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紫外可见分光光度计是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对物质进行定性和定量分析的仪器。在生物制药、精细化工、环境监测等领域有着广泛应用。
1、保护光源
光源灯有一定的寿命,紫外可见分光光度计不工作时不要开灯,若工作间歇时间短,可不关灯。一旦停机,则要待灯冷却后再重新启动,并预热15min。灯泡发黑或亮度明显减弱或不稳定时,就及时更换。经紫外光照射后形成结痕可用无水乙醇去除。
2、保证合适的工作环境
温度和湿度是影响紫外可见分光光度计性能的重要因素。不适宜的温度和湿度可引起机械部件的锈蚀,使金属镜面的光洁度下降,引起仪器机械部分的误差或性能下降;造成光栅、反射镜、聚焦镜等光学部件的铝膜锈蚀,产生光能不足、杂散光、噪声等;甚至使仪器停止工作,从而影响紫外可见分光光度计寿命。维护保养时应定期加以校正温度和湿度。
实验室,特别是地处南方地区的实验室,应具备四季恒温的仪器室,配备恒温设备。环境中的尘埃和腐蚀性气体也可以影响机械系统的灵活性、降低各种限位开关、按键、光电耦合器的可靠性,也是造成光学部件铝膜锈蚀的原因之一。因此必须定期清洁,保障环境和紫外可见分光光度计内卫生条件,防尘。
3、定期除尘、调校
紫外可见分光光度计使用一定时间后,内部会积累一定量的尘埃,Z好由维修工程师或在工程师指导下定期开启紫外可见分光光度计外罩对内部进行除尘工作,同时将各发热元件的散热器重新紧固,对光学盒的密封窗口进行清洁,必要时对光路进行校准,对机械部分进行清洁和必要的润滑,Z后恢复原状,再进行一些必要的检测、调校和记录。
4、正确使用比色皿
拿比色皿时,手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,不要碰比色皿的透光面,以免沾污。清洗比色皿时,先用水冲洗,再用蒸馏水洗净。若被比色皿被有机物沾污,可用盐酸-乙醇混合洗涤液(1:2)浸泡片刻,再用水冲洗。每次做完实验应立即洗净比色皿。比色皿外壁的水用擦镜纸或细软的吸水纸吸干,以保护透光面。
测定有色溶液吸光度时,一定要用有色溶液洗比色皿内壁几次,以免改变有色溶液的浓度。在测定一系列溶液的吸光度时,通常都按由稀到浓的顺序测定,以减少测量误差。
若紫外可见分光光度计噪音比较大,有可能是光源灯泡使用时间超过寿命期,可更换光源灯泡。若自检时提示波长自检出错,有可能是自检过程中打开过仪器样品室的盖子,可关上仪器样品室盖子,重新自检。
1、校准前,应使紫外可见分光光度计开机预热足够时间稳定后进行,一般至少30min后进行。
2、采用标准物质时必须注意应在标准值的复现条件(即标准物质规定的使用条件)下进行校准,否则会产生错误的校准结果。例如,使用分光光度计标准溶液进行校准时,必须满足两个条件:①被校准紫外可见分光光度计的光谱带宽应该是2nm,若紫外可见分光光度计光谱带宽不能调节并大于2nm,则标准溶液给出的值不适用,应该采用修正值;②校准时所采用的两只石英比色皿应该是内径(10±0.2)mm,并且在235nm、257nm、313nm、350nm处,具有很好的配对性,这样才能复现标准值。
3、使用标准溶液来校准时,还必须特别注意校准测量时的实验室温度,因为这些标准物质在不同温度下有不同的透射比标准值。
4、标准用的标准物质必须在说明书规定条件下保存,例如干涉滤光片应该保在干燥洁净的环境中,以免表面被污染、受潮开胶或霉变等。所有标准物质均应在证书上注明的有效期内使用。
5、选用的中性滤光片标准值的不确定度一定要符合传递标准。校准时,要注意标准滤光片的方向性。
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