全部评论(1条)
-
- 日月蝴蝶谷 2017-12-20 00:00:00
- 大学物理实验示波器的实验总结有实验目的、实验结果、实验原理、实验内容等内容。示波器是一种用途十分广泛的电子测量仪器。它能把肉眼看不见的电信号变换成看得见的图像,便于人们研究各种电现象的变化过程。示波器利用狭窄的、由高速电子组成的电子束,打在涂有荧光物质的屏面上,就可产生细小的光点(这是传统的模拟示波器的工作原理)。在被测信号的作用下,电子束就好像一支笔的笔尖,可以在屏面上描绘出被测信号的瞬时值的变化曲线。利用示波器能观察各种不同信号幅度随时间变化的波形曲线,还可以用它测试各种不同的电量,如电压、电流、频率、相位差、调幅度等等。显示电路包括示波管及其控制电路两个部分。示波管是一种特殊的电子管,是示波器一个重要组成部分。示波管由电子枪、偏转系统和荧光屏3个部分组成。由示波管的原理可知,一个直流电压加到一对偏转板上时,将使光点在荧光屏上产生一个固定位移,该位移的大小与所加直流电压成正比。如果分别将两个直流电压同时加到垂直和水平两对偏转板上,则荧光屏上的光点位置就由两个方向的位移所共同决定。
-
赞(2)
回复(0)
热门问答
- 大学物理实验示波器的实验总结有哪些内容?
- 大学物理实验-示波器的使用
- 输入的正弦波峰峰值约10V,周期约5ms,要使显示的波形高度约占5格,共显示2个周期,应分别怎样调节?电压偏转因数和扫描时基因数应分别调节为多大?... 输入的正弦波峰峰值约10V,周期约5ms,要使显示的波形高度约占5格,共显示2个周期,应分别怎样调节?电压偏转因数和扫描时基因数应分别调节为多大? 展开
- 求大学物理实验阴极射线示波器的实验步骤
- 大学物理实验
- 气垫导轨验证牛顿第二定律实验中MUJ-5B计时计数测速仪不能够正常计时时,一般由哪些因素引起?如何检验排除。。。求解
- 大学物理实验——交流电桥,
- 做这个实验时,就很纠结,Z后做数据处理时,测出来的电容竟然有1F多,算那个电容损耗角的正切值时竟然有6000多,不知道是哪错误了,求高手指点
- 大学物理实验偏振光实验通过4分之一玻片实验有什么规律
- 白细胞计数实验的实验总结怎么写
- 化学实验器具总结
- RT初中的,哪位大哥帮帮忙啊!
- 谁有大学物理实验 实验二十二 光导纤维中光速的实验测定的答案
- 大学物理实验光栅衍射实验中光栅300l/mm什么意思
- 大学物理实验分光计的调整和使用的实验原理原理
- ELISA 实验的一些原理总结
ELISA 实验的一些原理总结
ELISA 即酶联免疫吸附测定,是一类常用的免疫酶技术。主要方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,然后利用酶标记(偶联)的抗体或抗原与之孵育,加入显色剂显色,通过酶标仪测定待测物颜色与标准物颜色的差异,绘制出酶活曲线得出待测物浓度。
ELISA 可用于测定抗原,也可用于测定抗体。ELISA 实验中有三种必要的试剂:
① 固相的抗原或抗体(用于结合到固相载体上)
② 标记的抗原或抗体(标记物)
③ 作用的底物(显色剂,用于显色)
四种常见 ELISA方法
1. 直接 ELISA
将抗原固定于 ELISA 板上,然后用酶标抗体直检测抗原。
相较于其它类型的 ELISA 实验,直接 ELISA 实验步骤少,检测速度快,不需要用到二抗,避免了交叉反应,测定结果不容易出错。但是由于直接 ELISA 的抗原不是特异性固定的,样本中的靶蛋白及其他杂质蛋白都会与 ELISA 板结合,实验背景会比较高。而且直接 ELISA 每种靶蛋白都需要准备能够与其特异性结合的一抗,实验不太灵活。另外由于没有使用二抗,信号没有被放大,降低了测定的灵敏度。
2. 间接 ELISA
先将抗原结合到 ELISA 板上,随后分两步进行检测:先加入检测抗体与抗原特异性结合,随后加入酶标二抗检测并利用底物显色。
与直接 ELISA 相比,间接 ELISA 用到酶标二抗,具有更高的灵敏度,也需要更少的标记抗体,更经济。间接 ELISA 还提供了更大的灵活性,因为不同的一抗能够与单一标记的二抗一同使用。间接 ELISA 实验的缺点是存在交叉反应的可能性(酶标二抗直接与抗原结合),可能会增加背景,同时与直接 ELISA 相比,间接 ELISA 实验多了二抗孵育的步骤,实验周期延长。
3. 夹心 ELISA
先将捕获抗体固定于 ELISA 板孔中,然后加入样品,接着加入检测抗体。如果检测抗体是酶标抗体,则可称为直接夹心 ELISA;如果检测抗体不带有标记,则还需要使用酶标二抗与检测抗体结合,这种称为间接夹心 ELISA。
