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扫描电镜作为科研人必备“神器”,是迄今为止在物质结构研究中能给出的信息多、分辨本领高的大型分析仪器,通过入射电子轰击样品,激发和收集二次电子获得样品表面形貌像,以及通过特征X射线进行样品成分分析。在医学、材料学、生命科学等领域拥有广泛应用。其中,低电压高分辨力扫描电镜凭借快速、高质量、无畸变的大范围成像成为扫描电镜高端化的发展方向。
传统扫描电镜在观察非导电样品时,需要在样品表面镀导电膜,从而对其进行观察,但导电膜会对样品表面形貌造成一定程度的掩盖,造成成像不清晰、偏差大、分析错误。降低电压,进而不通过镀导电膜层直接观察非导电样品,是减缓荷电效应的有效手段之一。但当电压降低到3kV以下后,会导致电子枪的亮度降低、色差增大,原来细聚焦的电子束“探针”的直径就会大幅增加,再一次造成图像分辨率严重降低。因此,低电压的同时具备高分辨力成为扫描电镜亟需突破的一道难题。
在仪器测试使用时,加速电压(HV/ETH)为常用参数中调节最为普遍的一个。那么加速电压是如何影响成像的效果?本文将以常见样品的成像图结合简短的原理与大家共同分享扫描电镜成像中应如何调整加速电压。
入射电子影响范围
加速电压越高,入射电子的能量能越高,在样品中可穿透和散射的范围越大,伴随着产生的信号范围也越大。如下图模拟,入射电子在1kV加速电压时,在硅中散射范围主要在20nm区域内;在5kV时,散射的主要范围扩大到300nm区域,因此5kV时二次电子可产生的范围从入射点扩大到数百纳米。
样品表面细节分辨
由于加速电压增加,入射电子散射的范围增加,使得二次电子区域扩大,样品表面细节分辨率降低。如下图,在1kV条件下颗粒表面附着的碳纳米管比5kV条件下更加显著。因此对追求纳米级的表面细节分辨建议选择低电压比较合适。
辐射损伤
有些样品易受辐射损伤,如有机高分子,金属有机框架,生物组织等。在实践发现,采用较低的加速电压(如5kV)拍一张图后,原地再拍一张即可,对比前后两张图有没有裂纹、收缩等。如下图,原地再拍一张后的样品前后图明显出现收缩,说明在此加速电压下样品受到了损伤,应当降低入射电子能量。
加速电压越高,携带能量越高,轰击损伤和热损伤都会增加。因此对于易受辐射损伤的样品建议使用较低电压。如下图,在1kV加速电压下,PMMA球体表面圆润饱满,在2kV球体出现了收缩的凹陷;在1kV下,MOF表面平滑,在2kV条件表面出现收缩。
非导电样品的荷电
为避免非导电样品出现荷电影响成像效果,对于此类样品一般会在表面溅射一层几纳米厚的导电薄膜,如C,Au,Pt等,但对于有的样品效果也有限。出现荷电的直接体现为成像时明暗度明显失调或者出现条纹,根本原因在于电子输入和逸出的数量不平衡。如下图所示,在1kV时图像明暗度较均匀,在5kV时存在明显异常亮的荷电影响区域。
成像信噪比
加速电压越高,入射电子携带的能量越高,因此轰击到样品产生的二次电子越多,信号越强,信噪比得到提高,成像直观感觉图像更清晰。如下图,5kV加速电压相对1kV成像视觉效果更为清楚。对于微米级的较大颗粒,在不追求表面细节时,提高加速电压有利于提高信噪比,获得成像效果更为清楚的图片。
FE-1050系列场发射电镜
纳克微束场发射扫描电镜FE-1050系列得益于新一代电子光学镜筒,具备1.5nm(1kV)低电压高分辨的优越性能,即在1kV的低电压下实现快速、高质量、无畸变的大范围成像。
FE-1050系列成像速度在同等条件下相比同类机型至少提高一个数量级,使扫描电镜从低像素“照相机”变成纳米“摄像机”。创新设计的高分辨率电子枪 模式,可对磁性样品、不导电样品以及电子束敏感样品的低电压成像量身订制解决方案;在样品导电性不佳的情况下,低电压能减缓样品的荷电效应,减轻图像上异常变亮、畸变、位移、模糊等情况,在观测生物样品时也可减少对样品造成的损伤。
该机型硬件的高通量设计以及软件的集成性开发,开创了国产扫描电镜新设计、新用途、新采集模式,实现了扫描电镜变革性发展。
作为70年央企钢研纳克(股票代码300797)的控股子公司,纳克微束潜心研发,主攻显微成像,为材料、半导体、生物医疗等研究和应用科学等领域提供综合显微成像解决方案。团队研发人员占比超过60%,通过十余年成熟的技术积淀及团队创新能力,在设计理念、关键环节、核心技术等方面超前布局,成为国内仪器公司中第 一梯队。
本文部分内容转载自:中国科大理化科学实验中心
- 样品导电性对扫描电镜成像的影响
样品制备在扫描电镜分析中占有重要地位,它关系到微观图像的观察效果。如果制备的样品不适用于扫描电镜的观察条件,则很难拍摄出好的图像。
众所周知,理想的扫描电镜样品一定是导电性非常好的,例如金颗粒、锡球等金属类材料。对于不导电的样品,如生物材料、纸张、塑料和陶瓷等,容易造成放电、图像漂移等现象,这些都是荷电效应产生的。
产生荷电效应的原因
导电性良好的样品在受到高能电子束轰击后多余的电子会通过导电胶和导电样品台被直接导入大地,保持样品表面的电势一直为零。
如果试样不导电或者虽然导电但粘贴不好,随着观察时间增加,入射电子束会导致样品的表面积累负电荷,该层负电荷会对入射电子束和激发的信号产生影响,造成图像扭曲,局部过亮失去细节影响图像的观察,甚至完全无法观察。样品表面的荷电效应是可以改变或甚至破坏样品的细节,从而影响电镜观察的结果和结论。
如何减缓荷电效应
由于材料不同,荷电效应的可见速度有很大差异。如下是一些可以减缓荷电效应的方法:
1. 用喷金设备溅射金膜涂覆样品以减缓荷电。金膜越厚,效果越好。但是需要注意不要用金膜遮盖样品表面的细节。
2. 降低样品杯真空。通过选择飞纳电镜的降低荷电效应样品杯,可以在样品杯释放稳定的空气分子形成低真空区,高能的电子束可以将空气分子电离形成正离子,试样表面累积的负电荷通过与正离子中和使样品表面保持中性,从而可以采集到稳定和清晰的图像。
3. 降低拍照电流和电子束加速电压。
4. 在样品的非重要部分通过调整图像设置(例如焦点和对比度)来减少观察时间。当设置到正确合适的模式,移动到感兴趣的区域,立即拍照并再次离开。
产生荷电效应 飞纳电镜低真空 喷金后
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