培养的内毒素污染来自于血清、培养液及外加药物配制用水等。为避免细胞培养受到内毒素污染的影响，选择无内毒素的超纯水进行细胞培养相关试剂的配制和细胞培养箱供水是很关键的一步。

    乐枫的终端过滤器RephiBio Filter，通过实验证明，可GX去除水中的热原（内毒素）、核酸酶、细菌等杂质，是防止外源微生物污染箱内环境的一个有效屏障。

3、减少有机物的影响

    水中的有机杂质通常是生物源、植物材料腐烂产生的腐殖酸，这些溶解在水中的有机物会促进微生物的繁殖，阻碍细胞的生长。细胞培养的有机物含量要求TOC<5ppb。

纯水仪器选型推荐

    细胞培养对水质要求严格，选择纯水仪的ZD在于纯水设备的品质和性能可靠性。很多用户在实验中采用了乐枫的Genie G 一体超纯水机和Genie PURIST 超纯水机。

    Genie G 是一机两水的机型，将自来水纯化后得到超纯水和EDI纯水。如果实验室还需要做仪器的清洗或其他二级纯水的需求，Genie G 是一个理想的选择。

    Genie PURIST 是单纯的超纯水设备，需要用纯水（RO纯水或EDI纯水）作为进水，制备超纯水。

水质保证
1 配备低镁型纯化柱，特异性去除水中的镁离子，还可以广谱去除水中的其他金属离子
2 配备RephiBio 终端过滤器，可有效去除水中的热原（内毒素）、核酸酶、细菌等杂质。

1 采用1+N模式，一台水机可配 N 个取水手柄，可连接多个外接传感器，灵活且具扩展性，适合实验室发展的需求

2 采用智能IT技术，取水手柄与主机可无线连接，取水点与主机的距离不受电线长度的限制，让您实验“无线 · 自由”

服务专业

1 乐枫可提供全方位的安装维护、用户培训、技术支持、故障维修等售后服务

2 乐枫可提供各类标准所需的3Q 认证

3 乐枫可提供全套中英文验证手册以方便您的实验室验证过程

其他配套产品

产品特点：

- 使用高品质的聚丙烯（PP）外壳和带支撑结构的疏水性PTFE滤膜

- 气体可自由通过，阻止水溶液和气溶胶等杂质污染

- 设计轻便，易于使用在实验室气体及真空管路上

- 可以高温高压灭菌

- 提供两种规格包装

关于乐枫生物

乐枫生物(Rephile Bioscience，Ltd.) 是一家专业从事高端水纯化和实验室分离纯化产品研发、设计和制造的高新技术企业，为高科技生物技术和生命科学领域的用户服务。乐枫公司着眼于发展，在ZG、美国、法国、印度、南非等近20个国家建立了销售机构，同时也为国际大型公司提供OEM和ODM，产品销往包括欧美的近100个国家。成立十余年，乐枫持续投入研发，创立出了自己的产品品牌RephiLe（瑞枫），推出了多个新概念产品- 无线连接的Genie系列纯水系统和智能型大流量纯水工作站Super-Genie等，拥有了三十多项ZL和多个软件著作权。目前乐枫纯化柱填料配方齐全，也提供多款密理博纯水系统的兼容耗材。

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在新冠病毒2019-nCoV的分子生物学研究中，电泳技术是一个重要方法，主要用于核酸、蛋白质的分离与鉴定，使用的实验仪器主要是电泳仪。本文，乐枫纯水为大家总结了实验中常出现的问题和解决方法。

一、什么是核酸电泳？

    核酸电泳是基因操作的核心技术之一，用于分离、鉴定DNA、RNA 分子混合物和纯化DNA片段。

二、核酸电泳异常条带问题 

    核酸电泳实验中，常常会遇到条带模糊、拖尾、扭曲等现象，究其原因，除了操作不当，电泳条件未优化，电泳缓冲液也是重要的影响因素之一。电泳缓冲液的组成及其离子强度影响DNA的电泳迁移率。

表1 核酸电泳条带异常的原因汇总及建议的解决方法

三、核酸电泳用纯水要求

    为了防止水中杂质（如：核酸酶、蛋白质、离子等）对电泳结果的影响，核酸电泳实验配置缓冲溶液或稀释样品需要使用超纯水：

● 电阻率 18.2 MΩ·cm

●TOC < 10 ppb

● 无核酸酶

● 细菌总数< 1 CFU/mL

● 热原< 0.005 EU/mL

● 0.22 μm 或更低的颗粒过滤

四、核酸电泳用纯水机推荐

    乐枫生物新一代Genie系列智能纯水系统是一款专注于解决用户需求的实验室纯水机。Genie系列智能纯水系统采用乐枫duchuang的理念——无线连接、“1+N”模式，具有系统智能化、设计人性化、水质标准化三大特色。

广州某疾控ZX安装的Genie G以自来水为进水产EDI纯水和超纯水

荷兰安装的Genie U以自来水为进水产RO纯水和超纯水

稳定可靠的水质

• 集合优化的流路设计、技术lingxian的 EDI 模块和乐枫duchuangLeFil 和OrganeFil 配方填料的超纯化柱，纯水和超纯水水质达到或超过相关实验室用水标准；

• 配备RephiBio 终端过滤器，可有效去除水中的热原（内毒素）、核酸酶、细菌等杂质，满足核酸电泳实验用水要求。

用户体验佳

• 触控屏采用高灵敏度防水屏幕，可带乳胶手套操作

• 采用智能IT技术，取水手柄与主机可无线连接，取水点与主机的距离不受电线长度的限制，让您享受“无线 · 自由”的用水体验；

• 远程取水终端的手柄设计符合人体工学，升降只手操作；亦可实时查看水质信息，完成手动取水或定量取水等操作

    随着国内疫情形势逐步好转，全国各地高校陆续公布了学生返校复课时间，宅在家中那么久的你，是不是突然变得不安起来？不要慌，超实用的实验室纯水应用小技巧“助你成功”！ 

您关心的就是我们所关注的！

关于乐枫生物

    乐枫生物(Rephile Bioscience，Ltd.) 是一家专业从事高端水纯化和实验室分离纯化产品研发、设计和制造的企业，为高科技生物技术和生命科学领域的用户服务。乐枫公司着眼于发展，在ZG、美国、法国、印度、南非等近20个国家建立了销售机构，同时也为国际大型公司提供OEM和ODM，产品销往包括欧美的近100个国家。成立十余年，乐枫持续投入研发，创立出了自己的产品品牌RephiLe（瑞枫），推出了多个新概念产品- 无线连接的Genie系列纯水系统和智能型大流量纯水工作站Super-Genie等。目前乐枫纯化柱填料配方齐全，也提供多款密理博纯水系统的兼容耗材。

