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毛细管电泳仪是通过高压直流电场为驱动力,通过弹性石英毛细管为分离通道,以样品中各组分的淌度(单位电场强度下的迁移速度)和分配行为的差异为依据来使各组分分离实现的。下面就让小编带你了解一下毛细管电泳仪的历史、结构及原理。
历史
1967年,Zxian在3mm直径毛细管中作自由溶液的区带电泳。
1974年,用200~ 500μm内径的毛细管作电泳分离。
1981年,用75μm内径玻璃毛细管柱,加30kV电压实现电泳。
1984年,引入了胶束毛细管电动力学色谱的方法。
1987年,实现了毛细管等电聚焦及毛细管凝胶电泳。
1988年,首次利用CE作微里物质提取,并把激光引入CE检测器,大大提高了检测灵敏度。
构造
直流高压电源、毛细管、电极和电极槽、冲洗进样系统、检测系统和数据处理系统等为毛细管电泳仪的主要部件。有与毛细管内相同的背景缓冲液装在两个缓冲液瓶内,在两个缓冲液瓶中放入毛细管两端。在两个缓冲液瓶中分别插上铂金电极。在实验过程中,应当保持两个缓冲液瓶内的背景电解质溶液在同一液面水平,并且毛细管两端插入到液面下的深度也应该相同,避免毛细管两端因压力差而产生虹吸效应导致溶液的流动,从而对分析结果产生影响。
毛细血管电泳仪结构
1.检测器:紫外或激光诱导荧光检测器.
2.常用的CE缓冲体系
3. 进样技术:
1)电动进样(电迁移进样)
2)气动进样(压差进样) {进样端加压,出口端减压,虹吸作用}
4. 高压电源:0~30KV;200~300uA
5.毛细管柱:通常为圆管型,应当是化学和电惰性的,可透光,有一定柔性,容易弯曲。
材料:(1)石英:Z常用,基本成分是二氧化硅,分为天然和人造两类。内径:内径小于140μm,有较好的散热,目前使用的大多在25~75μm
(2)玻璃:电渗Z强,然而却有杂质。
(3)聚四氟乙烯:可透紫外光,电渗很弱。缺点是管子内径不均,对样品有吸附,热传导差等。
原理
毛细管电泳柱中装载电解液运行时,因为管壁存在硅羟基会有电渗流产生,电渗流对整个毛细管柱内的溶液定向移动起到推动作用。其分离原理是在电场作用下离子迁移速度的不同而不是基于组分在流动相和固定相中分配系数,为其和一般色谱技术的主要分别。
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