夹心 ELISA 的灵敏度高,它比直接或间接 ELISA 敏感 2-5 倍;同时夹心 ELISA 使用两种特异性抗体与抗原结合,拥有很高的特异性。另外夹心 ELISA 能够通过直接或间接的方式进行检测,灵活性较高。夹心 ELISA 的缺点是对配对抗体要求很高,如果没有标准化的试剂盒或者已经通过测试的配对抗体,则需要进行配对抗体定制并进行优化,因为降低捕获抗体与检测抗体之间的交叉反应是非常重要的。
4. 竞争 ELISA 法
预先将抗原包被在固相载体上,并加入酶标记的特异性抗体。实验时,加入待检抗原(或抗体),如果待检物是抗原,则待检抗原与预先包被在固相载体上的抗原竞争结合酶标抗体;如果待检测物是抗体,则待检抗体就与系统中原有的酶标抗体竞争结合包被在固相载体上的抗原。通过洗涤洗掉被竞争结合的酶标抗体,加底物显色。需要注意的是显色结果与待检抗原(或抗体)的量成反比。
竞争 ELISA 相对以上介绍的三种方法更复杂一些,但以上三种 ELISA 类型都适用于竞争 ELISA 的形式。其主要优点在于可检测不纯的样品,且数据再现性高,但存在整体敏感性和一性较差的问题。
ELISA 常见问题与解决方法
1. 阴性对照出现阳性结果
① 样品、试剂被污染,或加样时操作不当导致相邻孔之间溶液溅洒出现交叉污染——更换试剂,小心操作。
② 酶标板洗涤不——洗板先将抗体溶液倒干净,然后清洗液倒满板孔,确保能充分洗涤。
③ 抗体量过多导致非特异性结合——根据说明书的推荐量使用抗体,稀释抗体到适当浓度。
2.酶标板整体背景高
① 抗体非特异性结合——应确保板孔进行了封闭并且使用的是恰当的封闭液以防止非特异性结合。
② 底物结合浓度过高——对底物进行适当稀释。
③ 反应时间过长——当酶标板显色足够进行吸光度读数时立即使用终止液终止反应,适当缩短显色时间。
④ 底物溶液污染——正常底物溶液应是澄清透明的,若出现黄色或其他颜色表明受到污染,应更换新的底物溶液。
⑤ 底物孵育过程没有避光——底物孵育应在避光条件下进行。
3. 复孔之间重复性差
① 样品数量不整齐,加样时间有长有短——加重复孔时尽量保持加样时间与接近。
② 加样量不一致——样品稀释应充分混匀,并且使用同一移液枪。
③ 洗涤条件、操作人员不一致——重复测定样品时,操作条件、人员应尽可能与上次保持一致。
4. 吸光值偏高或偏低
① 样品中待测抗原含量太低会导致测定结果偏低——可尝试增加样品使用量。
② 加入抗体量不合适会造成结果偏低或偏高——使用建议抗体量或为了使结果更好尽可能调整抗体的适用量。
③ 孵育时间太短导致检测结果偏低——适当延长抗体或抗原的孵育时间,确保待测样品与检测抗体能充分结合。
④ 孵育温度不适合——应抗体在适宜条件下进行孵育(一般 37℃ 孵育 1h )。
ELISA 实验的一些原理总结,我司由具有行业背景和丰富市场经验的业人士组成,于为生命科学研究域提供产品,为广大科研工作者提供服务。 既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求,也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。
- 温度变送器,调节器的检验实验总结
- 电气控制柜型式实验包括哪些内容
- 自养微生物的实验内容
- 大学物理实验--迈克耳逊干涉仪
- 观察等倾干涉条纹时,如改变激光器与分束器P之间的距离;或者改变观察屏E与分束镜P的距离,等倾干涉条纹的级数是否会改变? 圆环状干涉条纹各级的半径是否会改变?
- 求助,大学物理实验迈克尔孙干涉仪
- 大学物理液体表面张力系数的测量实验思考题
- 试验中要求金属环在水中保持水平。不水平的影响
- 大学物理实验弹性模量算的一般是多少
- 大学物理实验【薄玻璃片厚度的测定】
- [实验目的] 使用至少两种方法测定薄玻璃片的厚度 [实验原理] 可参考光杠杆测微原理和光的干涉原理(包括等厚干涉和等倾干涉) 【实验要求】 利用实验室提供的仪器,用至少两种方法测定薄玻璃片的厚度。 【实验器材】 迈克尔逊干涉仪,钠光灯,白炽灯... [实验目的] 使用至少两种方法测定薄玻璃片的厚度 [实验原理] 可参考光杠杆测微原理和光的干涉原理(包括等厚干涉和等倾干涉) 【实验要求】 利用实验室提供的仪器,用至少两种方法测定薄玻璃片的厚度。 【实验器材】 迈克尔逊干涉仪,钠光灯,白炽灯,盖玻片,读数显微镜,劈尖,光杠杆,望远镜。 【实验方案】 自己设计三套实验方案,写出实验步骤,列出数据表格。实验方案应与老师讨论并经同意后方可实施。 【结论】 求出薄玻璃片的厚度d。 注: Z好能回答出 如何用光杠杆测微原理 测薄玻璃片厚度10 展开
9月突出贡献榜
- 单位预算忏悔
- 饿啊地方
- 空中有牛
- 依然相信你会
- 本生(天津)健康科技有限公司
- 猫合宝
- 广东皓天检测仪器有限公司
- 武汉安德信检测设备有限公司
- 上海一科仪器有限公司
- futu888
- 牛牛麻麻2
- 东莞市皓天试验设备有限公司
推荐主页
最新话题
参与评论
登录后参与评论