关键词：纯水，超纯水，实验室，Genie纯水机，核酸检测，电泳条带，乐枫

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2019年底新型冠状病毒引发的肺炎疫情在武汉出现，并向全国乃至蔓延。世界卫生组织将这个新型冠状病毒暂时命名为“2019-nCoV”。冠状病毒是一个大型病毒家族，已知如中东呼吸综合征(MERS)和严重急性呼吸综合征(SARS)是2种高致病性冠状病毒。冠状病毒是具外套膜的正链单股RNA病毒，其特点是可以以自身为模板，指导合成病毒相关蛋白质。病毒进入宿主细胞后，首先以病毒RNA为模板表达RNA聚合酶，随后RNA聚合酶完成负链RNA的转录合成、各种结构蛋白mRNA的合成，以及病毒基因组RNA的复制。新型冠状病毒是以前从未在人体中发现的冠状病毒新毒株。随着监测和研究工作的深入，可能会发现更多种类的冠状病毒。

通过高通量NGS测序可以协助病毒溯源，监控病毒变异，掌握病毒的发展方向，也可以为抗病毒 药物研发提供科学依据。为了弄清新型冠状病毒的起源，ZG研究人员对9例住院患者的样本进行高通量测序，获得了完整和部分的2019-nCoV基因组序列。他们发现，这种新型冠状病毒在遗传学上与SARS和MERS冠状病毒不同，但与两种蝙蝠来源的冠状病毒密切相关。新病毒可能是Z近才出现的，并采用与SARS相同的分子通道进入人体^[1]。

珀金埃尔默具有完整的NGS解决方案，产品涵盖样品收集、核酸提取、核酸质控、NGS自动化文库构建工作站及NGS建库试剂等几个方面。利用珀金埃尔默公司的NGS产品，可以实现从样品收集、提取、NGS建库及文库质控的全流程解决方案。

PerkinElmer NGS全流程解决方案

1、病毒RNA提取：Chemagen自动化核酸提取方案

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新冠病毒检测之Chemagen自动化核酸提取方案（https://www.yiqi.com/zt2598/news_42075.html）

2、病毒RNA质控及NGS文库质控：Labchip GX Touch

病毒RNA质控：由于不同样品之间病毒含量差异较大，不少样品病毒量稀少，在NGS文库构建需要进行RNA质控，了解RNA的提取质量情况对下游实验及数据分析等都有非常重要的意义。

我们创新的LabChip^® GX Touch微流体技术提供了wu与伦比的电泳分离效果。LabChip^® RNA分析为大小介于100 至6000个核苷酸之间的RNA样品提供了一种快速简易的定量方法。利用RNA检测实验分析RNA样品，通过自动化步骤来进行样品定量和完整性分析，可以节省时间和金钱。LabChip的RNA分析能够为用户提供RNA浓度，以及核糖体RNA比值作为完整性检测的指标。RQS为一个介于0和10之间的质量评分，其中“10”表示样品完好无损。RQS与其它商业指标的相关度极好。

图示：RNA样品的降解过程，强制性的对完整的RNA通过加热一系列指定时间使之降解，以展示样品的降解过程。

NGS文库质控：构建好的NGS文库，可以利用NGS 3K试剂盒进行NGS文库的质控。LabChip DNA NGS 3K实验能够提供Z灵敏的浓度检测范围(起始样品浓度5-500pg/μL)，已远远超过其他的DNA荧光标记技术。无论是何种应用，LabChip DNA NGS 3K检测都只需要很低的样本量。这个实验尤其适合有稀缺文库样本的质控。

图示：DNA NGS 3K实验可达成的灵敏度。同一NGS文库样本进行6次3倍系列稀释，实验结果展示了LabChip DNA NGS 3K的灵敏度及检测下限。数据结果由LabChip GX Touch仪器生成。

除了以上RNA质控及高灵敏度的NGS 3k芯片试剂，Labchip可以在同一个平台上完成高灵敏度DNA/RNA样品分析、弥散性DNA样本分析， 以及RNA和基因组DNA样本的完整性分析，且每个样品耗时可低至28秒。本系统既有Z大批处理能力为24个样品、帮助节约时间和试剂用量的型号LabChip GX Touch 24，又有适用于高通量实验室的型号LabChip GX Touch HT，可达成384的处理能力。您可根据具体的应用选择适合的数据输出：电泳峰图、虚拟胶图或数据表格。

3、NGS建库自动化方案：自动化文库构建工作站

NGS建库流程复杂，对液体处理jing准度要求高，利用自动化工作站进行NGS文库构建，具有流程标准化、样品之间重复性好，jing准度好，通量高等特点。根据通量大小、自动化程度的不同，珀金埃尔默提供了多款自动化NGS文库工作站供选择。

Sciclone G3 NGSx iQ高通量自动化建库工作站，通过整合协同工作， 自动化程度获得极大提高： 一个Twister III五维机器人手臂、可存放27盒枪头的储板栈、高通量jing准移液的Sciclone G3 NGSx文库制备工作站、内嵌桌面式Inheco ODTC热循环仪、直观图示化的用户界面、经PKI 专业开发验证、兼容不同品牌供应商建库试剂盒的NGS自动化建库程序，确保高质量的DNA或RNA的NGS文库构建。大量已经 验证的NGS建库程序，确保NGS文库的快速制备。使用这套无人值守自动化建库系统，您可以空出更多时间去做更具智力挑战性的工作，分析实验数据、设计您的下一个实验方案等。

Sciclone G3 NGSx iQ HT 高通量自动化建库工作站，基于Sciclone G3 NGSx iQ工作站做进一步升级，配备384通道移液头，内置抓扳手及外置Twister III五维机器人手臂、内嵌桌面式Inheco ODTC热循环仪。是目前市场上唯yi 一款提供从核酸到文库的微型化、标准化、测试应用的仪器。反应的微型化节约了宝贵的试剂，并允许研究人员以相同的成本运行更多的样品。

Sciclone^® G3 NGSx工作站是我们的高通量解决方案，适用于文库制备、序列捕获及样品归一化。该系统每周可制备多达480个文库或192个外显子组捕获文库，且灵活性极强，每轮能处理8到96个样品。此外，Sciclone^® G3 NGSx工作站的全封闭平台设计，可使交叉污染降至更低水平。该系统在针对前PCR工作流程设计优化之余，同样适用于后PCR工作流程。

Zephyr^® G3 NGS工作站是一个简单易用的文库制备系统，经过专门的设计和预编程，可应对新一代测序样品制备工作流程中的后PCR步骤――磁珠纯化、qPCR体系构建、样品归一化、样品混合（多重）实验。同时也是追求性价比的中通量实验室的前PCR建库系统的好选择。

JANUS G3 NGS Express(PLUS)工作站配备直观的文库制备应用界面，可实现片段化文库、扩增子、靶向捕获等文库制备及样品归一化。它是中低通量台式测序系统的wan美补充。

4、NGS建库试剂：NextFlex 文库构建试剂盒

新型冠状病毒是具外套膜的正链单股RNA病毒，利用NextFlex Directional RNA-seq kit 2.0 可以构建链特异性RNA文库，通过对病毒的测序来进行病毒变异、宿主溯源等深入研究。

珀金埃尔默提供了行业ling先的二代测序文库构建试剂产品组合，包含DNA、RNA、Small建库试剂，扩增子/探针杂交捕获试剂以及建库流程中使用到的接头和纯化磁珠。同时珀金埃尔默提供相应的自动化试剂盒包装，可以直接应用于珀金埃尔默的NGS自动化文库构建工作站。

以上珀金埃尔默提供的NGS整体解决方案可以极大地提升新型冠状病毒的研究效率，为科学家们更好地进行病毒溯源，掌握病毒变异，预测发展方向以及药物研发提供有力保障。

参考文献

[1] Lu R, et al. Genomic characterisation and epidemiology of 2019 novel coronavirus: implications for virus origins and receptor binding. Lancet. 2020 Jan; S0140-6736 (20): 30251-8.

