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提取的植物基因组dna,od值30ng能跑出带来么

得得得190iyMM 2016-10-20 07:56:38 498  浏览
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全部评论(1条)

  • 厄尔多思2 2016-10-21 00:00:00
    一般Marker中亮的条带是100ng,其他的条带是50ng.可以看到你回收之后的条带亮度估计在10ng~30ng左右,如果你的上样体积为10ul,则浓度应该是1ng~3ng/ul,这个浓度是很低的,一般的分光光度计都是测量不出的。 如果做克隆,可以不用管OD值。

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提取的植物基因组dna,od值30ng能跑出带来么
 
2016-10-20 07:56:38 498 1
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我用的是CTAB法提取植物基因组DNA,方法如下:1.称取材料0.2g,加入适量PVP,500µl冰冷CTAB,20µl冰冷RNA酶研磨;2.研磨后加入500µl加热的CTAB,装入1.5ml离心管中... 我用的是CTAB法提取植物基因组DNA,方法如下: 1.称取材料0.2g,加入适量PVP,500µl冰冷CTAB,20µl冰冷RNA酶研磨; 2.研磨后加入500µl加热的CTAB,装入1.5ml离心管中; 3.充分混匀后,65℃水浴1h,期间不时轻缓震荡; 4.12000rpm离心10min,取750µl上清液至另一离心管中; 5.加入等体积的Tris饱和酚:氯仿:异戊醇(25:24:1),摇匀后12000rpm、离心10min; 6.取上层清液650μl,加入等体积氯仿·异戊醇(24:1),摇匀后12000rpm离心10min; 7.取550µl上清液至另一离心管中,加入等体积异丙醇; 10.-20℃放置1h或室温下过夜; 11.12000rpm离心10min,倒弃上清液;70%冰冷乙醇洗涤沉淀2次; 12.倒弃上清液,风干沉淀; 14.加100µlTE溶解DNA,-20℃保存备用。 可是不知道为什么Z后异丙醇沉淀出来的DNA居然是深绿色的,已经接近黑色了。有的时候同样的步骤做出来的又是白色或者黄色的,这到底是怎么回事啊!希望知道的人给我个提示! 会不会是因为和氯仿-异戊醇反应的时间过长?因为我发现我剩下的那些材料过一段时间后都变得很绿。 展开
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