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由于准确的实验结果,较快的运行速度以及简单的操作,使得荧光定量PCR越来越受到分子分子生物学研究者的青睐。市面上有很多种类很多PCR,让人眼花缭乱,使得选择变得异常困难。不仅要向实验室成员征询意见,对实验室目前甚至以后的需求进行而且要对实验室的预算进行平衡,更加要对各种极富诱惑力的宣传知识进行详细的研究。那么面对各种不同性能的产品,到底应该怎样选择呢?
首先为大家介绍荧光定量PCR的两个误区:
一、仪器通道越多越好
随着PCR技术的成熟运用,荧光定量PCR仪通道越来越多。4通道、5通道甚至6通道荧光定量PCR仪被各个厂家推出。其实有些荧光定量PCR的检测通道多,但有效通道却没有那么多,有效通道至关重要。还需要注意有的荧光定量PCR的检测通道是只为厂家的专用的荧光染料或试剂开放的。而且使用校正染料可能会使得后期的使用成本增加。因此对于多重荧光定量PCR的通道数的选择应该从实验室的实际情况出发。
二、real-timePCR仪无需梯度功能
其实,如果使用有梯度功能的荧光定量PCR,那么以往多次实验才能完成的优化过程现在能够一次完成,使得摸索?PCR反应条件的繁琐实验简化了,不仅使得效率得到提高,时间得到了节约,而且节约了成本。
那么选择的关注点又是什么:
1.仪器的检测通量
当对定量PCR仪进行购买时,不同通量的仪器按照实验室的需求来选择,96孔的通量足够进行一般的基因表达研究或病原体检测,若需要寻找要新药靶点和疾病标记,那么就选择384孔板的仪器。
2.硬件设计特点
荧光定量PCR仪主要有传统的96孔板式、创新的离心式等,每种设计既有优点又有缺憾。
3.运行速度
在荧光定量PCR仪的众多技术参数中,厂家喜欢大力宣传的指标就是升降温速度。更快的升降温,能够使得反应进行的时间缩短,而且使得可能的非特异性结合反应的时间缩短了,提高使PCR的特异性得到提高。能快速运行的荧光定量PCR仪能够更好的完成实验。
4.灵活性
定量PCR仪能够升级和更换模块,非常的灵活。
06-19
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