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- 知訫莮孩 2017-09-21 10:52:26
- 相同点:都是半保留复制。 不同点:1、酶不同,体内主要是DNA聚合酶,体外是taq酶;2、温度不同,体内是37度,体外有变性、退火、延伸三种温度;3、解链方式不同,体内采用解旋酶同时消耗ATP,体外采用热变性;4、体内的聚合酶有校对功能,体外的taq酶没有校对功能;4、体内所用引物是RNA,体外一般是DNA引物。
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- 三亚悦来旅馆 2017-09-17 03:52:48
- 【相同点】: 1. 都以DNA为模板 2. 都以四种dNTP为底物 3. 都要DNA聚合酶 4.都需要Mg2+ 5. 都需要解开双链为2条单链 6. 都沿着5‘-3’方向聚合 【不同点】: 1. PCR是DNA复制的体外扩增技术 2. 体内DNA复制半不连续复制,体外PCR连续复制,不产生冈崎片段。 3. 体内DNA复制是8种酶和蛋白共同参与(dnaB,引物酶,rep蛋白,SSB蛋白,DNA旋转酶,DNA聚合酶3,DNA聚合酶1,连接酶),体内DNA复制的聚合酶在高温时会变性,PCR需要耐热的DNA聚合酶(常用TaqDNA聚合酶)。 4. 生物体内DNA复制需要生物体自身的复制,PCR需要经过高温变性,低温退火和中温延伸过程,要经历三十次循环使特定DNA片段放大数百万倍。 5. DNA复制需要校对以保证忠实性,PCR不需要校对。 6. 引物不同:体内DNA复制需要RNA,而且体内引物要除去,PCR需要两个人工合成的DNA引物,不需要切除。 7. PCR对DNA模板要求不高,纯度要求不严格,用量很低,但是引物的设计十分重要,决定了PCR扩增片段的大小和特异性。
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