冠状病毒介绍

       冠状病毒（CoronaVirus , CoV）因其表面有棘突（Spike蛋白）和整体形态似日冕状而得名。此前，可能许多人对“冠状病毒”一词并不熟悉，但其实大多数人都遇到过冠状病毒的一般温和形式，约五分之一的普通感冒也是由其下属四种毒株引起的。

透射电子显微镜像-从人细胞表面出现的新冠病毒。

（图片来源：NIAID-RML）

       据系统发生分类，冠状病毒（CoV）是巢病毒目（Nidovirales）中的Z大病毒组。冠状病毒科包括冠状病毒亚科和环曲病毒亚科，冠状病毒亚科又可分为冠状病α、β、γ和δ四个属。2019新冠病毒是目前已知的第7种可以感染人的冠状病毒，它和SARS-CoV ，MERS-CoV以及HCoV-OC43 和HCoV-HKU1均属于β型。其余2种（HCoV-229E、HCoV-NL63）则属于α型。^[1][2] 新冠病毒的病毒源头目前文献报道为中华菊头蝠，但中间宿主查明可能还需要一段时间。    

冠状病毒感染机制

01Cov基因组

       冠状病毒全基因组约30 kb（如图，新冠病毒为 29.903 Kb），均为无分段的正义单链RNA，拥有一套包含使用多种非结构蛋白（nsps）的独特复制策略。

       该基因组包含5'帽以及3' poly（A）尾，可直接作为mRNA翻译复制酶多聚蛋白。编码非结构蛋白的复制酶基因占基因组的三分之二，约20 kb（2个ORFS,采用移框阅读翻译）。结构蛋白（包括S蛋白，M-膜蛋白，E-包衣, N-核衣壳，HE（β属））和辅助蛋白（Accessory）仅占病毒基因组的约10 kb。对于辅助蛋白，组织培养中显示其对复制几乎是不需要的，但已有实验表明它在病毒发病机理中有重要作用（调节干扰素信号传导，促炎性细胞因子的产生和逃避宿主先天免疫等）。

冠状病毒3D模拟图（来源：Wikipedia）

02感染过程

       新冠病毒的S棘突蛋白首先识别人细胞表面受体ACE2（血管紧张素转换酶，同SARS）^[2]，通过吸附并内化，释放病毒基组。病毒再利用人核糖体直接翻译其正义单链RNA模板，并由核糖体移框翻译主要是多聚蛋白的产物，多聚蛋白随后由其内部的蛋白酶（如3CLpro，Mpro-PLpro等）催化剪切得到单个组成蛋白，包括重要的RNA复制酶（RdRp）等。随后，RdRp复制正义链，产生负义链，再以负链为模板，生成大量的正链，完成了RNA的复制。新的病毒RNA再结合水解酶产生的各种蛋白质，组装成了大量的新病毒，Z后释放出原宿主细胞，继续狩猎新目标。

       RNA复制酶错误率一般较高，但冠状病毒RNA聚合酶据报道具有一定遗传纠错的能力，更有意思的是，它忽略了对编码棘突蛋白（S蛋白）和其它辅助蛋白的编码区域纠错，因此这两个区域突变Z高，成为了推动病毒的变异演化关键点，导致病毒倾向感染新细胞和新的物种，并逃避宿主免疫反应。^[9]

03临床特征

       新冠病毒会引起致命性肺炎，表现非常类似于SARS。感染者可能会发展为急性呼吸窘迫综合征，接受重症监护的可能性很高，甚至死亡。细胞因子风暴可能与疾病严重程度有关。主要感染下呼吸道，对其它器官的影响和病理生理需要更多的努力来了解。^[3]

04潜在药物靶点

       2003年之前，冠状病毒疾病影响很小，因而对它们的相关研究几乎停滞。但2003年的非典病毒（SARS-CoV）和2012年的中东呼吸系统综合症冠状病毒（MERS-CoV）的爆发刺激了对于冠状病毒的关注和研究，并确定了大量合适的抗病毒靶标，如前述病毒蛋白酶，RNA聚合酶和结合蛋白（S蛋白）。Z近大家耳熟能详的瑞德西韦（核苷类似物）和克力芝就分别是RdRp（RNA依赖的RNA聚合酶）和蛋白酶的YZ剂。此外，棘突蛋白（S）不仅负责与宿主受体结合，而且还是能够诱导保护性免疫力的主要抗原决定簇。Z新预印文章也表明新冠病毒结合ACE2受体的亲和力比SARS-CoV S高10-20倍，这也提示新冠病毒传染性可能远高于SARS。注：MERS-CoV受体是DPP4（二肽基肽酶4）。

MMR在疫苗和药物早期研发中应用

       根据以上机理，抗新冠病毒的药物或疫苗可以归纳为两大类：一是阻止病毒和宿主细胞结合，作用靶位是S蛋白或者ACE2（MERS是DPP4）二是阻止新病毒在宿主细胞内的产生，常见作用靶位是RdRp或者病毒蛋白水解酶。

01

       针对S蛋白或者S蛋白与宿主细胞的结合，这里挑选一篇涉及方法学的文章，希望此文能给新冠病毒疫苗和药物研发及未来的优化工作提供安全和GX的方法学参考^[5]。

       文中采用了表达S蛋白的伪病毒去代替天然CoV的方法去检测和筛选MERS疫苗或小分子药物，免除科研人员必须在P3或以上级别实验室的诸多不便，并且显示出和野生病毒基本一致的实验效果。（伪病毒一般为人工改造可表达目的病毒蛋白的γ逆转录病毒和慢病毒载，据多处文献报道在流感病毒研究中显现了极高的应用价值^[7]。

       主要的实验流程包括：准备实验需要的细胞株并构建可表达MERS-CoV S蛋白的质粒（含荧光素酶HIV-1骨架），然后生产表达S蛋白的伪病毒（pseudovirus），并使用Tecan MMR化学发光检测伪病毒对各类型细胞的感染力，Z后进行细胞学中和或YZ实验，并再用化学发光检测药物或疫苗在细胞学水平对MERS-CoV伪病毒中和或YZ效应。

       通过重要病毒感染力测试，作者指出几乎所有测试的人细胞和动物细胞都能被伪病毒感染，这也指出模型的正确性。结果如下图所示：

       MERS-CoV假病毒对人和非人宿主的多种靶细胞中的细胞嗜性。VSV-G和Env-假病毒分别用作阳性和阴性对照。数据表示为96孔板中4个平行孔的平均相对发光强度（RLU）±SD。 重复三遍，结果相似。

