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不同的物质在一定的电场强度下,因为所带电荷不同,所以受到的引力不同,往相反的电极泳动的速度不同从而达到分离的目的。利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离目的的技术,称为电泳技术。
使用方法
1.使用去污剂反复擦洗并晒干凝胶玻璃板,再使用无水乙醇将其表面插干净。
2.在对胶进行制备时,根据凝胶厚度来挑选合适的电泳玻璃,在平板内芯外侧的方向,顺着内芯一侧的紧固侧板小心地将凹形玻璃板放入。
3.操作台面必须平整,当在内芯内放入玻璃后,在对凹、平板的底部边缘都和台面对齐进行确认后,再将旋钮旋紧。值得注意的是,密封的重要条件就是使凹、平板的底部边缘都和台面对齐。
4.在制胶底座上安装装好玻璃板的内芯,再将吊扣压紧。
5.缓慢地往凝胶腔内注入配制好的分离胶溶液,注意要避免气泡产生。
6.在灌完分离胶后,为了确保分离胶的无氧聚合,使用滴管将一层正丁醇溶液或蒸馏水注在分离胶表面。
7.当分离胶聚合后,倒出并且用吸纸吸干表面的正丁醇溶液或蒸馏水。
8.在分离胶表面注入高度距离凹板下沿2-3mm或者和其平齐的浓缩胶。
9.将相应的加样梳插入到凝胶内。
10.当凝胶聚合后,将梳子取出,将搭钩打开,在电泳槽底槽中放入由制胶器中取出的内芯,制胶过程结束。
注意事项
1.在对玻璃板进行组装时,没有必要将下部的两个螺栓拧得过紧。
2,对于小分子量蛋白质,浓度高的胶效果更佳,对于大分子量蛋白质,浓度低的胶效果更好。
3.TEMED为促进聚丙烯酰胺聚合的加速剂,在配置分离胶时,每个胶板滴两滴会有不错的效果。
4.电极缓冲液配制麻烦,占体积,用量多。
5.丙烯酰胺是神经性毒剂,能刺激皮肤,操作时应当将手套戴上。
6.为了防止铝板的表面长期堆积污垢不能充分接触玻璃板,需要在使用完后及时的清理。
7.产品是易碎物,需要轻拿轻放。
06-27
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