       再看细胞水平病毒YZ实验（发光信号已转化为纵轴YZ率，左B为CPE法对比）

左：疫苗血清对病毒抗体中和和YZ检测（A为伪病毒，B为CPE方法）

右：小分子（HP-HSA和ADS-J1）和肽（C34和T20）

对假病毒在NBL-7（A）和Huh-7细胞（B）的YZ作用

       结果显示，伪病毒模型不仅可有效用于疫苗，也可用于小分子和多肽的筛选实验。

       另外，文中也使用MMR光吸收检测了小分子细胞毒性（亦可荧光或发光），通过分析，作者论述了实验中伪MERS-CoV的感染力降低并非由于小分子的细胞毒性造成的。本实验中，化学发光检测在实验中非常必要，超高灵敏度，背景低，稳定性好，可有效排除False-Hit干扰，这也是大多数基于伪病毒模型的实验均采用发光检测的重要原因。此外，基于孔板的细胞实验模型也为高通量的筛选奠定了基础。

       另据文献报道，基于伪病毒的抗体中和实验精验证可有效作为操作繁琐的传统CPE实验（成像检测）替代选择，提升通量，缩短实验周期，大大提升研发效率。^[6]

02

       针对第二种的靶点的药物，一般都属于酶YZ剂。大多数这类药物在成为候选药物前（Candidate），通常需要用高通量筛选的方式从化合物库（或合成）中筛出苗头小分子（Hit），然后一般再通过细胞学实验筛选出具有初步有活性的先导化合物（lead），接着还需要再经过构效、ADME和代谢等优化成为Candidate。

       这个过程周期一般10个月-2年，但由于每次冠状病毒疫情爆发的高度暂时性（无积累病例），针对冠状病毒的药物开发大都停留在活性化合物阶段。比如类似的有这篇2019年的文章，主要描述的是对MERS冠状病毒木瓜蛋白酶样蛋白酶（PLpro）YZ剂的高通量检测和筛选^[8]。

       文中设计用于Z终检测的酶荧光底物为Z-Arg-Leu-Arg-Gly-Gly-AMC，初筛中使用了Tecan自动化液体处理工作站完成实验步骤的高通量分液，并使用Tecan MMR高灵敏荧光功能检测化合物对酶活性YZ，初次在30000个化合物中确认48 个 hit，再经过结构和活性基团分析，并用酶标荧光酶促动力学检测活性YZ效果，Z后选出23个候选化合物用于进一步研究。

       在这23个化合物中，2个YZ活性Z好的剂量反应数据如下图：

       Hit验证，使用SigmaPlot 中的Hill方程拟合得到化合物1和6的IC 50曲线。1和6的IC 50值分别确定为25.0 µM和20.0µM。（纵轴YZ率是由荧光终点检测信号转换得到）

       需要补充的是，在细胞学水平对小分子进行毒性检测是早期研发必要的步骤（文中未体现），一般在MMR上可使用荧光和生物发光手段对此项指标进行高通量高灵敏地筛查。

       鉴于这次新冠疫情来的异常凶猛，常规新药开发在时间上根本不允许，因此很多机构使用有类似机理的已批准或待批准的抗病毒 药物和化合物用于新冠病毒ZL研究（Drug repurposing）。在这些药物中，有些在通过细胞和动物水平的药效试验后，已直接进入临床三期试验。

       在临床毒性已明确的前提下，这样的策略肯定会大大提升药物进程，这里也非常期待尽快听到这些药物临床成功的消息。同时，也期待其中部分药物不久后能进一步被优化，以产生更好治LX果，因为毕竟它们早期是针对其它病毒开发的。

       随着科研和临床上对新冠病毒的病毒及药物的研究加速深入，并在国家的统一指挥下，我们有理由相信新冠病毒很快就能被有效控制住。在此，Tecan作为生命科学和YL领域的一家重要的方案供应商，也会更加努力地给科研和临床相关单位提供更好的产品和服务，为新冠战疫贡献一份力量。

       Z后，向奋战在抗疫一线的所有人致以Z崇高的敬意! 

References: 

1. Anthony R. F. &Stanley P.  Coronaviruses: An Overview of Their Replication and Pathogenesis, Methods Mol Biol. 2015 ; 1282: 1–23.

2.Zhou, P. et al.  A pneumonia outbreak associated with a new corona-virus of probable bat origin.  Nature (2020)

3. B Cao et al , Clinical features of patients infected with 2019 novel coronavirus in Wuhan, China，Lancet | Vol 395 | 2020

4. Identification of a critical neutralization determinant of severe acute respiratory syndrome (SARS)-associated coronavirus: Importance for designing SARS vaccines

5. Zhao et al.（2013），A safe and convenient pseudovirus-based inhibition assay to detect neutralizing antibodies and screen for viral entry inhibitors against the novel human coronavirus MERS-CoV，Virology Journal 2013, 10:266

6.X Wu et al.‎(2013) ,Development and Evaluation of a Pseudovirus-Luciferase Assay for Rapid and Quantitative Detection of Neutralizing Antibodies against Enterovirus 71, PLOS ONE June 2013 | Volume 8 | Issue 6 | e64116

7.Francesca F. & Nigel T.，Pseudotype Neutralization Assays: From Laboratory Bench to Data Analysis  Methods and Protoc. 2018, 1, 8

8. H. Lee, et al.，Identification and design of novel small molecule inhibitors against MERS-CoV papain-like protease via high-throughput screening and molecular modeling，Bioorganic & Medicinal Chemistry 27 (2019) 1981–1989

9.Ralph S. B. et al. （2011）An RNA proofreading machine regulates replication fidelity and diversity  RNA Biology 8:2, 270-279; March/April 2011

10. Daniel W. et al. Cryo-EM Structure of the 2019-nCoV Spike in the Prefusion Conformation, doi.org/10.1101/2020.02.11.944462 

关于帝肯

      帝肯（www.Tecan.com）是ling先的生物制药、法医学和临床诊断实验室仪器和解决方案供应商之一。公司专门从事生命科学领域实验室自动化工作流程解决方案的开发、生产和分销。其客户包括制药和生物技术公司、大学研究部门、法医和诊断实验室。作为一家原始设备制造商（OEM），帝肯也是开发和制造OEM仪器和部件的佼佼者，然后由合作公司分销。公司于1980年在瑞士成立，在欧洲和北美均设有生产、研发基地，并在52个国家设有销售和服务网络。2018年，帝肯销售额为5.94亿瑞士法郎（6.06亿美元；5.16亿欧元）。帝肯集团的注册股份在瑞士六大交易所（TECN；ISIN CH0012100191）交易。

帝肯热线：4008 213 888

帝肯官网：www.tecan.com

　　新型冠状病毒引起的大流行，已累积感染超过4800万人，导致了超过120人死亡，而且，这一数字仍在快速增加中，随着北半球冬季的到来，疫情二次爆发也随之而来。
　　
　　据海外网综合CNN、法新社等外媒11月4日消息，新冠病毒已经在水貂中发生了变异，而这种变异的病毒已经传染给了人类。由于这种变异病毒不像普通新冠病毒那样可以受到抗体YZ，因此可能会导致即将上市的疫苗无法发挥作用。当地时间11月4日，丹麦政府表示将捕杀该国所有水貂，数量高达1700万只。丹麦卫生部长希尤克表示，目前已在该国的5个不同水貂养殖场发现了新冠病毒突变的情况。据悉，感染变异新冠病毒的人数已达到12人。而据界面新闻援引彭博社报道，由于疫情的暴发，在1139个丹麦水貂养殖场中，有217个发现了新冠病毒，丹麦最近几个月已经扑杀了数以千计的水貂。

　　科学家目前仍在研究水貂是如何感染新冠病毒，以及它们是否会传染给人类。此前，荷兰、西班牙、美国等多个国家都出现了水貂感染新冠病毒的案例。尽管我们知道新冠病毒在持续突变之中，但还有一个关键问题我们并不清楚：这些突变是否会对新冠病毒的复制能力和感染能力产生实质性影响？
　　
　　近日，李兰娟院士团队等在 Cell Discovery 杂志发表了题为：Patient-derived SARS-CoV-2 mutations impact viral replication dynamics and infectivity in vitro and with clinical implications in vivo 的研究论文。李兰娟院士团队从浙江大学附属医院收治的新冠患者中鉴定到11个SARS-CoV-2病毒株，发现鉴定出的突变会直接影响新冠病毒的滴度和感染能力，差异最多可达1500倍。该研究提供了直接证据，表明新冠病毒的自然突变会严重影响病毒的复制和感染能力，并影响感染者的病情严重性。

　　接下来，研究团队检测了这些分离出来的突变病毒株在Vero细胞中的复制能力，检测结果表明，感染Vero细胞时，不同的病毒株在复制能力上表现出显著变化。之前的研究已经确定新冠病毒能够感染人类的肺、肝脏和肾脏，研究团队选择了人肺癌细胞Calu-3，人肝癌细胞Huh-7和人肾癌细胞293T，以检测这些不同毒株在人类细胞中的复制能力是否有差异。检测结果发现，在人肺癌细胞Calu-3中，感染24小时时，毒株ZJU-2和毒株ZJU-10之间滴度的差异达到了惊人的1500倍。而在人肝癌细胞Huh-7中，毒株ZJU-8和毒株ZJU-10之间的滴度差异也高达140倍。而在人肾癌细胞293T中，这些新冠病毒株无法有效复制。这些结果表明，在人类细胞中，这些不同新冠病毒株的复制能力有显著差异。
　　

　　新冠疫情下，生命科学研究变得越来越重要！在人类历史上，从来没有如此多的研究人员，花费如此多的时间、精力和金钱来共同研究和ZL一种疾病。这一年来新冠肺炎疫情在世界范围内迅速传播，的科研工作者为此开启了一项艰苦卓绝的研究，以期寻找ZL和治愈新冠肺炎的有效方法。
　　
　　人类社会自诞生以来，不断探索不断进步，每一代人有每一代人的担当，每一代人有每一代人的使命。病毒在变异，全世界的人民也都在团结一致抗疫！净信研磨仪也会一直持续为科研人员服务，一同对抗新冠疫情！

       对于战胜新冠病毒疫情，除了ZL以外就是预防。研制有效的疫苗就是Z佳的预防形式。疫苗是将病毒或者相关成分，经过人工减毒、灭活或者基因技术处理后打入人的体内，这些“有害成分”本身不会在体内大量繁殖或者造成伤害，但会激发人的免疫反应并形成记忆，一旦有真的病毒入侵，免疫系统就会迅速识别并展开“围剿”，从而达到预防的目的。

       在疫苗中有大量的“颗粒”。比如说病毒本身就是一个个小的颗粒，直径大约在几十到几百纳米之间，这些病毒颗粒可以通过电镜直接观察。研制疫苗需要对大量病毒进行培养和控制，病毒颗粒大小和粒度分布可以采用动态光散射的方法进行测试和评估。

       很多时候，我们还需要使用佐剂来提高疫苗的免疫效果，换句话说，疫苗是佐剂和病毒抗原的结合物，这样可以大大提高疫苗的保护效力和持续时间。比如超细氢氧化铝就是常用的疫苗佐剂，它的颗粒大小对于疫苗制剂工艺和产品质量有显著影响，包括影响制剂均匀性、佐剂跟病毒抗原的吸附作用等。

       随着分子生物技术的不断发展，人们对疫苗及免疫的认识也不断深入。当病毒进入体内时，引起特异性的免疫反应并不是整个病毒，而是病毒表面某些特异性的抗原（蛋白、多肽等结构），因此在制备疫苗的时候，就可以只保留对免疫有作用的成分，而把所有无关甚至有害的成分全部去除。对于一些特异性的抗原，我们可以通过基因工程的方式去“合成”表达获取（比如亚单位疫苗、基因工程疫苗、合成肽疫苗），提高疫苗的多样性和可行性。而在这个过程中，我们就需要对大量的抗原、抗体甚至多肽进行处理，这些颗粒粒径跨度比较大，比如抗原、抗体等蛋白一般粒径在几十到几百纳米，而一些分子量小的多肽可能粒径只有几个纳米。这些都可通过激光粒度仪或动态光散射纳米粒度仪来表征。

       在病毒的防护、诊断和ZL过程中，很多都与“颗粒”和“大小”密切相关，因此可通过颗粒学的方法“监视”病毒、蛋白、多肽、佐剂等等，为战胜病毒助上一臂之力。只要各行各业共同努力，就能早日战胜病毒，还“山河无恙，人间太平”！

随着防疫需求、疫情防控态势和全社会对卫生健康的重视的增加，检测频度、范围、深度还会进一步增加、增广，国产核酸提取仪在此次新冠病毒的核酸提取检测中发挥了中流砥柱作用。其优势如下：

1：随到随检——随时取样，随时检测提取，方便灵活。

2：温控准确——迅速升温、降温减少液体蒸发
3：模块制冷——自动模块制冷功能利于保存提取物

4：提取时间快——批量处理96个样本，最快只需15-35min

5：磁珠回收率高——磁珠回收率＞99%，提取核酸纯度高，支持后续实验

6：污染控制——内置紫外线灯消毒净化，避免有害物质对人体的危害

7：试剂开放——可兼容市面上各种磁珠法核酸提取试剂

8：人性化界面 ——程序可视化，操作简单，可实现程序自由编辑

9：中英文切换——程序可自由中英文切换

       2019年12月底武汉发现新型冠状病毒肺炎以来，感染确诊病例和疑似病例数量仍在不断上升，疑似病例的快速确诊迫在眉睫。目前临床上确诊新型冠状病毒肺炎病例，Z通用的方式仍然是在临床观察的基础上，采集痰液、咽拭子等呼吸道标本进行病毒核酸基因检测，并作出病原学诊断。目前核酸检测的准确性问题牵动了很多人的心，除去该病毒的一些特有特征外，检测过程中的每一个环节涉及的科学仪器和操作步骤都可能对结果产生影响。

       目前新冠状病毒核酸检测主要通过PCR检测的方法，其对试验场地、检验仪器及操作人员的要求都非常高，轻微的污染就可能对结果造成偏差。另外，对检测样本保存条件和设备也有很严苛的要求。并且，由于新冠状病毒的传染危险性，防护准备和后续的消毒处理对整个检测实验来说也异常重要。Cole-Parmer作为一家专业的科研仪器、设备、耗材供应商，可以为新冠状病毒核酸检测提供从防护，采样，样本保存，检测，消毒处理等各环节支持。相信jing准可靠的仪器设备及防护消毒产品一定能为这场战役中的检测工作添砖加瓦。Cole-Parmer与你们一起并肩作战！

Cole-Parmer相关仪器配置单*手套还有病毒防护丁 腈系列可选

       以下是新冠病毒核算检测实验的具体标准介绍，可供各位老师参考，其中涉及的仪器设备和耗材，疫情期间欢迎在微信平台直接联系我们，或者直接联系您当地的销售或经销商。

新冠病毒核酸检测实验

diyi步：样本采集

       通常是在采集地——定点发热门诊进行样本选取。样本一般为鼻咽或口咽拭子、气管吸出物、痰液等。鼻咽拭子居多（其阳性率非常高）

       在采集过程中，Cole-Parmer可为您提供防护服，护目镜，鞋套，以及手套等防护用品。

第二步、样本的包装、保存与运输

       通常采样管需经过3层包装，即：自封袋+运输罐+专用运输箱。在2-4℃进行保存，（通常保存不能超过72小时），再通过UN2814感染性物质专用运输箱，由经过生物安全培训的专人，全身着防护用品运送转运箱。

第三步、样本的核酸检测

• 实验地点：基因扩增实验室

• 实验条件：二级生物安全实验室（P2负压实验室）

• 防护准备：检测人员需进行三级防护的穿戴。按序依次穿戴好一次性帽子、医用N95口罩、一次性防护服、一次性鞋套、一次性防水靴套、护目镜和双层乳胶手套。如有条件可加穿一次性隔离衣。                       

• 检测步骤：准备工作，核酸提取（手动），基因扩增与检测，结果分析     

1.准备工作

       实验仪器设备：二级生物安全柜，水浴或烘箱，移液器

       首先检查运输罐是否严格密闭，然后取出罐内的密封袋进行56℃下30分钟的消毒灭活，灭活后可从密封袋内取出采样管对采集的样品进行分装、混匀。

       整个过程应在二级生物安全柜内进行，灭活设备应尽量选择可放置于生物安全柜内的小型设备以减少样品进出安全柜内的次数。

2.核酸提取（手动）

       实验仪器设备：二级生物安全柜，移液器，振荡器，金属加热器，微型离心机

       首先需要依据不同品牌试剂盒的要求进行裂解液的配置。然后，采用化学试剂法对核酸样本进行裂解，样品裂解前需经过充分的振荡混匀，如有必要可采用金属加热器于56℃下充分裂解病毒所释放出的核酸。通过多次离心完成裂解产物的过滤收集。Z后利用离心纯化法对裂解后的核酸进行洗涤与回收。

3.基因扩增与检测

       实验仪器设备：生物安全柜，PCR板离心机，实时荧光定量PCR仪

       首先，需根据不同品牌试剂盒的要求将试剂盒内的不同组分（引物，dNTP，聚合酶等）按各自所需的体积量进行配置，并充分离心混匀。然后将核酸样本依次加入至每个PCR反应管中，加盖密闭后进行充分的混匀、离心。Z后，将PCR反应管置于实时荧光定量PCR仪中，按照试剂盒说明书的要求进行扩增参数的设置后即开始检测。

4.结果分析

       Z后，通过计算出的CT值，依据检测试剂盒厂家说明书的判断标准进行判定，阳性、阴性或者不确定。

第四步、未测样品的保存

       如样本未能及时检测，需将样本于-70℃或以下进行保存。Cole-parmer专为您提供保存样品的Cole-parmer超低温冰箱。

第五步、消毒处理

       生物安全柜内：对台面、仪器、外层手套进行消毒，相关垃圾投入专用YL垃圾桶中。并开启紫外灯照射生物安全柜，时长应不低于30分钟。

       核酸检测实验室内：对实验室台面、地面进行消毒，并开启紫外照射灯进行空间消毒，时长应不低于30分钟。

       实验人员：按自上而下、由内而外的顺序依次摘脱三级防护穿戴，并置于专用YL垃圾桶内。

       YL垃圾：所有与新型冠状病毒相关的YL垃圾需经过湿热高压灭菌（121℃，30分钟）后再作为普通的YL垃圾处理，且垃圾袋上应标注新型冠状病毒YL垃圾的相关信息。

        注意：实验试剂、设备等需取得YL器械注册证，科学研究除外。

当疫情再一次伺机而动时，要想快速的控制病毒的传播，做核酸检测就成了必经之路，同时也备受各界关注。但影响核酸检测结果的因素是多种多样的，包括样本采集部位、采集方式、储运过程、核酸提取操作等等。其中，样本的稳定性是一个关键环节。如何能使病毒快速失活，又能保护病毒核酸不被降解，维持检测稳定性的病毒样本保存液就成了重中之重。

第yi步：打破外壳，消灭“战斗力”

和其他RNA病毒一样，新冠病毒的结果简单来说，是由蛋白质外壳包裹着单链核酸——RNA构成的。我们可以简单地将病毒的RNA视为发号施令的“大脑”，蛋白质则是执行命令的“四肢”。新冠病毒感染人体并发生繁殖活动，引发病症，这个过程都主要由病毒外部具有生物活性的蛋白结构完成。

灭活型病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒；它是一种强有力的蛋白质变性剂，能迅速溶解蛋白质，导致病毒结构破碎。当带有新冠病毒的临床样本与保存液混合，样本中的病毒受裂解液作用，蛋白质外壳被迅速破坏，并且这种破坏是不可复原的。这时候，病毒就失去了作恶的“爪牙”，不再拥有对人的感染能力，从而保障了样本运输、处理过程中接触者的安全。

第二步：抑zhi酶活，押送“身份证”

外壳裂解后，新冠病毒的RNA游离在保存液当中。作为单链大分子，RNA的稳定性不像双链的DNA那样岿然不动，在自然环境中随处存在的RNA酶便是使RNA水解断裂的罪魁祸首。因此，通常认为失去外壳保护的病毒RNA是脆弱、不稳定的，需要低温储存才能保证它的完整性。

第三步：配合提取，确认“真凶”

病毒RNA妥善地储存在病毒样本保存液中，在进行检测前，还需要zui后一个步骤：将保存液中的RNA捕捉、浓缩，作为zui终样本加入实时荧光PCR体系中，上机进行检测。

德晟生产的病毒保存液除了灭活型病毒保存液外，还有非灭活型病毒保存液。它是同时保留病毒的蛋白质外壳和病毒核酸DNA或者是RNA，这样病毒在体外具有蛋白抗原表位和核酸的完整性，当然操作失误时也有一定的感染性风险。采样后长时间保存需要保持严格低温。不管是哪种病毒保存液，我们在使用时都需要按照要求严格操作、存放或运输。

       随着各地陆续开始复工，目前正是疫情防控能否取得Z终胜利的关键时刻。如何GX、快速、准确的“早发现、早隔离”疑似及确诊病例，提高核酸检测的效率和安全性，仍是各地医院、检测机构需要重视的问题。

       然而在样本处理的过程中，手工操作不仅使得核酸提取流程耗时长，操作相对繁琐，更重要的是医务人员在频繁接触样本过程中会增加病毒感染风险。

       珀金埃尔默推出的实验室自动化机器人整合系统，包括了自动化样品处理、样品管开盖、核酸提取、PCR反应体系构建及在线QPCR扩增检测。大大减少人工操作，优化样本检测流程，提高检测通量，还同时满足了医务人员在病毒核酸提取过程中对安全防控性的要求。

何为实验室自动化机器人系统

(ARS，Automated Robot System)？

通过机械臂及ZY控制软件，将样品及实验器具在多台分别用于样品处理、检测、存储等的设备之间有序移动，使上述设备无缝协同工作，从而无人值守的完成特定复杂实验流程，并实现一定通量。

ZD应用领域

珀金埃尔默的explorer G3自动化机器人整合系统，适用于广泛的应用领域:

高内涵筛选

RNA及小RNA干扰筛选

初级与次级高通量筛选

ADMETox

干细胞筛选；菌种筛选

自动化的基因分型

细胞系的筛选和Cherry Picking

高通量表达分析

自动化的细胞培养、病毒扩增与蛋白表达纯化

高通量核酸提取、浓度归一化、PCR Setup与QPCR

合成生物学、益生菌发酵选种筛选

       基因组学-高通量全流程自动化

       针对这次新冠病毒核酸检测，应用珀金埃尔默实验室自动化机器人整合系统，可进行自动化样品开盖、核酸提取、浓度归一化、PCR反应体系构建和在线QPCR扩增检测：

点击视频了解详情↓

https://v.qq.com/x/page/e3072ddm4g9.html

       系统自动从样品管转移样品到96深孔板，自动添加裂解液，然后自动转移到珀金埃尔默的chemagic 360自动核酸提取仪（自带快速分液器和自我旋转混匀功能）进行磁珠法核酸提取。后续取2ul核酸产物（JANUS G3工作站）交由核酸分析仪进行质控分析（浓度、纯度）。根据质控结果，Janus G3随后进行样品均一化及实时荧光定量PCR反应体系的构建，封好的PCR板（第三方封膜仪）由Roche LightCycler 480完成扩增与基因表达、分型检测。

珀金埃尔默，整体解决方案提供者

       珀金埃尔默是性技术先进公司，也一直致力于不断发展和提升实验室自动化处理技术，以保持实验室自动化产品在生命科学研究领域、疾病筛查和药物筛选实验室应用中的先进性。

       珀金埃尔默凭借80多年的科技创新经验、30多年的自动化研发使用经验，25年自动化机器人系统整合经验。其自动化产品线从常规自动化液体处理到高通量微孔板处理、特定应用及客户定制型解决方案，多种产品及不同费用组合供选择，充分满足客户的多种需求。

       explorer G3自动化机器人整合系统，可实现从样品制备到结果数据分析的高通量全面自动化，全自动处理各个流程，减少人为参与、减少手工操作、避免人为误差。提高了操作的精确度和准确度、确保实验结果的可靠性和重复性；便于用户全程追踪管理整个实验，对实验样品进行溯源，便于分析和进一步实验；可加快操作速度，提高通量，提高实验室工作效率，大大加快研究的实验进程。

扫描下方二维码，即可下载珀金埃尔默实验室自动化机器人整合系统相关资料。

      一项发表在Journal of Neurophysiology上，题为“COVID-19 and olfactory dysfunction: a looming wave of dementia?”的评论表示，新冠感染所导致的嗅觉丧失或许会增加感染者晚年患上痴呆症的风险，或会因此导致未来出现 “痴呆症浪潮”！

图1 评论截图

      嗅觉丧失是新冠病毒感染的标志性症状之一，约有77-85%的感染者因新冠病毒而出现嗅觉丧失或嗅觉异常，大部分人会很快恢复，但是会有一部分人经历持续性嗅觉丧失或嗅觉异常。既往有研究表明，新冠感染者的嗅觉上皮（位于鼻子上部，靠近嗅觉神经进入大脑嗅球的位置）中携带高病毒载量。

      而嗅球是大脑中管理嗅觉并将感觉信息发送到大脑其他区域进行处理的结构，这些大脑区域与学习、记忆和情感有关，正如评论作者Leslie M.Kay博士所说：“所有这一切都意味着嗅球所关涉的远不止嗅觉，它还涉及记忆、环境、情感以及其他许多过程”。也正因为如此，新冠病毒影响的也不只嗅觉障碍，很有可能会影响人的相关认知功能，由于嗅觉上皮细胞靠近嗅球，即使在康复后，新冠感染也可能会影响认知功能。

阿根廷的研究人员与阿尔茨海默症协会联盟合作研究了新冠感染导致的慢性神经精神后遗症，他们对766名年龄在55岁***95岁的人群进行了一年的跟踪调查，对他们进行了一系列的身体、认知、神经、嗅觉等功能测试。研究人员发现，新冠导致的持续性嗅觉丧失是认知障碍的一个重要预测因素。

      评论作者表示：“以前的流行病也支持这样的理论，即病毒入侵神经系统可能是神经退行性病变的触发因素，导致神经功能受损。该审查提供的证据表明，通过新冠病毒感染和免疫反应引入嗅觉神经的炎症和对嗅球的损害也可能导致与嗅觉系统相关的大脑结构退化和认知障碍”。

      新冠病毒感染对神经系统健康的影响越来越明显，休斯顿卫理公会的研究人员的一项***新研究发现，新冠病毒可使人们易患不可逆转的神经系统疾病，加速大脑老化，并增加中风和脑出血的风险。这项研究发表在Ageing Research Reviews上，题为“SARS-CoV-2 and the central nervous system: Emerging insights into hemorrhage-associated neurological consequences and therapeutic considerations”，研究表明，新冠感染会增加个体罹患神经系统疾病、中风、持续性脑损伤的几率。

图2 研究成果（图源：[2]）

研究表明：

■ 血脑屏障的主要成分、星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞能够表达ACE2受体，其与SARS-CoV-2结合并紧密连接，导致神经炎症增加；

■ 脉络丛细胞中的SARS-CoV-2感染可能影响人脑中的神经干细胞生态位，导致长期的神经病理学并发症；

■ 新冠感染者死后，其大脑中活化的小胶质细胞和星形胶质细胞亚群类似于AD等神经退行性疾病的病理特征。

      研究人员推测，新冠病毒感染可以刺激许多致病机制的激活，进而导致新冠感染者出现复杂形式的神经退行性疾病。

图3 新冠感染引起的大脑微出血及其潜在后果（图源：[2]）

此外，研究还表明：

■ 感染新冠病毒之后，感染者可能会出现慢性心血管异常，这或许是由于脑干和延髓区域的微出血相关神经元损伤而导致的；

■ 凝血通路的过度激活导致15-30%对抗凝和抗预防无反应的患者出现静脉血栓栓塞和血栓形成；

■ 新冠感染可能导致涉及脑内皮细胞和微血管系统的CNS微血栓栓塞事件；

■ 微出血是大脑衰老的预测因子，形成大量微出血可能表明新冠患者的大脑加速老化；

■ 微出血在病理上与神经退行性病变、认知障碍和痴呆有关。

      综上，研究表明，新冠感染引起的关键大脑区域微出血有可能加速感染者的大脑衰老，还可能导致复杂且不可逆转的神经退行性疾病，这是认知和运动功能的危险因素。

     片段筛选磁珠作为高通量测序中的关键原料，是影响整体实验结果的重要部分。如何对片段筛选磁珠进行稳定性的规模化生产，也是各类磁珠厂商要面临的问题。洛阳吉恩特生物科技有限公司作为生物磁珠的生产厂家，对片段筛选磁珠的关键工艺进行长期、大量的优化，通过在实际应用场景中的反复测试，目的片段筛选准确，尤其对于200-500bp的片段，筛选效果良好稳定，并且磁珠的磁响应速度快，可以在较短的时间内完成实验，筛选结果可直接进行下游环节。

有关“新冠病毒疫情”不可抗力的通知函

  尊敬的各位客户    ：

感谢各位客户长期以来对我司的信任与支持！

自2021年7月30日，我司所在地重庆市江津区双福街道因新冠疫情德尔塔病毒的突然出现，该病毒传染性极强，潜伏时间长。根据重庆市疾控ZX意见，双福街道依法出台和颁布了各项防控该疫情的紧急命令和措施，致双福街道区域出现了限制/禁止人员、限制/封锁运输、取消各类活动、限制上班等不能预见、不能避免和不能克服的情形。

本次疫情及管制措施属于我方不能预见、不能避免且不能克服的客观情况，属于不可抗力事件，根据我国《合同法》规定及双方合同约定，不可抗力情形，我方合同目的难以实现，可部分或者全部免除责任。

现阶段情况：7月31日双福街道全区域完成DY次核酸检测，8月2日将开展双福街道全区域第二次核酸检测，8月5日将开展双福街道区域第三次核酸检测，待三次核酸检测完毕后，重庆市疾控ZX将给出结论。期间人员、物流交通等进行限制，实行“只进不出”原则。

当疫情结束后我司将积极开展复工复产工作，争取尽早完成客户订单。

特此函告。顺祝商祺！

值此非常时期，希望各位客户考虑我方具体经营状况，给予理解和支持！

                                           重庆创测科技有限公司

                                           2021年8月 2日

伴随本次新型冠状病毒肺炎疫情，诸如“体外膜肺氧合（ECMO）”、“肺部磨玻璃影”、“粪口传播”等专业名词不断出现在大众视野。

其中，“气溶胶”一词在Z初的新闻报道中就被提及，在《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案（试行第六版）》对传播途径的描述中，也增加了“在相对封闭的环境中长时间暴露于高浓度气溶胶情况下存在经气溶胶传播的可能”。

其实，普通大众一般不会接触到上述高浓度气溶胶从而被病毒感染，但对目前Z主要的确诊手段—核酸检测来说，检测人员是除一线医务人员以外Z有可能因为气溶胶而感染的群体。

那么，气溶胶到底是什么？在检测实验中会存在哪些危险？怎么来降低气溶胶引起的感染风险呢？

气溶胶，从广义来说是由固体或液体小质点分散并悬浮在气体介质中形成的胶体分散体系。在生物实验中可以认为是在外力作用下空气与液体样品的液面摩擦，样品的分散体系向空气中扩散形成分散体系。

可以引起气溶胶的操作有离心、剧烈振荡反应管、PCR开盖、移液器反复吸液等，分子实验中常发生的核酸污染假阳性，大多都是由气溶胶污染引起的。

核酸检测和同源测序是本次新冠肺炎确诊的两种主要方式，不断送入检验实验室的患者样本会进行核酸提取和荧光定量PCR或测序，这些实验操作都是基于分子水平的，因此核酸污染也有可能发生。

检测过程中产生的气溶胶可能会带来如下风险：

·引起样本间交叉污染造成假阳性，导致原本没感染的人被误确诊

·带有病毒的气溶胶扩散到实验室中，威胁到实验人员的安全，并可能造成整个实验室污染

·因此，除了要求在P2实验室、人员采用三级生物安全防护等，操作中尽量避免气溶胶的产生可以很大程度上减少上述风险的发生。

一些实验室已经采取措施方式来减少气溶胶的产生，如离心后静置、在生物安全柜中开盖、开盖后再静置、非必须混匀操作关闭仪器混匀功能、选用不需开盖的分析仪器等。

对于检测实验中频繁进行的移液步骤，使用滤芯吸头可以有效防止气溶胶进入移液器和扩散，减少移液过程中的气溶胶风险。

我们可以看到，使用普通吸头时，气溶胶伴随吸液操作进入移液器内部，移液器被污染。使用该移液器继续吸取下一个样品，就会造成样品间的交叉污染。使用被污染移液器进行检测试剂配制时会造成试剂污染，从而污染整个实验体系。如果因为操作不当造成气溶胶扩散，还会使病毒在实验室中扩散，进而威胁实验人员安全，整个实验室也将面临短时关闭来清除污染，这对检验需求巨大的地方来说并不是好消息。

如果使用滤芯吸头，气溶胶可以有效地被阻挡在滤芯下方，无法通过滤芯进入移液器，从而减少气溶胶带来的风险。

其实，一般的分子实验中都应该尽量选用滤芯吸头来降低气溶胶造成的污染风险，从而减少因污染带来的不必要花费，甚至面临实验室关闭的后果。对于包括本次新冠病毒在内的一些致病微生物的分子水平实验，滤芯吸头更能起到保护实验人员安全的作用。

梅特勒-托利多瑞宁（RAININ）拥有全面的移液解决方案，其滤芯吸头产品：

·滤芯采用纯聚乙烯烧结，可有效防止气溶胶污染

·吸头生产过程全自动化，滤芯安装和吸头装盒均由机器完成，全程无人员接触

·无DNA/NDase/RNase/热原/ATP/PCRYZ剂/蛋白质/蛋白酶等外源生物污染物

·多种包装的盒装滤芯吸头，可满足不同实验的操作需求

盒装滤芯吸头

双盒装滤芯吸头

单盒环保补充装滤芯吸头

环保盒装滤芯吸头

瑞宁（RAININ）通用滤芯吸头可匹配市面上主流移液器，目前正在进行买10赠1的优惠促销活动，有兴趣的小伙伴可以联系当地销售或经销商，或拨打客服热线 4008-878-788咨询。